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玉米温敏自交不亲和系HE97的生态学遗传机理研究及相关基因的克隆

致谢第1-8页
摘要第8-9页
第一章 文献综述第9-22页
 1 禾本科植物自交不亲和性及机理研究进展第9-15页
   ·植物自交不亲和性的普遍性和分类第9页
   ·孢子体自交不亲和的分子机理及研究进展第9-10页
     ·孢子体自交不亲和表现第9页
     ·孢子体自交不亲和雌雄S 决定子的鉴定过程及跨膜信号转导第9-10页
   ·配子体自交不亲和的分子机理及研究进展第10-14页
     ·以S-RNase 为基础的SI 信号转导的研究进展第11-13页
       ·SI 信号分子—S-RNase第11-12页
       ·信号分子的接受体——花粉S 蛋白第12页
       ·以S-RNase 为基础的细胞信号转导途径第12-13页
     ·罂粟科SI 信号转导的研究进展第13-14页
   ·禾本科自交不亲和性机理第14页
   ·玉米生态核雄性不育的研究进展第14-15页
   ·自交不亲和在农作物种子生产中的应用第15页
 2 蛋白质磷酸化第15-16页
 3 基因克隆第16-22页
   ·概述第16-17页
   ·RACE 的基本原理第17-19页
   ·RACE 与生物信息学资源的结合——“电子”cDNA 文库筛选第19-20页
   ·候选基因的功能验证第20-22页
第二章 玉米温敏自交不亲和性的生态学机制研究第22-28页
 引言第22页
 1 材料与方法第22-24页
   ·材料第22页
   ·HE97 亲和性转换机制的田间鉴定试验第22-23页
   ·光照处理实验第23-24页
     ·实验地点及处理第23页
     ·田间试验设计第23页
     ·田间调查及数据记录第23-24页
 2 结果与分析第24-27页
   ·生态型自交不亲和系HE97 的形态学鉴定第24-25页
   ·HE97 的亲和性转换区间与光温因子的关系分析第25-26页
   ·不同光照处理对HE97 结实性的影响第26-27页
 3 讨论第27-28页
第三章 玉米温敏自交不亲和基因的定位第28-33页
 引言第28页
 1 材料与方法第28-30页
   ·试验材料第28页
   ·田间试验第28页
   ·遗传连锁图的构建及基因定位第28-30页
     ·DNA 的提取第28-29页
     ·PCR 扩增及扩增产物检测步骤第29-30页
     ·遗传连锁图谱的构建与QTL 分析第30页
     ·目标基因的定位第30页
 2 结果与分析第30-32页
   ·F_2群体的田间亲和性表现第30-31页
   ·遗传连锁图谱构建与QTL 分析第31-32页
   ·目标性状的质量基因定位第32页
 3 讨论第32-33页
第四章 玉米温敏自交不亲和相关基因类CIPKS 的克隆及表达分析第33-53页
 引言第33页
 1 材料和方法第33-42页
   ·实验材料第33页
   ·实验方法第33-42页
     ·实验材料的种植、取样和鉴定第33页
     ·总RNA 的抽提第33-34页
     ·RNA 含量和质量的检测第34页
     ·3’端基因序列扩增第34-38页
       ·cDNA 第一链的合成第34-35页
       ·第一次 PCR 扩增第35-36页
       ·第二次PCR 扩增第36页
       ·电泳检测第36页
       ·PCR 产物的纯化第36页
       ·PCR 产物的连接和转化第36-37页
       ·PCR 检测阳性克隆第37-38页
       ·DNA 序列测定和分析第38页
     ·类CIPKs 基因生物信息学分析第38-40页
       ·类CIPKs 基因的EST 序列电子延伸第38页
       ·Contig1E6 PCR 扩增第38-39页
       ·PCR 产物的纯化:同1.2.4.5第39页
       ·PCR 产物的连接与转化:同1.2.4.6第39页
       ·PCR 检测阳性克隆:同1.2.4.7第39页
       ·重组质粒的提取和鉴定第39-40页
       ·测序第40页
     ·基因组DNA 扩增第40-41页
       ·PCR 产物的纯化:同1.2.4.5第41页
       ·PCR 产物的连接与转化:同1.2.4.6第41页
       ·PCR 检测阳性克隆:同1.2.4.7第41页
       ·测序第41页
     ·差异表达基因类CIPKs 基因的实时荧光定量PCR第41-42页
       ·逆转录反应第41页
       ·引物设计和标准曲线的建立第41-42页
       ·荧光定量PCR 体系和数据处理第42页
     ·原子吸收分光光度法测量钙浓度第42页
 2 结果与分析第42-51页
   ·RNA 的含量和质量测定结果第42-43页
   ·类 CIPKs 基因 PCR 扩增产物检测第43页
   ·类 CIPKs 基因的生物信息学分析第43-50页
     ·基因结构分析第43-46页
     ·编码蛋白的结构预测第46-48页
     ·类CIPKs 基因与几种植物同源序列氨基酸的比较分析第48-50页
     ·类CIPKs 基因的电子定位第50页
   ·类 CIPKs 基因的定量表达分析第50-51页
     ·标准曲线的建立第50-51页
     ·基因表达的定量检测第51页
   ·原子吸收分光光度法测量钙离子浓度第51页
 3 讨论第51-53页
参考文献第53-61页
英文摘要第61-62页

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