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创伤性应激对安格斯牛肉品质影响机制研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-15页
第一章 文献综述第15-32页
   ·引言第15页
   ·牛肉肉质性状的重要性和意义第15-16页
   ·物理因素在牛肉肉质性状中的作用第16-20页
     ·肌肉的结构第16-17页
     ·肌肉蛋白第17-18页
     ·结缔组织第18-19页
     ·脂肪和肉的风味第19页
     ·大理石花纹第19-20页
   ·影响牛肉肉质性状的因素第20-21页
     ·品种和性别第20页
     ·饲养、屠宰体重和年龄第20-21页
   ·屠宰后牛肉的变化第21-22页
   ·牛肉的嫩化机制第22页
   ·牛肉嫩度测量的方法第22-24页
     ·直接测量方法第22-23页
     ·间接测量方法第23-24页
   ·功能基因组学在牛肉性状研究中的应用第24-30页
     ·功能基因组学的意义第24-25页
     ·牛功能基因组学研究的意义第25页
     ·进行功能基因组学研究的分子工具第25-27页
     ·功能基因组学在牛肉质性状研究中的应用第27-30页
   ·研究目的和内容第30-32页
第二章 创伤性应激引起牛肉品质变化的研究第32-39页
   ·试验材料第32-33页
     ·试验动物第32页
     ·采样第32-33页
     ·主要试剂和仪器第33页
   ·试验方法第33-34页
     ·肉质性状测定第33页
     ·肉质性状测定数据分析第33-34页
   ·结果与分析第34-37页
     ·试验组和对照组之间牛肉品质的比较分析第34页
     ·试验组内牛肉品质比较分析第34-37页
   ·讨论第37-38页
     ·牛肉的肉质性状第37页
     ·引起牛肉品质变化的原因分析第37-38页
   ·小结第38-39页
第三章 创伤性应激引起牛肉嫩度变化的基因表达谱比较分析第39-80页
   ·试验材料第39-41页
     ·试验动物第39页
     ·采样第39-40页
     ·牛全基因组芯片第40页
     ·主要试剂第40页
     ·主要仪器第40-41页
     ·主要分子生物学软件第41页
   ·试验方法第41-51页
     ·Agilent bovine microarray 芯片试验操作流程第41-46页
     ·芯片试验结果数据分析第46-48页
     ·qRT-PCR 引物设计及合成第48页
     ·qRT-PCR 验证基因芯片结果第48-51页
   ·结果和分析第51-72页
     ·背最长肌中提取总 RNA 的质量控制第51-53页
     ·cDNA 基因芯片的质量控制第53-54页
     ·芯片标准化处理第54-56页
     ·差异表达基因第56-58页
     ·差异表达基因的聚类分析第58-59页
     ·差异表达基因的功能富集分析第59页
     ·差异表达基因的调控网络构建第59-69页
     ·qRT-PCR 验证结果第69-72页
   ·讨论第72-78页
     ·基因芯片的使用和选择第72页
     ·试验动物的来源及试验目的意义第72-73页
     ·基因芯片试验设计第73页
     ·芯片标准化处理的方法和策略第73-74页
     ·基因芯片数据分析方法第74页
     ·差异表达基因的筛选标准第74页
     ·基因芯片表达谱分析结果验证第74-75页
     ·创伤性应激引起牛肉肉质变化的分子机制第75-78页
   ·小结第78-80页
第四章 创伤性应激引起牛肉嫩度变化的 miRNA表达谱分析第80-109页
   ·试验材料第80-81页
     ·试验动物及样品的采集第80页
     ·miRNA 基因芯片第80页
     ·主要试剂和仪器第80-81页
     ·主要分子生物学软件第81页
   ·试验方法第81-86页
     ·Exiqon 芯片试验操作流程第81-84页
     ·qRT-PCR 验证差异芯片结果第84-85页
     ·数据挖掘第85-86页
   ·结果与分析第86-107页
     ·背最长肌中总 RNA(包含 miRNA)的质量控制第86页
     ·miRNA 基因芯片杂交的质量控制第86页
     ·芯片标准化处理第86-91页
     ·背最长肌中差异表达的 miRNA第91-92页
     ·差异表达 miRNA 的聚类分析第92页
     ·q-RT-PCR 验证 miRNA 基因芯片结果第92-94页
     ·miRNA 调控目标基因的预测第94页
     ·miRNA 调控目标基因的表达情况分析第94页
     ·miRNA 目标基因的功能分析第94-95页
     ·miRNA 目标基因的功能富集分析第95-99页
     ·miRNA 目标基因的调控网络构建第99-107页
   ·讨论第107-108页
   ·小结第108-109页
第五章 强烈应激引起牛肉嫩度变化的 DNA 甲基化分析第109-122页
   ·试验材料第109-110页
     ·试验动物及样品的采集第109页
     ·主要试剂第109-110页
     ·主要仪器第110页
     ·主要分子生物学软件第110页
   ·试验方法第110-115页
     ·DNA 的提取第110-111页
     ·DNA 质量检测第111页
     ·用亚硫酸氢盐处理 DNA第111-112页
     ·CpG 含量高的基因的挑选第112页
     ·DNA 甲基化分析所用引物的设计第112-113页
     ·PCR 过程第113-114页
     ·PCR 质量检测第114页
     ·焦磷酸盐测序(pyrosequencing)第114-115页
     ·结果分析第115页
   ·结果与分析第115-120页
     ·DNA 浓度和质量第115页
     ·关键基因的 CpG 岛分布第115-117页
     ·PCR 质量检测第117-118页
     ·焦磷酸盐测序测定的关键基因 DNA 甲基化结果第118-120页
   ·讨论第120-121页
   ·小结第121-122页
第六章 不同嫩度牛肉的基因表达谱分析第122-146页
   ·试验材料第122页
     ·试验动物第122页
     ·采样第122页
     ·牛全基因组芯片第122页
     ·主要试剂第122页
     ·主要仪器第122页
     ·主要分子生物学软件第122页
   ·试验方法第122-123页
     ·Agilent bovine microarray 芯片试验操作流程第122页
     ·芯片试验结果数据分析第122-123页
     ·qRT-PCR 引物设计及合成第123页
     ·qRT-PCR 验证基因芯片结果第123页
   ·结果和分析第123-140页
     ·背最长肌中提取总 RNA 的质量控制第123-124页
     ·cDNA 基因芯片的质量控制第124-127页
     ·芯片标准化处理第127-129页
     ·差异表达基因第129-131页
     ·差异表达基因的聚类分析第131页
     ·差异表达基因的功能富集分析第131页
     ·差异表达基因的调控网络构建第131-140页
     ·qRT-PCR 验证结果第140页
   ·讨论第140-145页
   ·小结第145-146页
第七章 结论第146-148页
   ·研究结论第146页
   ·创新点第146-147页
   ·下一步工作第147-148页
参考文献第148-167页
附录第167-179页
英文缩略表第179-180页
致谢第180-182页
作者简介第182页

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