| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-24页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第11-12页 |
| ·文献综述 | 第12-23页 |
| ·大豆膳食纤维 | 第12-13页 |
| ·大豆膳食纤维改性酶制剂 | 第13-14页 |
| ·食品级酶制剂表达系统 | 第14-16页 |
| ·丝状真菌遗传转化系统 | 第16-20页 |
| ·农杆菌介导的丝状真菌的转化系统 | 第20-23页 |
| ·本论文的主要研究内容 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-34页 |
| ·试验材料 | 第24-26页 |
| ·菌种与载体 | 第24页 |
| ·试剂及酶类 | 第24页 |
| ·常用试剂的配制 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·仪器 | 第25-26页 |
| ·试验方法 | 第26-34页 |
| ·里氏木霉QM9414菌株的培养和菌种保存 | 第26页 |
| ·里氏木霉DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·基因的克隆 | 第27-31页 |
| ·敲除载体的构建 | 第31页 |
| ·农杆菌感受态的制备和转化 | 第31页 |
| ·农杆菌的处理和培养 | 第31-32页 |
| ·农杆菌介导的里氏木霉的转化 | 第32页 |
| ·转化子PCR的鉴定 | 第32-33页 |
| ·转化子表型的鉴定 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-59页 |
| ·农杆菌介导的里氏木霉遗传转化体系的建立和优化 | 第34-37页 |
| ·五氟乳氰酸(5-FOA)筛选浓度的测定 | 第34页 |
| ·乙酰丁香酮浓度对转化效率的影响 | 第34-35页 |
| ·孢子浓度对转化效率的影响 | 第35-36页 |
| ·共培养时间对转化效率的影响 | 第36页 |
| ·共培养温度对转化效率的影响 | 第36-37页 |
| ·共培养中农杆菌初始浓度对转化效率的影响 | 第37页 |
| ·△ura3缺陷型菌株的筛选 | 第37-46页 |
| ·ura3基因的克隆 | 第37-40页 |
| ·△ura3缺陷型载体的构建 | 第40-43页 |
| ·△ura3缺陷型载体转化农杆菌 | 第43页 |
| ·△ura3缺陷型菌株的筛选和鉴定 | 第43-46页 |
| ·△ku70缺陷型菌株筛选 | 第46-53页 |
| ·ku70基因的克隆 | 第46-48页 |
| ·含黑曲霉pyrA基因的ku70基因的敲除载体的构建 | 第48-50页 |
| ·△ku70敲除载体转化农杆菌 | 第50-51页 |
| ·△ku70缺陷型菌株的筛选和鉴定 | 第51-53页 |
| ·里氏木霉木糖苷酶xynd基因、bglⅠ基因的敲除 | 第53-59页 |
| ·xynd5、bglⅠ3、xynⅡ片段的克隆 | 第53-55页 |
| ·xynd、bglⅠ敲除载体的构建 | 第55-58页 |
| ·xynd、bglⅠ敲除载体转化农杆菌 | 第58页 |
| ·xynd、bglⅠ缺陷型菌株的筛选及鉴定 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第69页 |