| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| Abbreviation | 第8-9页 |
| 第1章 背景——纤维素酶及丝状真菌研究 | 第9-29页 |
| ·、纤维素酶研究历史及当前契机 | 第9-11页 |
| ·、微生物与纤维素酶 | 第11-19页 |
| ·、纤维素酶分类 | 第11-13页 |
| ·、产纤维素酶微生物 | 第13-14页 |
| ·、细菌纤维素酶系——纤维小体 | 第14页 |
| ·、真菌纤维素酶系 | 第14-16页 |
| ·、纤维素酶序列、结构与功能简析 | 第16-19页 |
| ·、纤维素酶工业应用及前景 | 第19-22页 |
| ·、纤维素酶与丝状真菌表达体系 | 第22-27页 |
| ·、丝状真菌工业发酵及表达体系 | 第22-24页 |
| ·、丝状真菌模式菌株基因组分析 | 第24-26页 |
| ·、丝状真菌分泌性蛋白的表达体系 | 第26-27页 |
| ·、丝状真菌与安全生产 | 第27页 |
| ·、论文立题依据和内容概述 | 第27-29页 |
| 第2章 纤维素高效降解菌株的分离纯化与鉴定 | 第29-41页 |
| ·、材料与方法 | 第29-33页 |
| ·、菌株 | 第29-30页 |
| ·、培养基 | 第30页 |
| ·、主要仪器与试剂 | 第30页 |
| ·、菌株的筛选、纯化与形态鉴定 | 第30-31页 |
| ·、基因组DNA提取 | 第31-32页 |
| ·、18S rRNA基因克隆及引物序列 | 第32页 |
| ·、ITS基因克隆及引物序列 | 第32页 |
| ·、PCR产物与测序载体的连接及测序 | 第32-33页 |
| ·、结果与分析: | 第33-38页 |
| ·、菌株纯化与形态鉴定 | 第33-35页 |
| ·、分子生物学鉴定 | 第35-38页 |
| ·、讨论 | 第38-41页 |
| 第3章 Stachybotrys sp.S05发酵条件的优化及胞外纤维素酶性质 | 第41-54页 |
| ·、材料与方法 | 第41-45页 |
| ·、菌株 | 第41页 |
| ·、培养基及其优化方案 | 第41-43页 |
| ·、孢子悬液的制备方法 | 第43页 |
| ·、酶活力测定缓冲体系 | 第43页 |
| ·、还原糖含量测定 | 第43页 |
| ·、胞外纤维素酶及木聚糖酶活力测定 | 第43-44页 |
| ·、SDS-PAGE与活性电泳 | 第44-45页 |
| ·、结果与分析 | 第45-52页 |
| ·、固体平板培养 | 第45页 |
| ·、液体发酵条件优化及酶液性质 | 第45-50页 |
| ·、固态发酵条件分析 | 第50-51页 |
| ·、固体发酵胞外纤维素酶表达谱初步分析 | 第51-52页 |
| ·、木聚糖酶性质分析 | 第52页 |
| ·、讨论 | 第52-54页 |
| 第4章 Stachybotrys sp.S05胞外内切酶系分离纯化及性质鉴定 | 第54-65页 |
| ·、材料与方法 | 第54-58页 |
| ·、主要仪器与试剂 | 第54-55页 |
| ·、胞外酶液发酵及预处理 | 第55页 |
| ·、分离纯化流程 | 第55-56页 |
| ·、Sephodex G-25分子筛柱层析 | 第56页 |
| ·、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱层析 | 第56页 |
| ·、Bio gel P-100分子筛柱层析 | 第56页 |
| ·、HPLC高效液相柱层析 | 第56页 |
| ·、胞外酶最适反应条件测定 | 第56页 |
| ·、蛋白质含量测定——Bradford法 | 第56-57页 |
| ·、SDS-PAGE与活性电泳 | 第57页 |
| ·、酶分子MALDI-TOF MS肽指纹图谱鉴定 | 第57-58页 |
| ·、结果与分析 | 第58-62页 |
| ·、胞外酶液发酵条件分析 | 第58页 |
| ·、内切酶系分离纯化 | 第58-61页 |
| ·、内切酶EGI酶学性质 | 第61页 |
| ·、质谱鉴定结果讨论 | 第61-62页 |
| ·、讨论 | 第62-65页 |
| 第5章 Stachybotrys属纤维素酶分子生物学研究 | 第65-75页 |
| ·、材料与方法 | 第65-68页 |
| ·、RNA提取培养基 | 第65页 |
| ·、总RNA的提取 | 第65-66页 |
| ·、RT-PCR及cDNA测序 | 第66-68页 |
| ·、EGI生物信息学分析 | 第68页 |
| ·、结果与分析 | 第68-69页 |
| ·、讨论 | 第69-75页 |
| 第6章 总结与展望 | 第75-79页 |
| ·、本论文总结及创新点 | 第75-78页 |
| ·、存在的问题及展望 | 第78-79页 |
| 附录 | 第79-81页 |
| References | 第81-95页 |
| 论文致谢 | 第95-96页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第96页 |
