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新型双效抗氧化酶的放射防护效应

中文摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 绪论第9-21页
    1.1 放射与放射损伤第9页
    1.2 放射防护法第9-10页
    1.3 放射防护剂第10-14页
        1.3.1 巯基化合物第10-11页
        1.3.2 氮氧自由基类第11-12页
        1.3.3 天然抗氧化剂第12页
        1.3.4 细胞因子和生长因子类第12-13页
        1.3.5 细胞凋亡调节剂第13-14页
        1.3.6 血管紧张素转换酶抑制剂第14页
    1.4 超氧化物歧化酶第14-15页
    1.5 细胞穿膜肽第15-18页
        1.5.1 概述第15-16页
        1.5.2 细胞穿膜肽的应用第16-17页
        1.5.3 细胞穿膜肽的发展第17-18页
    1.6 本课题的来源第18-19页
    1.7 本课题目的与意义第19-20页
    1.8 本课题的研究内容第20-21页
第二章 材料与方法第21-38页
    2.1 实验材料第21-26页
        2.1.1 实验细胞株、动物和蛋白第21页
        2.1.2 主要药品和试剂第21-22页
        2.1.3 常用溶剂缓冲液第22-26页
    2.2 主要仪器第26-28页
    2.3 pGEX-4T-1-SOD1-R9原核表达载体的构建第28-30页
        2.3.1 目的基因SOD1-R9与质粒pGEX-4T-1连接第28-29页
        2.3.2 转化和重组子的鉴定第29-30页
            2.3.2.1 大肠杆菌BL21感受态细胞的制备第29页
            2.3.2.2 转化第29页
            2.3.2.3 质粒的小量制备第29页
            2.3.2.4 酶切鉴定第29-30页
            2.3.2.5 PCR鉴定及DNA测序第30页
    2.4 融合蛋白GST-SOD1-R9的表达、纯化及稳定性第30-33页
        2.4.1 GST-SOD1-R9融合蛋白表达条件的优化第30-31页
            2.4.1.1 诱导剂浓度的选择第30页
            2.4.1.2 诱导时间的选择第30-31页
            2.4.1.3 诱导温度的选择第31页
        2.4.2 GST-SOD1-R9融合蛋白的纯化第31-32页
        2.4.3 GST-SOD1-R9融合蛋白的鉴定第32页
        2.4.4 GST-SOD1-R9融合蛋白的稳定性表征第32-33页
            2.4.4.1 GST-SOD1-R9的热稳定性第32页
            2.4.4.2 GST-SOD1-R9的pH稳定性第32-33页
    2.5 GST-SOD1-X-R9融合蛋白的构建、表达、纯化及稳定性第33页
    2.6 两种融合蛋白的跨膜实验第33-34页
        2.6.1 细胞传代第33页
        2.6.2 细胞计数第33-34页
        2.6.3 融合蛋白的跨膜实验第34页
    2.7 两种融合蛋白对小鼠的放射防护效应第34-37页
        2.7.1 小鼠分组第34-35页
        2.7.2 小鼠照射第35页
        2.7.3 体重变化曲线测定第35页
        2.7.4 外周血白细胞数变化第35页
        2.7.5 胸腺指数和脾脏指数第35页
        2.7.6 小鼠脾脏病理学常规观察第35-37页
            2.7.6.1 石蜡切片第35-36页
            2.7.6.2 HE染色第36-37页
        2.7.7 脏器抗氧化能力的检测第37页
    2.8 实验数据处理第37-38页
第三章 结果与分析第38-59页
    3.1 GST-SDO1-R9的构建、表达与纯化第38-39页
    3.2 融合蛋白GST-SOD1-R9的表达、纯化第39-42页
        3.2.1 融合蛋白GST-SOD1-R9的诱导表达及可溶性分析第39-41页
            3.2.1.1 诱导剂IPTG的最佳用量第39-40页
            3.2.1.2 最佳诱导时间第40页
            3.2.1.3 最佳诱导温度第40-41页
        3.2.2 融合蛋白GST-SOD1-R9的纯化与鉴定第41-42页
            3.2.2.1 融合蛋白的纯化第41-42页
            3.2.2.2 融合蛋白的鉴定第42页
    3.3 融合蛋白GST-SOD1-X-R9的表达、纯化第42-46页
        3.3.1 融合蛋白GST-SOD1-X-R9的表达第42-43页
        3.3.2 融合蛋白GST-SOD1-X-R9的纯化与鉴定第43-44页
            3.3.2.1 融合蛋白GST-SOD1-X-R9的纯化第43页
            3.3.2.2 融合蛋白GST-SOD1-X-R9的鉴定第43-44页
        3.3.3 两种融合蛋白的稳定性第44-46页
            3.3.3.1 热稳定性第44-45页
            3.3.3.2 pH稳定性第45-46页
    3.4 融合蛋白的跨膜实验第46-47页
    3.5 两种融合蛋白对小鼠的放射防护效应第47-59页
        3.5.1 对受照小鼠体重变化的影响第47-49页
        3.5.2 对受照鼠造血系统的影响(外周血白细胞数)第49-50页
        3.5.3 对受照鼠免疫系统的影响(脾脏和胸腺)第50-53页
        3.5.4 对受照鼠肝脏组织的防护效应第53-59页
讨论第59-62页
总结与展望第62-64页
    总结第62-63页
    展望第63-64页
参考文献第64-70页
致谢第70-71页
个人简历第71页

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