摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
第一章 绪论 | 第13-23页 |
·间质干细胞 | 第13页 |
·脐带间质干细胞 | 第13-18页 |
·脐带MSCs的来源 | 第13页 |
·脐带MSCs的分离培养 | 第13-14页 |
·脐带MSCs的生物学特性 | 第14-16页 |
·脐带MSCs的应用 | 第16-18页 |
·MSCs与肾脏疾病 | 第18-23页 |
·MSCs在肾脏疾病中的作用 | 第18-19页 |
·MSCs作为转基因载体治疗肾脏疾病 | 第19-20页 |
·MSCs移植治疗的机制及存在的问题 | 第20-23页 |
第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第23-27页 |
·研究目的 | 第23页 |
·研究方法 | 第23-24页 |
·实验设计方案 | 第24-25页 |
·体外实验 | 第24-25页 |
·体内实验 | 第25页 |
·研究意义 | 第25-27页 |
第三章 人脐带间质干细胞的分离培养及生物学特性 | 第27-41页 |
·材料和试剂 | 第27-29页 |
·材料 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27-29页 |
·主要仪器 | 第29页 |
·方法 | 第29-32页 |
·人脐带MSCs的分离扩增 | 第29-30页 |
·观察ucMSCs超微结构 | 第30页 |
·流式细胞仪检测ucMSCs表面标记 | 第30页 |
·总RNA提取 | 第30页 |
·逆转录反应 | 第30-31页 |
·PCR和荧光定量PCR | 第31页 |
·细胞爬片制作及免疫组织化学染色 | 第31页 |
·ELISA检测HGF | 第31-32页 |
·因子诱导实验 | 第32页 |
·细胞缺/复氧实验 | 第32页 |
·cuMSCs与损伤大鼠肾小管上皮细胞NRK共培养实验 | 第32页 |
·数据处理与统计 | 第32页 |
·结果 | 第32-39页 |
·脐带MSCs分离培养和超微结构 | 第32-33页 |
·ucMSCs的表面标志及基因表达 | 第33页 |
·ucMSCs在体外因子诱导下Thy-1,α-SMA蛋白表达增加 | 第33页 |
·ucMSCs缺氧/复氧后细胞因子表达及分泌增加 | 第33页 |
·ucMSCs与损伤NRK共培养后因子表达增加 | 第33-39页 |
·讨论 | 第39-41页 |
第四章 大鼠肾缺血再灌注损伤模型的建立 | 第41-53页 |
·材料与仪器 | 第41-42页 |
·主要材料 | 第41-42页 |
·主要仪器、耗材 | 第42页 |
·方法 | 第42-43页 |
·大鼠肾缺血再灌注模型建立 | 第42-43页 |
·标本处理 | 第43页 |
·GFP标记大鼠MSCs的肾内定位实验 | 第43页 |
·结果 | 第43-51页 |
·肾缺血再灌注损伤导致血清Cr、BUN短期升高 | 第43页 |
·随时间增加,血清Cr、BUN逐渐下降 | 第43-44页 |
·60min缺血较45min缺血肾脏损伤程度明显 | 第44页 |
·肾缺血再灌注损伤后尿蛋白升高,内生肌酐清除率减低 | 第44页 |
·60min缺血再灌注损伤导致肾组织病理结构异常 | 第44页 |
·90min缺血肾脏再灌注不完全 | 第44页 |
·GFP标记的大鼠MSCs在ARF大鼠体内定位实验 | 第44-51页 |
·讨论 | 第51-53页 |
第五章 人脐带间质干细胞修复肾缺血再灌注ARF的实验研究 | 第53-65页 |
·材料和方法 | 第53-57页 |
·材料 | 第53页 |
·主要试剂 | 第53-54页 |
·主要仪器、耗材 | 第54页 |
·方法 | 第54-57页 |
·结果 | 第57-63页 |
·移植ucMSCs对于肾功能及结构的修复 | 第57页 |
·ucMSCs在ARF大鼠体内定位实验 | 第57页 |
·治疗机制 | 第57-63页 |
·讨论 | 第63-65页 |
结论与展望 | 第65-67页 |
致谢 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |
攻读硕士学位期间获奖及发表的学术论文 | 第77-79页 |