| 中文摘要 | 第4-6页 |
| 英文摘要 | 第6页 |
| 引言 | 第10-30页 |
| 1 肥胖的发生及其并发症 | 第10页 |
| 1.1 肥胖的发生 | 第10页 |
| 1.2 肥胖引起的并发症 | 第10页 |
| 2 脂肪组织的功能以及调控 | 第10-13页 |
| 2.1 脂肪组织的种类及其功能 | 第10-11页 |
| 2.1.1 WAT | 第10-11页 |
| 2.1.2 BAT | 第11页 |
| 2.1.3 米色脂肪 | 第11页 |
| 2.2 调节脂肪细胞分化和脂肪组织功能的相关转录因子 | 第11-13页 |
| 2.2.1 PPARγ | 第11-12页 |
| 2.2.2 CCAAT/增强子-结合蛋白 | 第12页 |
| 2.2.3 PGC1α1 | 第12-13页 |
| 2.2.4 PRDM16 | 第13页 |
| 3 VEGF家族及其各个成员的生物学作用 | 第13-17页 |
| 3.1 VEGFA | 第13-14页 |
| 3.2 VEGFB | 第14-15页 |
| 3.3 VEGFC | 第15页 |
| 3.4 VEGFD | 第15-16页 |
| 3.5 VEGFE | 第16页 |
| 3.6 胎盘生长因子(PlGF) | 第16-17页 |
| 3.7 VEGF-F | 第17页 |
| 4 VEGF受体及其功能 | 第17-19页 |
| 4.1 VEGFR1 | 第17页 |
| 4.2 VEGFR2 | 第17-18页 |
| 4.3 VEGFR3 | 第18-19页 |
| 4.4 神经毡蛋白NP-1和NP-2 | 第19页 |
| 5 VEGFA以及VEGFB参与脂肪发生和能量代谢 | 第19-22页 |
| 5.1 VEGFA在脂肪组织发育和能量代谢过程中的作用 | 第19-21页 |
| 5.2 VEGFB在能量代谢过程中的作用 | 第21-22页 |
| 6 能量代谢过程中相关蛋白 | 第22-23页 |
| 6.1 FATPs | 第22页 |
| 6.2 FABPs | 第22-23页 |
| 6.3 GLUTs | 第23页 |
| 7 关于VEGFA~(Inh)小鼠模型的研究 | 第23-26页 |
| 8 CRISPR-Cas9技术及其应用 | 第26-27页 |
| 8.1 CRISPR-Cas9技术概况 | 第26-27页 |
| 8.2 CRISPR-Cas9技术的应用 | 第27页 |
| 9 RNAseq介绍 | 第27-30页 |
| 9.1 建库与质量检测 | 第28页 |
| 9.2 RNAseq的分析流程 | 第28-29页 |
| 9.3 RNA-seq的应用 | 第29-30页 |
| 研究目的和意义 | 第30-31页 |
| 材料方法 | 第31-40页 |
| 1 实验试剂和仪器 | 第31页 |
| 1.1 生化试剂 | 第31页 |
| 1.2 实验仪器 | 第31页 |
| 2 实验方法 | 第31-40页 |
| 2.1 VEGFB敲除小鼠的构建 | 第31-34页 |
| 2.2 VEGFB~(-/-)/VEGFA~(Inh)小鼠的获得 | 第34页 |
| 2.3 RNA提取 | 第34-35页 |
| 2.4 cDNA的合成以及Real-time检测 | 第35-36页 |
| 2.5 Western blot | 第36-37页 |
| 2.6 组织水平分析HE染色 | 第37页 |
| 2.7 DAPI染色 | 第37页 |
| 2.8 代谢水平分析 | 第37-38页 |
| 2.8.1 体温以及CO_2消耗检测 | 第37-38页 |
| 2.8.2 葡萄糖耐受实验(GTT)和胰岛素耐受实验(ITT) | 第38页 |
| 2.8.3 血液中甘油三酯水平检测 | 第38页 |
| 2.9 高通量RNA测序以及数据分析 | 第38-39页 |
| 2.10 基因本体论以及信号通路富集分析 | 第39-40页 |
| 结果与分析 | 第40-64页 |
| 1 VEGFB敲除小鼠的鉴定及检测 | 第40-41页 |
| 2 VEGFB缺失能够引起小鼠体重及白色脂肪组织增加 | 第41-42页 |
| 3 VEGFB缺失后引起WAT的增长以及BAT的白色化 | 第42-43页 |
| 4 VEGFB通过调节棕色脂肪相关基因的表达来影响脂肪组织形态结构 | 第43-44页 |
| 5 VEGFA和VEGFB在脂肪组织表型、细胞分化、基因表达以及新陈代谢过程中起着相互调节作用 | 第44-54页 |
| 5.1 VEGFA和VEGFB在维持小鼠体重过程中起着平衡作用 | 第44-45页 |
| 5.2 VEGFA和VEGFB在调节小鼠脂肪组织形态结构上起着相互作用 | 第45-46页 |
| 5.3 VEGFA和VEGFB在调节小鼠脂肪发育相关基因的过程中起着相互作用 | 第46-48页 |
| 5.4 VEGFA和VEGFB在维持小鼠能量代谢过程中起着重要相互调节作用 | 第48-54页 |
| 5.4.1 VEGFA和VEGFB在影响小鼠体温调节过程中起着相互作用 | 第48页 |
| 5.4.2 VEGFA和VEGFB在影响小鼠呼吸速率调节中起着平衡作用 | 第48-49页 |
| 5.4.3 VEGFA和VEGFB能够相互影响血液中甘油三酯的水平 | 第49-50页 |
| 5.4.4 VEGFA和VEGFB在调节葡萄糖代谢和胰岛素耐受过程中起着相互作用 | 第50-52页 |
| 5.4.5 VEGFA和VEGFB能够相互调控能量代谢相关基因的表达 | 第52-54页 |
| 6 VEGFA和VEGFB分别调控脂肪组织中FATPs的表达 | 第54-55页 |
| 7 VEGFA和VEGFB分别调控脂肪组织中FABPs的表达 | 第55-56页 |
| 8 VEGFA和VEGFB分别调控脂肪组织中GLUTs的表达 | 第56-58页 |
| 9 脂肪组织中VEGF受体的表达变化 | 第58-59页 |
| 10 脂肪组织的RNA转录组分析显示VEGFA和VEGFB在细胞分化和能量代谢中存在着相互作用 | 第59-64页 |
| 10.1 RNAseq数据质量检测 | 第59-60页 |
| 10.2 脂肪组织中VEGFA和VEGFB单独调控的基因及参与的路径分析 | 第60-62页 |
| 10.3 脂肪组织中VEGFA和VEGFB共同调节的基因及参与的路径分析 | 第62-64页 |
| 讨论 | 第64-69页 |
| 结论和创新性 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-81页 |
| 附表 | 第81-88页 |
| 英文缩写词 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 在校期间公开发表论文及著作情况 | 第91页 |
