| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-16页 |
| 第一章. Fibulin-5和Nogo-B的研究背景及进展 | 第16-38页 |
| ·Fibulin蛋白家族与Fibulin-5 | 第16-29页 |
| ·Fibulin蛋白家族及其结构 | 第16-18页 |
| ·Fibulin-1,2,5的相互作用蛋白 | 第18-22页 |
| ·Fibulin家族的生物学功能 | 第22-29页 |
| ·RTN蛋白家族和Nogo-B | 第29-38页 |
| ·Reticulon(RTN)家族 | 第29-31页 |
| ·RTN的细胞定位和拓扑构象 | 第31-32页 |
| ·RTN家族成员的相互作用蛋白 | 第32-34页 |
| ·RTN的功能 | 第34-38页 |
| 第二章. 细胞的迁移以及检测手段 | 第38-63页 |
| ·细胞迁移 | 第38-49页 |
| ·细胞迁移的概念 | 第38-39页 |
| ·细胞迁移的步骤 | 第39-43页 |
| ·细胞迁移的诱因和效应 | 第43-46页 |
| ·细胞迁移与相关生理过程 | 第46-49页 |
| ·细胞的侵袭 | 第49-51页 |
| ·细胞侵袭的概念 | 第49页 |
| ·肿瘤细胞的侵袭 | 第49-50页 |
| ·瘤细胞侵袭的过程 | 第50-51页 |
| ·细胞迁移,侵袭的检测方法 | 第51-63页 |
| ·划痕法 | 第51-53页 |
| ·趋化小室法 | 第53-58页 |
| ·最新的细胞迁移/侵袭检测方法 | 第58-63页 |
| 第三章. Nogo-B与Fibulin-5的相互作用 | 第63-81页 |
| ·前言 | 第63-64页 |
| ·材料与方法 | 第64-69页 |
| ·细胞、质粒与试剂 | 第64页 |
| ·亚细胞组分的制备 | 第64-65页 |
| ·外源和内源性免疫共沉淀 | 第65-66页 |
| ·细胞内和细胞膜的激光共聚焦 | 第66页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第66页 |
| ·搭桥PCR反应 | 第66-67页 |
| ·固相结合实验 | 第67页 |
| ·Fibulin-5和Nogo-B各突变体的PCR引物设计 | 第67-69页 |
| ·研究结果 | 第69-79页 |
| ·外源表达的Nogo-B与Fibulin-5在细胞内相互结合 | 第69页 |
| ·内源性Nogo-B与Fibulin-5在细胞内相互作用 | 第69-71页 |
| ·内源性Nogo-B与Fibulin-5的定位 | 第71-72页 |
| ·Fibulin-5与Nogo-B的相互结合片断分析 | 第72-79页 |
| ·讨论 | 第79-81页 |
| 第四章. Nogo-B促进Fibulin-5分泌及其对细胞运动的影响 | 第81-99页 |
| ·前言 | 第81-82页 |
| ·材料与方法 | 第82-88页 |
| ·材料 | 第82页 |
| ·单克隆稳定细胞系的筛选 | 第82-83页 |
| ·Nogo-B小干扰RNA | 第83页 |
| ·ELISA检测蛋白含量 | 第83页 |
| ·细胞黏附试验 | 第83-84页 |
| ·划痕法检测细胞迁移 | 第84页 |
| ·Transwell法检测细胞迁移和侵袭 | 第84-88页 |
| ·MTT法检测细胞的增殖 | 第88页 |
| ·研究结果 | 第88-97页 |
| ·稳定表达Nogo-B的Hela细胞系的构建 | 第88-90页 |
| ·Nogo-B增强了Fibulin-5的外分泌 | 第90-92页 |
| ·Nogo-B介导Fibulin-5促进了Hela细胞的运动 | 第92-95页 |
| ·Nogo-B介导Fibulin-5抑制了Vero细胞的迁移 | 第95-97页 |
| ·Nogo-B抑制了Hela细胞的增殖 | 第97页 |
| ·结论 | 第97-98页 |
| ·讨论 | 第98-99页 |
| 第五章. Nogo-B促进Hela细胞伪足生长,调控Fibulin-5在细胞内的分配 | 第99-108页 |
| ·前言 | 第99-100页 |
| ·材料与方法 | 第100-101页 |
| ·激光共聚焦检测细胞内Fibulin-5和Nogo-B的定位 | 第100页 |
| ·微粒体组分的分离 | 第100-101页 |
| ·Fibulin-5的突变体F-△6的构建 | 第101页 |
| ·研究结果 | 第101-106页 |
| ·Nogo-B高表达改变了Hela细胞的形态 | 第101-103页 |
| ·Nogo-B倾向于在伪足内聚集,并携带Fibulin-5到伪足内 | 第103-104页 |
| ·Nogo-B是Fibulin-5在细胞内的转运载体 | 第104-106页 |
| ·讨论 | 第106-108页 |
| 研究总结 | 第108-109页 |
| 博士期间所发表的论文 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
