| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.世界羊毛品质现状 | 第10-11页 |
| 2.中国羊毛生产现状 | 第11-13页 |
| ·我国细毛羊发展的历史回顾 | 第11-12页 |
| ·我国细毛羊的发展方向 | 第12页 |
| ·我国细毛羊结构的变化 | 第12页 |
| ·我国细毛羊育种手段 | 第12-13页 |
| 3.甘肃高山细毛羊育种状况 | 第13-14页 |
| ·甘肃高山细毛羊简介 | 第13页 |
| ·甘肃高山细毛羊育种中存在的问题 | 第13页 |
| ·发展甘肃细毛羊对策 | 第13-14页 |
| ·改进和发展细毛羊业 | 第13-14页 |
| ·改进选育手段,加快选育进程 | 第14页 |
| 4.分子标记在绵羊育种中的应用 | 第14-17页 |
| ·聚合酶链式反应—单链构象多态性(PCR-SSCP) | 第15-16页 |
| ·PCR-SSCP基本原理 | 第15页 |
| ·PCR-SSCP优点 | 第15-16页 |
| ·PCR-SSCP缺陷 | 第16页 |
| ·高分辨率溶解—HRM | 第16-17页 |
| ·HRM主要原理 | 第16页 |
| ·HRM技术优势 | 第16-17页 |
| ·HRM的应用 | 第17页 |
| 5.毛用性状基因研究进展 | 第17-20页 |
| 6.本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 KRT-IF 35基因克隆、生物信息学分析 | 第21-37页 |
| 1.实验材料 | 第21页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·实验仪器耗材及试剂的配制方法 | 第21页 |
| 2.实验方法 | 第21-28页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
| ·基因组DNA浓度和纯度的检测 | 第22-23页 |
| ·琼脂糖电泳检测 | 第22页 |
| ·DNA纯度及浓度的判别 | 第22-23页 |
| ·紫外分光光度计检测 | 第23页 |
| ·引物设计 | 第23页 |
| ·PCR反应 | 第23-24页 |
| ·PCR反应程序 | 第23-24页 |
| ·PCR反应体系 | 第24页 |
| ·基因克隆 | 第24-27页 |
| ·PCR产物回收步骤 | 第24-25页 |
| ·PCR产物的连接 | 第25页 |
| ·PCR产物的转化 | 第25-26页 |
| ·提取质粒 | 第26页 |
| ·酶切鉴定 | 第26-27页 |
| ·KRT-IF 35基因的生物信息学分析 | 第27-28页 |
| ·KRT-IF 35基因结构分析 | 第27页 |
| ·KRT-IF 35基因蛋白质分析 | 第27-28页 |
| 3.结果 | 第28-35页 |
| ·PCR产物 | 第29页 |
| ·KRT-IF 35基因的核酸序列分析 | 第29-33页 |
| ·序列拼接结果 | 第29-30页 |
| ·KRT-IF 35基因的分子质量、碱基组成、碱基分布 | 第30页 |
| ·KRT-IF 35 mRNA预测 | 第30页 |
| ·开放阅读框(ORF)预测 | 第30-31页 |
| ·KRT-IF 35mRNA、蛋白同源性比对及系统进化树 | 第31-33页 |
| ·KRT-IF 35基因蛋白质结构预测 | 第33-35页 |
| ·氨基酸基本理化特性分析 | 第33页 |
| ·蛋白质亲疏水性预测 | 第33页 |
| ·蛋白质跨膜结构预测 | 第33-34页 |
| ·蛋白质信号肽分析 | 第34页 |
| ·蛋白质二级结构分析 | 第34-35页 |
| ·蛋白质超二级结构——结构域分析 | 第35页 |
| 4.讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 KRT-IF 35基因的遗传结构与遗传效应分析 | 第37-47页 |
| 1.实验材料 | 第37页 |
| ·实验动物和地点 | 第37页 |
| ·实验仪器耗材及试剂的配制方法 | 第37页 |
| 2.实验方法 | 第37-40页 |
| ·基因组DNA的提取及浓度和纯度的检测 | 第37页 |
| ·分子标记检测 | 第37-40页 |
| ·引物的设计及稀释 | 第37页 |
| ·引物序列及退火温度 | 第37-38页 |
| ·SSCP—PCR反应体系及程序 | 第38页 |
| ·凝胶的配制 | 第38页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳步骤 | 第38-39页 |
| ·测序 | 第39页 |
| ·羊毛性状数据的测定 | 第39页 |
| ·数据统计 | 第39-40页 |
| 3.结果 | 第40-44页 |
| ·甘肃高山细毛羊基因组DNA的检测 | 第40页 |
| ·PCR扩增 | 第40-41页 |
| ·SSCP检测 | 第41页 |
| ·序列分析结果 | 第41-42页 |
| ·数据统计 | 第42-44页 |
| ·基因频率及基因型频率 | 第42页 |
| ·Hardy-Weinberg平衡检验(χ~2适合性检验) | 第42页 |
| ·KRT-IF 35基因的遗传多态参数 | 第42-43页 |
| ·利用最小二乘法分析各因素对细毛羊毛用性状的影响 | 第43-44页 |
| 4.讨论 | 第44-47页 |
| ·KRT-IF 35基因作为毛用候选基因的可行性 | 第44-45页 |
| ·KRT-IF 35多态性分析 | 第45-47页 |
| ·KRT-IF 35的遗传性分析 | 第45-46页 |
| ·KRT-IF 35基因多态性与毛用性状的相关性分析 | 第46-47页 |
| 第四章 KRT-IF 31基因的遗传结构与遗传效应研究 | 第47-62页 |
| 1.实验材料 | 第47页 |
| 2.实验方法 | 第47-49页 |
| ·引物的设计 | 第47-48页 |
| ·PCR反应程序 | 第48页 |
| ·Mutation Scanning的PCR反应程序 | 第48页 |
| ·Unlabeled Probes的PCR反应程序 | 第48页 |
| ·PCR反应体系 | 第48页 |
| ·MUTATION SCANNING、UNLABELED PROBES步骤 | 第48-49页 |
| ·测序 | 第49页 |
| ·羊毛性状数据的测定 | 第49页 |
| ·数据统计 | 第49页 |
| 3.结果 | 第49-57页 |
| ·MUTATION SCANNING扩增结果 | 第49-50页 |
| ·UNLABELED PROBES法扩增结果 | 第50-51页 |
| ·MUTATION SCANNING扫描结果 | 第51页 |
| ·UNLABELED PROBES分型结果 | 第51-52页 |
| ·测序结果 | 第52-53页 |
| ·数据统计 | 第53-57页 |
| ·基因频率和基因型频率计算 | 第53-54页 |
| ·Hardy-Weinberg平衡检验(χ~2适合性检验) | 第54页 |
| ·KRT-IF 31基因的杂合度、有效等位基因数和多态信息含量 | 第54-55页 |
| ·利用最小二乘法分析各因素对细毛羊毛用性状的影响 | 第55-57页 |
| 4. 讨论 | 第57-62页 |
| ·影响HRM分析结果的因素 | 第57-59页 |
| ·荧光染料 | 第57-58页 |
| ·PCR产物 | 第58页 |
| ·非标记性探针法 | 第58-59页 |
| ·探针设计应注意的问题 | 第59页 |
| ·KRT-IF 31多态性分析 | 第59-62页 |
| ·KRT-IF 31的遗传性分析 | 第59-61页 |
| ·KRT-IF 31基因多态性与毛用性状的相关性分析 | 第61-62页 |
| 第五章 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 附录 | 第67-75页 |
| 附录1:主要仪器和设备 | 第67-68页 |
| 附录2:主要的化学药品及耗材及主要试剂的配制 | 第68-71页 |
| 附录3:缩写词表 | 第71-72页 |
| 附录4:KRT-IF 35基因全序列 | 第72-74页 |
| 附录5:KRT-IF 35基因的MRNA | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 个人简介 | 第76-77页 |
| 导师简介 | 第77-79页 |
