摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-21页 |
1 抗病基因结构、功能研究进展 | 第11-18页 |
·R基因克隆研究进展 | 第11-14页 |
·R基因的结构特征 | 第14-16页 |
·R基因介导的信号传导途径 | 第16-18页 |
2 植物抗病基因的克隆策略 | 第18-21页 |
·转座子标签技术 | 第19页 |
·图位克隆技术 | 第19-20页 |
·建立在RNA水平上的差别表达基因克隆方法 | 第20-21页 |
第二部分 研究报告 | 第21-61页 |
第一章 Hv-S/TPK基因抗病机理分析 | 第21-29页 |
1 材料和方法 | 第21-25页 |
·植物材料 | 第21页 |
·白粉菌接种与染色方法 | 第21-22页 |
·总RNA的提取及纯化 | 第22-23页 |
·第一链cDNA合成 | 第23页 |
·RT-PCR | 第23-25页 |
2 结果与分析 | 第25-27页 |
·不同抗感材料中白粉菌发育差异的观察 | 第25-26页 |
·不同抗感材料中Hv-S/TPK基因的表达差异 | 第26-27页 |
3 讨论 | 第27-29页 |
第二章 Hv-S/TPK直系同源基因的克隆及功能分析 | 第29-39页 |
1 材料和方法 | 第29-31页 |
·植物材料 | 第29页 |
·质粒提取、酶切、连接及电击转化 | 第29页 |
·引物设计 | 第29-30页 |
·瞬间表达 | 第30页 |
·接种与互作 | 第30-31页 |
2 结果与分析 | 第31-37页 |
·Hv-S/TPK直系同源基因Ta-B-S/TPK和Ta-D-S/TPK的克隆 | 第31-33页 |
·Hv-S/TPK及其直系同源基因编码蛋白序列比较 | 第33-34页 |
·Hv-S/TPK及其直系同源基因编码蛋白3D结构的差异 | 第34-36页 |
·应用瞬间表达技术研究Hv-S/TPK及其直系同源基因的功能 | 第36-37页 |
3 讨论 | 第37-39页 |
第三章 Hv-CIPK基因的克隆及初步分析 | 第39-61页 |
1 材料与方法 | 第40-47页 |
·植物材料 | 第40页 |
·簇毛麦叶片cDNA文库 | 第40页 |
·接种和取样方法 | 第40页 |
·克隆和序列比较 | 第40-42页 |
·植物基因组DNA提取 | 第42-43页 |
·PAGE电泳和染色 | 第43页 |
·引物设计 | 第43页 |
·基因枪转化技术路线 | 第43-45页 |
·分子鉴定 | 第45-47页 |
2 结果与分析 | 第47-58页 |
·定位于6VS的抗病基因类似物的筛选 | 第47-48页 |
·簇毛麦Hv-CIPK基因的克隆 | 第48-52页 |
·同源性比较及系统进化分析 | 第52-55页 |
·Hv-CIPK基因功能的初步分析 | 第55-58页 |
3 讨论 | 第58-61页 |
全文结论 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
致谢 | 第69页 |