| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-26页 |
| ·间质干细胞 | 第16-18页 |
| ·间质干细胞生物学特性及应用 | 第16-17页 |
| ·间质干细胞临床应用安全性问题 | 第17-18页 |
| ·肿瘤干细胞 | 第18-22页 |
| ·肿瘤发生与肿瘤干细胞理论 | 第18页 |
| ·肿瘤干细胞生物学特性 | 第18-19页 |
| ·肿瘤干细胞的分离 | 第19-20页 |
| ·肿瘤干细胞的鉴定 | 第20页 |
| ·肿瘤干细胞研究进展 | 第20-21页 |
| ·间质干细胞突变致瘤肿瘤干细胞研究及意义 | 第21-22页 |
| ·DNA甲基化 | 第22-26页 |
| ·DNA甲基化与肿瘤发生 | 第22-23页 |
| ·DAPK基因甲基化与肿瘤发生 | 第23页 |
| ·FHIT基因甲基化与肿瘤发生 | 第23-24页 |
| ·DNA去甲基化与肿瘤治疗 | 第24页 |
| ·存在问题与展望 | 第24-26页 |
| 第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第26-30页 |
| ·研究目的 | 第26页 |
| ·研究方法 | 第26-27页 |
| ·实验设计方案 | 第27-29页 |
| ·研究意义 | 第29-30页 |
| 第三章 F6肿瘤干细胞分离鉴定及生物学特性 | 第30-50页 |
| ·试剂与仪器 | 第30-32页 |
| ·主要试剂 | 第30-31页 |
| ·主要仪器、耗材 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-36页 |
| ·细胞培养 | 第32页 |
| ·流式细胞分选及表面标记检测 | 第32页 |
| ·细胞周期 | 第32页 |
| ·RNA提取以及逆转录 | 第32-33页 |
| ·PCR扩增 | 第33页 |
| ·T-A克隆 | 第33页 |
| ·荧光定量PCR | 第33-34页 |
| ·裸鼠致瘤实验 | 第34-35页 |
| ·生长曲线 | 第35页 |
| ·软琼脂克隆形成 | 第35页 |
| ·化疗药物敏感试验 | 第35页 |
| ·Western blot | 第35页 |
| ·基因芯片 | 第35-36页 |
| ·统计分析 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-47页 |
| ·F6细胞分选及CD133表达检测 | 第36页 |
| ·细胞培养体系优化 | 第36-37页 |
| ·细胞周期 | 第37页 |
| ·生长曲线 | 第37页 |
| ·克隆形成能力分析 | 第37页 |
| ·Western blot检测AKT、ERK基因蛋白水平改变 | 第37页 |
| ·裸鼠致瘤模型 | 第37页 |
| ·化疗药物敏感试验 | 第37-38页 |
| ·基因芯片 | 第38页 |
| ·荧光定量PCR验证基因芯片结果 | 第38-47页 |
| ·讨论 | 第47-50页 |
| 第四章 F6细胞DAPK FHIT启动子甲基化的研究 | 第50-62页 |
| ·试剂与仪器 | 第50-51页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·主要仪器、耗材 | 第50-51页 |
| ·方法 | 第51-53页 |
| ·DNA制备与修饰 | 第51页 |
| ·DAPK基因甲基化检测 | 第51-52页 |
| ·FHIT基因甲基化检测 | 第52页 |
| ·PCR产物回收、纯化与测序 | 第52-53页 |
| ·5-Aza-CdR去甲基化 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-60页 |
| ·RT-PCR检测DAPK、FHIT基因表达 | 第53页 |
| ·MSP检测DAPK基因甲基化及测序结果 | 第53页 |
| ·MSP检测FHIT基因甲基化及测序结果 | 第53页 |
| ·RT-PCR检测FHIT基因mRNA表达水平的变化 | 第53-54页 |
| ·细胞形态学及细胞周期 | 第54页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第54-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 结论及展望 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 攻读硕士学位期间获奖及发表的学术论文 | 第74-76页 |
