| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| ·Tβ4 的结构与分布 | 第11-13页 |
| ·Tβ_4 的结构 | 第11-12页 |
| ·Tβ_4 的生物学分布 | 第12-13页 |
| ·Tβ_4 的功能及其作用机理 | 第13-16页 |
| ·细胞内Tβ_4 是肌动蛋白调节因子 | 第13-14页 |
| ·细胞外Tβ_4 可促进损伤组织的修复 | 第14-16页 |
| ·Tβ_4 的提取、纯化与鉴定 | 第16-17页 |
| ·Tβ_4 的提取 | 第16页 |
| ·Tβ_4 的分离纯化 | 第16-17页 |
| ·Tβ_4 的鉴定 | 第17页 |
| ·Tβ_4 原核表达进展 | 第17-18页 |
| ·大肠杆菌表达系统概述 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-30页 |
| ·实验材料 | 第20-23页 |
| ·质粒与菌株 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·培养基及有关的溶液配制 | 第20-22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·试验方法 | 第23-29页 |
| ·克隆载体PMD-18-Tβ_4 的构建 | 第23-25页 |
| ·克隆载体PMD-18-2Tβ_4 的构建 | 第25-26页 |
| ·表达载体PET-32a(+)-2Tβ_4 的构建 | 第26-27页 |
| ·重组蛋白的诱导表达与纯化 | 第27-29页 |
| ·表达产物的Western-blot 分析 | 第29页 |
| ·MTT 法检测Tβ_4 的免疫活性 | 第29-30页 |
| 3 结果和分析 | 第30-37页 |
| ·Tβ_4 基因克隆 | 第30-32页 |
| ·PMD-18-Tβ_4 基因克隆重组质粒的鉴定 | 第30页 |
| ·PMD-18-2Tβ_4 克隆重组质粒的鉴定结果 | 第30-32页 |
| ·重组原核表达质粒的鉴定结果 | 第32-33页 |
| ·PET-32a(+)-2Tβ_4 酶切结果 | 第32页 |
| ·PE-T32a(+)-2Tβ_4 测序结果 | 第32-33页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白电泳结果 | 第33-34页 |
| ·蛋白纯化与检测 | 第34-35页 |
| ·蛋白纯化结果 | 第34页 |
| ·液相色谱结果 | 第34-35页 |
| ·表达产物的Western-blot 结果 | 第35页 |
| ·Tβ_4 免疫活性检测 | 第35-37页 |
| 4 讨论 | 第37-43页 |
| ·原核表达系统及酶切位点的选择 | 第37-38页 |
| ·多肽串联基因构建 | 第38-39页 |
| ·蛋白表达及分离纯化分析 | 第39-40页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第39-40页 |
| ·蛋白的纯化 | 第40页 |
| ·Tβ_4 的检测 | 第40-41页 |
| ·免疫印迹的分析 | 第41-42页 |
| ·Tβ_4 对细胞免疫的影响 | 第42-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录 | 第50-52页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第52页 |