| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第13-27页 |
| 1.1 前言 | 第13-14页 |
| 1.2 WRKY转录因子 | 第14-16页 |
| 1.3 W-box元件 | 第16页 |
| 1.4 作用于WRKY转录因子/WRKY基因的蛋白质 | 第16-17页 |
| 1.5 WRKY转录因子研究概况 | 第17-20页 |
| 1.5.1 WRKY转录因子在植物生物胁迫应答进程中的作用 | 第17-18页 |
| 1.5.2 WRKY转录因子在植物非生物胁迫应答进程中的作用 | 第18-20页 |
| 1.5.3 WRKY转录因子在植物的其他生物进程中的作用 | 第20页 |
| 1.6 WRKY转录因子的作用特点 | 第20-23页 |
| 1.7 植物启动子研究 | 第23-25页 |
| 1.7.1 植物启动子简介 | 第23页 |
| 1.7.2 植物启动子类型 | 第23-24页 |
| 1.7.3 植物启动子研究现状 | 第24-25页 |
| 1.8 本研究的主要内容与技术路线 | 第25-27页 |
| 1.8.1 主要内容 | 第25页 |
| 1.8.2 技术路线 | 第25-27页 |
| 2 生物及非生物胁迫条件下PsnWRKY基因的时序表达 | 第27-41页 |
| 2.1 材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第27页 |
| 2.1.2 生物胁迫所用菌株 | 第27页 |
| 2.1.3 主要仪器设备与试剂 | 第27-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-31页 |
| 2.2.1 PsnWRKY基因家族成员的鉴定及亚细胞定位预测 | 第28页 |
| 2.2.2 多序列比对与进化树的构建 | 第28页 |
| 2.2.3 生物与非生物胁迫处理 | 第28-29页 |
| 2.2.4 RNA的提取、cDNA的合成以及qRT-PCR | 第29-31页 |
| 2.3 结果与分析 | 第31-39页 |
| 2.3.1 PsnWRKY基因及相应蛋白的特征 | 第31-32页 |
| 2.3.2 多序列比对与进化分析 | 第32-33页 |
| 2.3.3 内参基因的评价与选择 | 第33-36页 |
| 2.3.4 不同胁迫条件下20条PsnWRKY基因表达量的时序变化 | 第36-39页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第39-41页 |
| 3 小黑杨PsnWRKY70基因启动子功能研究及酵母单杂交 | 第41-65页 |
| 3.1 材料与方法 | 第41-51页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第41-43页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第43-51页 |
| 3.2 结果与分析 | 第51-63页 |
| 3.2.1 PsnWRKY70启动子的克隆及转录起始位点的确定 | 第51-54页 |
| 3.2.2 小黑杨cDNA文库的构建及质量检测 | 第54-55页 |
| 3.2.3 酵母单杂交筛选Psn WRKY70基因的上游调控因子 | 第55-61页 |
| 3.2.4 植物细胞中验证酵母单杂交筛选结果 | 第61-63页 |
| 3.3 讨论与小结 | 第63-65页 |
| 4 酵母双杂交筛选PsnWRKY70的互作蛋白 | 第65-85页 |
| 4.1 材料与方法 | 第65-71页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第65-66页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第66-71页 |
| 4.2 结果与分析 | 第71-83页 |
| 4.2.1 诱饵载体的构建 | 第71-72页 |
| 4.2.2 诱饵载体的自激活检测 | 第72-74页 |
| 4.2.3 WRKY蛋白在酵母细胞中的表达情况 | 第74页 |
| 4.2.4 pGBKT7-WRKY与pGADT7-cDNA共转化后的筛选 | 第74-75页 |
| 4.2.5 回转验证结果 | 第75-77页 |
| 4.2.6 阳性克隆所携cDNA片段的生物信息学分析 | 第77-78页 |
| 4.2.7 互作蛋白的GST-pull down体外验证 | 第78-83页 |
| 4.3 讨论与小结 | 第83-85页 |
| 5 小黑杨PsnWRKY70基因的功能研究 | 第85-125页 |
| 5.1 材料与方法 | 第85-93页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第85-87页 |
| 5.1.2 实验方法 | 第87-93页 |
| 5.2 结果与分析 | 第93-122页 |
| 5.2.1 PsnWRKY70序列的生物信息学分析 | 第93-97页 |
| 5.2.2 PsnWRKY70基因在小黑杨不同组织部位的表达分析 | 第97页 |
| 5.2.3 PsnWRKY70基因的克隆及植物表达载体构建 | 第97-101页 |
| 5.2.4 转PsnWRKY70基因小黑杨的获得及验证 | 第101-104页 |
| 5.2.5 转基因小黑杨的抗逆性分析 | 第104-117页 |
| 5.2.6 盐胁迫下转基因小黑杨转录组测序分析 | 第117-122页 |
| 5.3 讨论与小结 | 第122-125页 |
| 讨论 | 第125-130页 |
| 结论 | 第130-131页 |
| 工作展望 | 第131-132页 |
| 参考文献 | 第132-149页 |
| 附录 | 第149-159页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第159-160页 |
| 致谢 | 第160-162页 |
| 附件 | 第162-163页 |
