| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 第一章 前言 | 第14-35页 |
| 1.1 天然产物与药物研发 | 第14-16页 |
| 1.2 细胞周期 | 第16-23页 |
| 1.2.1 肿瘤与细胞周期调控 | 第16-17页 |
| 1.2.2 CDKs | 第17-18页 |
| 1.2.3 Cyclins | 第18-19页 |
| 1.2.4 细胞周期检测点 | 第19-23页 |
| 1.2.4.1 G1/S检测点 | 第19-20页 |
| 1.2.4.2 S检测点 | 第20-21页 |
| 1.2.4.3 G2检测点 | 第21-23页 |
| 1.2.4.4 M检测点 | 第23页 |
| 1.3 热休克蛋白 | 第23-32页 |
| 1.3.1 Hsp90简介 | 第24页 |
| 1.3.2 Hsp90的客户蛋白 | 第24-32页 |
| 1.3.2.1 src | 第25页 |
| 1.3.2.2 HER2 | 第25-27页 |
| 1.3.2.3 Akt/Bad | 第27-28页 |
| 1.3.2.4 IKK/IκB/NF-κB | 第28-30页 |
| 1.3.2.5 Raf/MEK/ERK | 第30-32页 |
| 1.4 立题背景与意义 | 第32-35页 |
| 第二章 材料与方法 | 第35-51页 |
| 2.1 材料 | 第35-42页 |
| 2.1.1 化合物来源 | 第35页 |
| 2.1.2 细胞来源 | 第35页 |
| 2.1.3 质粒来源 | 第35页 |
| 2.1.4 Hsp90蛋白来源 | 第35页 |
| 2.1.5 主要试剂和试剂盒 | 第35-38页 |
| 2.1.6 主要耗材和仪器 | 第38-39页 |
| 2.1.7 主要试剂的配制 | 第39-42页 |
| 2.2 实验方法 | 第42-51页 |
| 2.2.1 细胞复苏、传代与冻存 | 第42-43页 |
| 2.2.1.1 培养基选择 | 第42页 |
| 2.2.1.2 细胞复苏 | 第42页 |
| 2.2.1.3 细胞传代 | 第42-43页 |
| 2.2.1.4 细胞冻存 | 第43页 |
| 2.2.2 抗肿瘤活性测定 | 第43-44页 |
| 2.2.2.1 MTT法测定细胞增殖抑制 | 第43-44页 |
| 2.2.2.2 CCK-8法细胞毒性分析 | 第44页 |
| 2.2.3 流式细胞术 | 第44-46页 |
| 2.2.3.1 细胞存活率测定 | 第44-45页 |
| 2.2.3.2 细胞凋亡检测 | 第45页 |
| 2.2.3.3 细胞周期检测 | 第45-46页 |
| 2.2.4 DAPI染色法 | 第46-47页 |
| 2.2.5 Western-Blotting检测 | 第47-48页 |
| 2.2.6 荧光光谱实验 | 第48页 |
| 2.2.7 ForteBio OctetRed实验 | 第48-51页 |
| 第三章 结果与分析 | 第51-77页 |
| 3.1 细胞毒活性筛选 | 第51-58页 |
| 3.1.1 天然小分子化合物库(13-16)的筛选 | 第51-55页 |
| 3.1.2 MP-HJ系列化合物筛选 | 第55页 |
| 3.1.3 其它小分子化合物 | 第55-57页 |
| 3.1.4 细胞毒活性筛选小结 | 第57-58页 |
| 3.2 wyz-xm-5抗肿瘤活性作用机制初探 | 第58-74页 |
| 3.2.1 wyz-xm-5抑制肿瘤细胞的生长和增殖 | 第59-61页 |
| 3.2.2 wyz-xm-5对肿瘤细胞形态的影响 | 第61-63页 |
| 3.2.3 wyz-xm-5对BGC-823细胞周期的影响 | 第63-68页 |
| 3.2.3.1 wyz-xm-5对BGC-823细胞周期分布的影响 | 第64-67页 |
| 3.2.3.2 wyz-xm-5对BGC-823细胞周期相关蛋白的影响 | 第67-68页 |
| 3.2.4 wyz-xm-5引起BGC-823细胞死亡途径的探讨 | 第68-71页 |
| 3.2.4.1 Annexin V-FITC/PI | 第68-69页 |
| 3.2.4.2 wyz-xm-5对BGC-823细胞凋亡相关蛋白的影响 | 第69-71页 |
| 3.2.5 wyz-xm-5与Hsp90 | 第71-74页 |
| 3.2.5.1 wyz-xm-5对BGC-823细胞株中Hsp90相关蛋白的影响 | 第71-72页 |
| 3.2.5.2 荧光滴定法分析Hsp90与wyz-xm-5的体外相互作用 | 第72-74页 |
| 3.2.5.3 Fortebio分析Hsp90与wyz-xm-5的体外相互作用 | 第74页 |
| 3.3 基于肿瘤细胞毒活性的Hsp90潜在抑制剂的筛选 | 第74-77页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第77-81页 |
| 4.1 讨论 | 第77-78页 |
| 4.1.1 抗肿瘤化合物的筛选 | 第77页 |
| 4.1.2 wyz-xm-5的抗肿瘤活性 | 第77-78页 |
| 4.2 结论 | 第78-79页 |
| 4.3 展望 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 附录一 | 第87-89页 |
| 附录二 | 第89-103页 |
