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脐带间质干细胞治疗肾脏缺血再灌注损伤的实验研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 绪论第13-23页
   ·间质干细胞第13页
   ·脐带间质干细胞第13-18页
     ·脐带MSCs的来源第13页
     ·脐带MSCs的分离培养第13-14页
     ·脐带MSCs的生物学特性第14-16页
     ·脐带MSCs的应用第16-18页
   ·MSCs与肾脏疾病第18-23页
     ·MSCs在肾脏疾病中的作用第18-19页
     ·MSCs作为转基因载体治疗肾脏疾病第19-20页
     ·MSCs移植治疗的机制及存在的问题第20-23页
第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义第23-27页
   ·研究目的第23页
   ·研究方法第23-24页
   ·实验设计方案第24-25页
     ·体外实验第24-25页
     ·体内实验第25页
   ·研究意义第25-27页
第三章 人脐带间质干细胞的分离培养及生物学特性第27-41页
   ·材料和试剂第27-29页
     ·材料第27页
     ·主要试剂第27-29页
     ·主要仪器第29页
   ·方法第29-32页
     ·人脐带MSCs的分离扩增第29-30页
     ·观察ucMSCs超微结构第30页
     ·流式细胞仪检测ucMSCs表面标记第30页
     ·总RNA提取第30页
     ·逆转录反应第30-31页
     ·PCR和荧光定量PCR第31页
     ·细胞爬片制作及免疫组织化学染色第31页
     ·ELISA检测HGF第31-32页
     ·因子诱导实验第32页
     ·细胞缺/复氧实验第32页
     ·cuMSCs与损伤大鼠肾小管上皮细胞NRK共培养实验第32页
     ·数据处理与统计第32页
   ·结果第32-39页
     ·脐带MSCs分离培养和超微结构第32-33页
     ·ucMSCs的表面标志及基因表达第33页
     ·ucMSCs在体外因子诱导下Thy-1,α-SMA蛋白表达增加第33页
     ·ucMSCs缺氧/复氧后细胞因子表达及分泌增加第33页
     ·ucMSCs与损伤NRK共培养后因子表达增加第33-39页
   ·讨论第39-41页
第四章 大鼠肾缺血再灌注损伤模型的建立第41-53页
   ·材料与仪器第41-42页
     ·主要材料第41-42页
     ·主要仪器、耗材第42页
   ·方法第42-43页
     ·大鼠肾缺血再灌注模型建立第42-43页
     ·标本处理第43页
     ·GFP标记大鼠MSCs的肾内定位实验第43页
   ·结果第43-51页
     ·肾缺血再灌注损伤导致血清Cr、BUN短期升高第43页
     ·随时间增加,血清Cr、BUN逐渐下降第43-44页
     ·60min缺血较45min缺血肾脏损伤程度明显第44页
     ·肾缺血再灌注损伤后尿蛋白升高,内生肌酐清除率减低第44页
     ·60min缺血再灌注损伤导致肾组织病理结构异常第44页
     ·90min缺血肾脏再灌注不完全第44页
     ·GFP标记的大鼠MSCs在ARF大鼠体内定位实验第44-51页
   ·讨论第51-53页
第五章 人脐带间质干细胞修复肾缺血再灌注ARF的实验研究第53-65页
   ·材料和方法第53-57页
     ·材料第53页
     ·主要试剂第53-54页
     ·主要仪器、耗材第54页
     ·方法第54-57页
   ·结果第57-63页
     ·移植ucMSCs对于肾功能及结构的修复第57页
     ·ucMSCs在ARF大鼠体内定位实验第57页
     ·治疗机制第57-63页
   ·讨论第63-65页
结论与展望第65-67页
致谢第67-69页
参考文献第69-77页
攻读硕士学位期间获奖及发表的学术论文第77-79页

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