| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一部分 前言 | 第11-21页 |
| ·植物细胞中磷的存在形式 | 第11页 |
| ·磷是作物生长的重要限制因素 | 第11-12页 |
| ·植物对低磷胁迫环境的适应性机理 | 第12-19页 |
| ·形态学的变化 | 第12-13页 |
| ·生理生化上的变化 | 第13-14页 |
| ·分子水平上的变化 | 第14-19页 |
| ·本工作目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第21-34页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·盐芥Na~+/Pi转运体基因的Southern blot分析 | 第21-22页 |
| ·盐芥基因组DNA的提取 | 第21页 |
| ·Southern blot分析 | 第21-22页 |
| ·盐芥基因全长序列的获得 | 第22页 |
| ·Na~+/Pi转运体在酵母中的定位 | 第22-24页 |
| ·酵母遗传转化所用溶液和培养基 | 第22-23页 |
| ·酵母转化方法 | 第23-24页 |
| ·质粒的重组和转化 | 第24-26页 |
| ·质粒载体及培养基 | 第24页 |
| ·质粒DNA的制备和纯化 | 第24页 |
| ·质粒DNA的限制性酶切 | 第24-25页 |
| ·DNA片段的去磷酸化 | 第25页 |
| ·DNA片段的回收和定量 | 第25-26页 |
| ·外源DNA片段与质粒载体的连接 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备和转化 | 第26页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第26页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第26-28页 |
| ·重组质粒转入农杆菌 | 第27页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第27-28页 |
| ·转化植株的分子检测 | 第28-30页 |
| ·PCR检测 | 第28页 |
| ·转基因烟草Southern blotting分析 | 第28-30页 |
| ·RNA的提取及RT-PCR | 第30页 |
| ·盐芥和转基因烟草的叶绿体分离及磷转运活性测定 | 第30-32页 |
| ·叶绿体的分离 | 第30-32页 |
| ·叶绿体上Na~+/Pi转运体磷转运活性的测定 | 第32页 |
| ·烟草种子在低磷培养基上的萌发 | 第32页 |
| ·烟草植株溶液培养处理 | 第32-34页 |
| 第三部分 实验结果 | 第34-48页 |
| ·盐芥Na~+/Pi转运体基因的Southern blotting分析 | 第34页 |
| ·盐芥Na~+/Pi转运体基因全长序列的获得 | 第34-36页 |
| ·去除信号肽以后Na~+/Pi转运体在酵母中的定位 | 第36-37页 |
| ·植物表达载体的构建和转基因植株的产生 | 第37-39页 |
| ·叶绿体分离与Na~+/Pi转运体活性测定 | 第39-41页 |
| ·盐芥叶绿体在不同pH下的磷转运活性 | 第40页 |
| ·转基因烟草叶绿体磷转运活性的测定 | 第40-41页 |
| ·转基因烟草具有较好的耐低磷特性 | 第41-45页 |
| ·植物RNAi干扰载体PFGC5941-NP的构建 | 第45-48页 |
| 第四部分 讨论 | 第48-51页 |
| Na~+/Pi转运体基因功能的初步确定 | 第48-49页 |
| 盐芥叶绿体在不同pH下的磷转运活性 | 第49页 |
| Na~+/Pi转运体基因促进转基因烟草在磷胁迫条件下的生长 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第62-63页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第63页 |
