致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-22页 |
1 禾本科植物自交不亲和性及机理研究进展 | 第9-15页 |
·植物自交不亲和性的普遍性和分类 | 第9页 |
·孢子体自交不亲和的分子机理及研究进展 | 第9-10页 |
·孢子体自交不亲和表现 | 第9页 |
·孢子体自交不亲和雌雄S 决定子的鉴定过程及跨膜信号转导 | 第9-10页 |
·配子体自交不亲和的分子机理及研究进展 | 第10-14页 |
·以S-RNase 为基础的SI 信号转导的研究进展 | 第11-13页 |
·SI 信号分子—S-RNase | 第11-12页 |
·信号分子的接受体——花粉S 蛋白 | 第12页 |
·以S-RNase 为基础的细胞信号转导途径 | 第12-13页 |
·罂粟科SI 信号转导的研究进展 | 第13-14页 |
·禾本科自交不亲和性机理 | 第14页 |
·玉米生态核雄性不育的研究进展 | 第14-15页 |
·自交不亲和在农作物种子生产中的应用 | 第15页 |
2 蛋白质磷酸化 | 第15-16页 |
3 基因克隆 | 第16-22页 |
·概述 | 第16-17页 |
·RACE 的基本原理 | 第17-19页 |
·RACE 与生物信息学资源的结合——“电子”cDNA 文库筛选 | 第19-20页 |
·候选基因的功能验证 | 第20-22页 |
第二章 玉米温敏自交不亲和性的生态学机制研究 | 第22-28页 |
引言 | 第22页 |
1 材料与方法 | 第22-24页 |
·材料 | 第22页 |
·HE97 亲和性转换机制的田间鉴定试验 | 第22-23页 |
·光照处理实验 | 第23-24页 |
·实验地点及处理 | 第23页 |
·田间试验设计 | 第23页 |
·田间调查及数据记录 | 第23-24页 |
2 结果与分析 | 第24-27页 |
·生态型自交不亲和系HE97 的形态学鉴定 | 第24-25页 |
·HE97 的亲和性转换区间与光温因子的关系分析 | 第25-26页 |
·不同光照处理对HE97 结实性的影响 | 第26-27页 |
3 讨论 | 第27-28页 |
第三章 玉米温敏自交不亲和基因的定位 | 第28-33页 |
引言 | 第28页 |
1 材料与方法 | 第28-30页 |
·试验材料 | 第28页 |
·田间试验 | 第28页 |
·遗传连锁图的构建及基因定位 | 第28-30页 |
·DNA 的提取 | 第28-29页 |
·PCR 扩增及扩增产物检测步骤 | 第29-30页 |
·遗传连锁图谱的构建与QTL 分析 | 第30页 |
·目标基因的定位 | 第30页 |
2 结果与分析 | 第30-32页 |
·F_2群体的田间亲和性表现 | 第30-31页 |
·遗传连锁图谱构建与QTL 分析 | 第31-32页 |
·目标性状的质量基因定位 | 第32页 |
3 讨论 | 第32-33页 |
第四章 玉米温敏自交不亲和相关基因类CIPKS 的克隆及表达分析 | 第33-53页 |
引言 | 第33页 |
1 材料和方法 | 第33-42页 |
·实验材料 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-42页 |
·实验材料的种植、取样和鉴定 | 第33页 |
·总RNA 的抽提 | 第33-34页 |
·RNA 含量和质量的检测 | 第34页 |
·3’端基因序列扩增 | 第34-38页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第34-35页 |
·第一次 PCR 扩增 | 第35-36页 |
·第二次PCR 扩增 | 第36页 |
·电泳检测 | 第36页 |
·PCR 产物的纯化 | 第36页 |
·PCR 产物的连接和转化 | 第36-37页 |
·PCR 检测阳性克隆 | 第37-38页 |
·DNA 序列测定和分析 | 第38页 |
·类CIPKs 基因生物信息学分析 | 第38-40页 |
·类CIPKs 基因的EST 序列电子延伸 | 第38页 |
·Contig1E6 PCR 扩增 | 第38-39页 |
·PCR 产物的纯化:同1.2.4.5 | 第39页 |
·PCR 产物的连接与转化:同1.2.4.6 | 第39页 |
·PCR 检测阳性克隆:同1.2.4.7 | 第39页 |
·重组质粒的提取和鉴定 | 第39-40页 |
·测序 | 第40页 |
·基因组DNA 扩增 | 第40-41页 |
·PCR 产物的纯化:同1.2.4.5 | 第41页 |
·PCR 产物的连接与转化:同1.2.4.6 | 第41页 |
·PCR 检测阳性克隆:同1.2.4.7 | 第41页 |
·测序 | 第41页 |
·差异表达基因类CIPKs 基因的实时荧光定量PCR | 第41-42页 |
·逆转录反应 | 第41页 |
·引物设计和标准曲线的建立 | 第41-42页 |
·荧光定量PCR 体系和数据处理 | 第42页 |
·原子吸收分光光度法测量钙浓度 | 第42页 |
2 结果与分析 | 第42-51页 |
·RNA 的含量和质量测定结果 | 第42-43页 |
·类 CIPKs 基因 PCR 扩增产物检测 | 第43页 |
·类 CIPKs 基因的生物信息学分析 | 第43-50页 |
·基因结构分析 | 第43-46页 |
·编码蛋白的结构预测 | 第46-48页 |
·类CIPKs 基因与几种植物同源序列氨基酸的比较分析 | 第48-50页 |
·类CIPKs 基因的电子定位 | 第50页 |
·类 CIPKs 基因的定量表达分析 | 第50-51页 |
·标准曲线的建立 | 第50-51页 |
·基因表达的定量检测 | 第51页 |
·原子吸收分光光度法测量钙离子浓度 | 第51页 |
3 讨论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
英文摘要 | 第61-62页 |