| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第15-24页 |
| 1.1 葡萄糖氧化酶的结构及催化机理 | 第15-16页 |
| 1.1.1 葡萄糖氧化酶的结构 | 第15页 |
| 1.1.2 葡萄糖氧化酶的催化机理 | 第15-16页 |
| 1.2 葡萄糖氧化酶的来源、基因克隆与表达 | 第16-18页 |
| 1.2.1 来源 | 第16-17页 |
| 1.2.2 基因克隆与异源表达 | 第17-18页 |
| 1.3 葡萄糖氧化酶的理化性质 | 第18页 |
| 1.4 葡萄糖氧化酶的分子改良 | 第18-19页 |
| 1.4.1 葡萄糖氧化酶的固定化研究 | 第18-19页 |
| 1.4.2 葡萄糖氧化酶的定向进化和理性设计 | 第19页 |
| 1.5 葡萄糖氧化酶的应用前景 | 第19-21页 |
| 1.5.1 食品工业 | 第19-20页 |
| 1.5.2 医药和医疗业 | 第20页 |
| 1.5.3 饲料工业 | 第20-21页 |
| 1.6 问题与展望 | 第21-22页 |
| 1.6.1 目前的问题 | 第21页 |
| 1.6.2 展望与对策 | 第21-22页 |
| 1.7 研究内容与方法 | 第22页 |
| 1.8 研究目的与意义 | 第22-24页 |
| 第二章 葡萄糖氧化酶基因的克隆与表达 | 第24-44页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第24-26页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第24页 |
| 2.1.2 引物合成 | 第24页 |
| 2.1.3 试剂盒、工具酶与生化试剂 | 第24页 |
| 2.1.4 培养基和溶液 | 第24-25页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-32页 |
| 2.2.1 产葡萄糖氧化酶菌株的筛选 | 第26页 |
| 2.2.2 葡萄糖氧化酶基因的克隆 | 第26-28页 |
| 2.2.3 葡萄糖氧化酶异源表达与性质测定 | 第28-32页 |
| 2.3 结果 | 第32-41页 |
| 2.3.1 产葡萄糖氧化酶菌株的筛选结果 | 第32页 |
| 2.3.2 葡萄糖氧化酶基因的克隆结果 | 第32-37页 |
| 2.3.3 葡萄糖氧化酶异源表达与性质测定结果 | 第37-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-43页 |
| 本章小结 | 第43-44页 |
| 第三章 枝孢菌来源葡萄糖氧化酶的分子改良 | 第44-65页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第44页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第44页 |
| 3.1.2 引物合成 | 第44页 |
| 3.1.3 试剂盒、工具酶与生化试剂 | 第44页 |
| 3.1.4 培养基、溶液及面包制作材料 | 第44页 |
| 3.1.5 实验仪器 | 第44页 |
| 3.2 实验方法 | 第44-50页 |
| 3.2.1 序列及结构分析 | 第44-45页 |
| 3.2.2 突变体表达质粒的构建 | 第45-49页 |
| 3.2.3 毕赤酵母GS115 感受态的制备与电击转化 | 第49页 |
| 3.2.4 葡萄糖氧化酶阳性转化子的筛选 | 第49页 |
| 3.2.5 葡萄糖氧化酶的摇瓶发酵和纯化 | 第49页 |
| 3.2.6 纯化的葡萄糖氧化酶的性质测定 | 第49-50页 |
| 3.2.7 基于MD分析CnGOXA和CnGOXA-M1结构 | 第50页 |
| 3.2.8 面包制作流程 | 第50页 |
| 3.3 结果 | 第50-63页 |
| 3.3.1 序列和结构分析结果 | 第50-55页 |
| 3.3.2 葡萄糖氧化酶阳性转化子的筛选结果 | 第55-56页 |
| 3.3.3 葡萄糖氧化酶的摇瓶发酵与纯化结果 | 第56-58页 |
| 3.3.4 葡萄糖氧化酶的部分酶学性质测定结果 | 第58-61页 |
| 3.3.5 CnGOXA-M1对面包的影响 | 第61-62页 |
| 3.3.6 CnGOXB突变体的部分酶学性质测定结果 | 第62-63页 |
| 3.4 讨论 | 第63-64页 |
| 本章小结 | 第64-65页 |
| 第四章 全文总结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 作者简介 | 第76页 |
