| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-27页 |
| ·Bt研究进展 | 第9-14页 |
| ·Bt杀虫晶体蛋白的结构与功能关系 | 第9-11页 |
| ·Bt杀虫机理 | 第11-13页 |
| ·害虫对Bt的抗性发展 | 第13-14页 |
| ·Bt受体蛋白与昆虫抗性的研究概况 | 第14-21页 |
| ·Bt受体蛋白的分离鉴定 | 第15-16页 |
| ·Bt受体蛋白与抗性产生的关系 | 第16-17页 |
| ·小菜蛾结合位点模型 | 第17-19页 |
| ·毒素受体蛋白基因序列特征 | 第19-21页 |
| ·蛋白转导研究最新进展 | 第21-26页 |
| ·PTD的发现 | 第22-24页 |
| ·PTD的转导机制 | 第24页 |
| ·PTD融合分子制备 | 第24-25页 |
| ·PTD应用概述 | 第25-26页 |
| ·研究目的意义 | 第26-27页 |
| ·研究目的 | 第26页 |
| ·研究意义 | 第26页 |
| ·研究内容 | 第26-27页 |
| 第二章 小菜蛾室内继代饲养和抗性选育 | 第27-41页 |
| ·小菜蛾人工继代饲养技术研究 | 第27-31页 |
| ·材料和方法 | 第27-28页 |
| ·结果和分析 | 第28-31页 |
| ·小结和讨论 | 第31页 |
| ·CrylAc毒蛋白和IBt制剂对小菜蛾的抗性选育及生物学参数影响 | 第31-36页 |
| ·材料与方法 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-36页 |
| ·讨论 | 第36页 |
| ·Bt对抗性及敏感小菜蛾拒食活性研究 | 第36-41页 |
| ·材料与方法 | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-40页 |
| ·小结与讨论 | 第40-41页 |
| 第三章 小菜蛾Bt毒素受体蛋白基因的克隆及序列分析 | 第41-86页 |
| ·材料和方法 | 第41-51页 |
| ·试验材料 | 第41-44页 |
| ·试验方法 | 第44-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-84页 |
| ·编码APN1的基因克隆、鉴定及序列分析 | 第51-55页 |
| ·编码APN2的基因克隆、鉴定及序列分析 | 第55-76页 |
| ·编码APN4的基因克隆、鉴定及序列分析 | 第76-82页 |
| ·编码类钙粘蛋白基因的克隆、鉴定及序列分析 | 第82-84页 |
| ·讨论 | 第84-86页 |
| 第四章 PTD与CrylAc基因融合载体构建及表达 | 第86-103页 |
| ·实验材料及相关仪器 | 第86-88页 |
| ·菌株与质粒 | 第86页 |
| ·试剂、培养基与主要缓冲液 | 第86-88页 |
| ·培养基 | 第88页 |
| ·仪器设备 | 第88页 |
| ·供试昆虫 | 第88页 |
| ·实验方法 | 第88-92页 |
| ·引物设计和合成 | 第88-89页 |
| ·CrylAc基因模板制备 | 第89页 |
| ·Cry1Ac结构域基因的PCR扩增 | 第89页 |
| ·PCR及酶切产物的纯化、回收 | 第89页 |
| ·PTD、CrylAc与pET-21b载体的连接 | 第89-90页 |
| ·大肠杆菌CaCl2感受态细胞制备 | 第90页 |
| ·连接产物转化 | 第90页 |
| ·提取质粒DNA | 第90-91页 |
| ·酶切及PCR检测 | 第91页 |
| ·序列测定及分析 | 第91页 |
| ·融合基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的诱导表达 | 第91页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳检测 | 第91-92页 |
| ·表达蛋白的免疫检测 | 第92页 |
| ·蛋白纯化 | 第92页 |
| ·融合蛋白的毒力测定 | 第92页 |
| ·结果与分析 | 第92-101页 |
| ·PTD-CrylAc融合表达载体构建 | 第92-97页 |
| ·融合蛋白的表达纯化 | 第97-101页 |
| ·融合蛋白的活性测定 | 第101页 |
| ·讨论 | 第101-103页 |
| 第五章 结论 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 附录 | 第114-123页 |
| 作者简历 | 第123页 |
