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酯合成脂肪酶高产菌的选育及其产酶发酵调控的研究

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-13页
第一章 绪论第13-28页
   ·概述第13-14页
     ·脂肪酶简介第13页
     ·脂肪酶的非水相催化第13-14页
   ·脂肪酶的生产技术与研究进展第14-20页
     ·脂肪酶高产菌的选育第14-15页
     ·脂肪酶活力的测定与筛选方法第15-16页
     ·脂肪酶的生产第16-17页
     ·真菌脂肪酶生产的调节第17-20页
     ·具有酯合成能力的脂肪酶第20页
   ·菌体形态对丝状真菌产物形成的影响第20-23页
     ·液态发酵中真菌形态学(MORPHOLOGY)概念第20-21页
     ·菌体形态变化对发酵过程的影响第21-23页
   ·脂肪酶在酯合成中的应用第23-25页
     ·生物柴油生产和油脂改性第23-24页
     ·生物芳香酯生产第24页
     ·全细胞脂肪酶用于酯合成反应第24-25页
   ·本论文的主要研究内容第25-28页
     ·论文的立题意义第25-26页
     ·课题来源第26页
     ·论文的主要研究内容第26-28页
第二章 具有酯合成活性脂肪酶快速筛选方法的建立*第28-37页
   ·前言第28-30页
   ·材料与方法第30-31页
     ·仪器与试剂第30页
     ·方法第30-31页
   ·结果与讨论第31-36页
     ·分光光度法测定脂肪酶合成活性可行性的验证第31-33页
     ·扩散阻力的影响第33页
     ·底物浓度的确定第33-34页
     ·加酶量的确定第34-35页
     ·光度法用于全细胞脂肪酶筛选第35页
     ·光度法用于96 微孔板中酶活测定第35-36页
   ·本章结论第36-37页
第三章 高酯合成活性脂肪酶生产菌的选育及发酵条件的研究*第37-55页
   ·前言第37-38页
   ·材料与方法第38-40页
     ·仪器与试剂第38-39页
     ·菌种第39页
     ·培养基和培养条件第39页
     ·方法第39-40页
   ·结果与讨论第40-54页
     ·高酯合成活性脂肪酶产生菌的诱变筛选第40-43页
       ·N+注入剂量的的确定第40-42页
       ·N+注入和亚硝基胍二次诱变第42页
       ·传代稳定性实验第42-43页
     ·培养条件对高酯活性脂肪酶生产的影响第43-54页
       ·田口设计对培养基进行初步优化第44-47页
       ·响应面对培养条件进行优化第47-52页
       ·R. chinensisY92-M 产全细胞脂肪酶的最佳培养条件的确定第52页
       ·R. chinensisY92-M 产全细胞脂肪酶产酶过程与出发菌之间的比较第52-54页
   ·本章结论第54-55页
第四章 华根霉全细胞脂肪酶合成与调控的研究第55-71页
   ·前言第55页
   ·材料与方法第55-56页
     ·仪器与试剂第55页
     ·菌种第55-56页
     ·培养基和培养条件第56页
     ·方法第56页
       ·脂肪酶合成活力测定第56页
       ·脂肪酶水解活力测定第56页
       ·发酵体系中脂肪酸含量的测定第56页
       ·膜结合粗蛋白的制备与分析第56页
   ·结果与讨论第56-70页
     ·R. chinensis Y92-M 全细胞脂肪酶的产酶机制研究第56-68页
       ·不同油脂及脂肪酸添加对全细胞脂肪酶生产及菌体生长的影响第57-60页
       ·三油酸甘油酯对全细胞脂肪酶生产及菌体生长的影响第60-62页
       ·油脂对经洗涤的菌丝体产脂肪酶的诱导作用第62-63页
       ·具有水解活性和合成活性脂肪酶在细胞中的分布第63-65页
       ·脂肪酶变构调节对产酶过程的分析第65-68页
     ·具有酯合成脂肪酶的生产调节第68-70页
       ·摇瓶中油脂添加策略对产酶的影响第68-69页
       ·发酵罐中油脂添加策略对产酶的影响第69-70页
   ·本章结论第70-71页
第五章 两尺度菌丝形态控制在酯合成活性脂肪酶生产中的作用第71-89页
   ·前言第71-72页
   ·材料与方法第72-74页
     ·仪器与试剂第72页
     ·菌种第72页
     ·培养基和培养条件第72页
     ·方法第72-74页
       ·脂肪酶合成活力测定第72页
       ·发酵体系中脂肪酸含量的测定第72页
       ·发酵液中糖类碳源含量测定第72页
       ·菌体形态参数测定第72-73页
       ·发酵液流变特性的测定第73-74页
   ·结果与讨论第74-88页
     ·不同培养条件下的菌体形态第74-75页
     ·摇瓶过程中菌体形态变化对脂肪酶生产的影响第75-81页
       ·菌丝微观形态及参数变化第76-78页
       ·发酵过程的主要参数及产酶变化第78-81页
     ·发酵罐中菌体形态对产酶的影响第81-86页
       ·不同菌体形态发酵过程参数及产酶变化第82-84页
       ·发酵过程中发酵液流变特性的变化对产酶的影响第84-86页
     ·发酵罐中利用载体固定化保持菌体形态第86-88页
   ·本章结论第88-89页
第六章 R. chinensis Y92-M 全细胞脂肪酶非水相催化特性的研究第89-100页
   ·前言第89页
   ·材料与方法第89-91页
     ·仪器与试剂第89页
     ·菌种第89-90页
     ·培养基和培养条件第90页
     ·方法第90-91页
       ·脂肪酶合成活力测定(Method 1)第90页
       ·脂肪酶合成活力测定(Method 2)第90页
       ·全细胞脂肪酶催化脂肪酸酯的合成第90页
       ·全细胞脂肪酶催化生物柴油的合成第90-91页
   ·结果与讨论第91-99页
     ·Y92-M 全细胞脂肪酶非水相中合成活性与商品化脂肪酶之间的比较第91页
     ·Y92-M 全细胞脂肪酶催化脂肪酸酯的合成第91-94页
       ·Y92-M 全细胞脂肪酶对脂肪酸链的选择性第91-93页
       ·无溶剂体系中Y92-M 全细胞脂肪酶催化脂肪酸酯的合成第93-94页
     ·Y92-M 全细胞脂肪酶催化生物柴油的生产第94-99页
       ·Y92-M 全细胞脂肪酶催化豆油生产生物柴油第94-95页
       ·Y92-M 全细胞脂肪酶催化其它油酯生产生物柴油第95-96页
       ·固定化细胞催化生物柴油的生产第96-99页
   ·本章小结第99-100页
结论与展望第100-103页
 本论文主要结论第100-102页
 展望第102-103页
论文的创新点第103-104页
致谢第104-105页
参考文献第105-121页
博士在读期间已发表(含待发表)论文第121页

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