| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-21页 |
| 1.1 放射与放射损伤 | 第9页 |
| 1.2 放射防护法 | 第9-10页 |
| 1.3 放射防护剂 | 第10-14页 |
| 1.3.1 巯基化合物 | 第10-11页 |
| 1.3.2 氮氧自由基类 | 第11-12页 |
| 1.3.3 天然抗氧化剂 | 第12页 |
| 1.3.4 细胞因子和生长因子类 | 第12-13页 |
| 1.3.5 细胞凋亡调节剂 | 第13-14页 |
| 1.3.6 血管紧张素转换酶抑制剂 | 第14页 |
| 1.4 超氧化物歧化酶 | 第14-15页 |
| 1.5 细胞穿膜肽 | 第15-18页 |
| 1.5.1 概述 | 第15-16页 |
| 1.5.2 细胞穿膜肽的应用 | 第16-17页 |
| 1.5.3 细胞穿膜肽的发展 | 第17-18页 |
| 1.6 本课题的来源 | 第18-19页 |
| 1.7 本课题目的与意义 | 第19-20页 |
| 1.8 本课题的研究内容 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-26页 |
| 2.1.1 实验细胞株、动物和蛋白 | 第21页 |
| 2.1.2 主要药品和试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 常用溶剂缓冲液 | 第22-26页 |
| 2.2 主要仪器 | 第26-28页 |
| 2.3 pGEX-4T-1-SOD1-R9原核表达载体的构建 | 第28-30页 |
| 2.3.1 目的基因SOD1-R9与质粒pGEX-4T-1连接 | 第28-29页 |
| 2.3.2 转化和重组子的鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.2.1 大肠杆菌BL21感受态细胞的制备 | 第29页 |
| 2.3.2.2 转化 | 第29页 |
| 2.3.2.3 质粒的小量制备 | 第29页 |
| 2.3.2.4 酶切鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.2.5 PCR鉴定及DNA测序 | 第30页 |
| 2.4 融合蛋白GST-SOD1-R9的表达、纯化及稳定性 | 第30-33页 |
| 2.4.1 GST-SOD1-R9融合蛋白表达条件的优化 | 第30-31页 |
| 2.4.1.1 诱导剂浓度的选择 | 第30页 |
| 2.4.1.2 诱导时间的选择 | 第30-31页 |
| 2.4.1.3 诱导温度的选择 | 第31页 |
| 2.4.2 GST-SOD1-R9融合蛋白的纯化 | 第31-32页 |
| 2.4.3 GST-SOD1-R9融合蛋白的鉴定 | 第32页 |
| 2.4.4 GST-SOD1-R9融合蛋白的稳定性表征 | 第32-33页 |
| 2.4.4.1 GST-SOD1-R9的热稳定性 | 第32页 |
| 2.4.4.2 GST-SOD1-R9的pH稳定性 | 第32-33页 |
| 2.5 GST-SOD1-X-R9融合蛋白的构建、表达、纯化及稳定性 | 第33页 |
| 2.6 两种融合蛋白的跨膜实验 | 第33-34页 |
| 2.6.1 细胞传代 | 第33页 |
| 2.6.2 细胞计数 | 第33-34页 |
| 2.6.3 融合蛋白的跨膜实验 | 第34页 |
| 2.7 两种融合蛋白对小鼠的放射防护效应 | 第34-37页 |
| 2.7.1 小鼠分组 | 第34-35页 |
| 2.7.2 小鼠照射 | 第35页 |
| 2.7.3 体重变化曲线测定 | 第35页 |
| 2.7.4 外周血白细胞数变化 | 第35页 |
| 2.7.5 胸腺指数和脾脏指数 | 第35页 |
| 2.7.6 小鼠脾脏病理学常规观察 | 第35-37页 |
| 2.7.6.1 石蜡切片 | 第35-36页 |
| 2.7.6.2 HE染色 | 第36-37页 |
| 2.7.7 脏器抗氧化能力的检测 | 第37页 |
| 2.8 实验数据处理 | 第37-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-59页 |
| 3.1 GST-SDO1-R9的构建、表达与纯化 | 第38-39页 |
| 3.2 融合蛋白GST-SOD1-R9的表达、纯化 | 第39-42页 |
| 3.2.1 融合蛋白GST-SOD1-R9的诱导表达及可溶性分析 | 第39-41页 |
| 3.2.1.1 诱导剂IPTG的最佳用量 | 第39-40页 |
| 3.2.1.2 最佳诱导时间 | 第40页 |
| 3.2.1.3 最佳诱导温度 | 第40-41页 |
| 3.2.2 融合蛋白GST-SOD1-R9的纯化与鉴定 | 第41-42页 |
| 3.2.2.1 融合蛋白的纯化 | 第41-42页 |
| 3.2.2.2 融合蛋白的鉴定 | 第42页 |
| 3.3 融合蛋白GST-SOD1-X-R9的表达、纯化 | 第42-46页 |
| 3.3.1 融合蛋白GST-SOD1-X-R9的表达 | 第42-43页 |
| 3.3.2 融合蛋白GST-SOD1-X-R9的纯化与鉴定 | 第43-44页 |
| 3.3.2.1 融合蛋白GST-SOD1-X-R9的纯化 | 第43页 |
| 3.3.2.2 融合蛋白GST-SOD1-X-R9的鉴定 | 第43-44页 |
| 3.3.3 两种融合蛋白的稳定性 | 第44-46页 |
| 3.3.3.1 热稳定性 | 第44-45页 |
| 3.3.3.2 pH稳定性 | 第45-46页 |
| 3.4 融合蛋白的跨膜实验 | 第46-47页 |
| 3.5 两种融合蛋白对小鼠的放射防护效应 | 第47-59页 |
| 3.5.1 对受照小鼠体重变化的影响 | 第47-49页 |
| 3.5.2 对受照鼠造血系统的影响(外周血白细胞数) | 第49-50页 |
| 3.5.3 对受照鼠免疫系统的影响(脾脏和胸腺) | 第50-53页 |
| 3.5.4 对受照鼠肝脏组织的防护效应 | 第53-59页 |
| 讨论 | 第59-62页 |
| 总结与展望 | 第62-64页 |
| 总结 | 第62-63页 |
| 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 个人简历 | 第71页 |
