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海洋中利用细菌细胞壁肽聚糖关键组分D型丙氨酸及二氨基庚二酸细菌的多样性及酶学研究

缩略词表第7-8页
摘要第8-11页
Abstract第11-13页
第一章 研究背景与立题依据第14-22页
    1.1 研究背景第14-19页
        1.1.1 海洋生态环境第14页
        1.1.2 海洋生态环境中的微生物第14-15页
        1.1.3 细菌细胞壁中的肽聚糖第15-17页
        1.1.4 海洋环境中的D型丙氨酸第17-18页
        1.1.5 海洋环境中的二氨基庚二酸第18-19页
    1.2 立题依据和研究内容第19-22页
        1.2.1 立题依据第19-21页
            1.2.1.1 Pseudoalteromonas sp. CF6-2能降解革兰氏阳性菌肽聚糖释放D-Ala第19-20页
            1.2.1.2 海洋中细菌利用二氨基庚二酸的研究进展第20-21页
        1.2.2 研究内容第21-22页
第二章 深海细菌Pseudoalteromonas sp. CF6-2利用D-Ala代谢通路中关键酶的体外功能验证与表征第22-53页
    2.1 引言第22页
    2.2 材料和方法第22-33页
        2.2.1 菌株与质粒第22-23页
        2.2.2 主要试剂与试剂盒第23-24页
        2.2.3 主要仪器与耗材第24-25页
        2.2.4 培养基的配制第25-26页
        2.2.5 菌株的培养与保藏第26页
        2.2.6 酶的异源表达与纯化第26-28页
        2.2.7 D-Ala连接酶酶活测定及性质分析第28-29页
        2.2.8 脱氢酶法测定Ala消旋酶D-Ala到L-Ala方向酶活第29-30页
        2.2.9 氧化酶法测定Ala消旋酶L-Ala到D-Ala方向酶活第30-31页
        2.2.10 CD法测定Ala消旋酶双方向的酶活第31-33页
        2.2.11 D-Ala氨基转移酶1756的酶活测定第33页
    2.3 结果第33-49页
        2.3.1 CF6-2以D-Ala为唯一氮源的生长情况第33-35页
        2.3.2 D-Ala连接酶0208、Ala消旋酶3059和D-Ala氨基转移酶1756的异源表达与分离纯化第35-37页
        2.3.3 D-Ala连接酶0208的酶活测定和性质分析第37-40页
        2.3.4 Ala消旋酶3059的酶活测定第40-47页
            2.3.4.1 脱氢酶法测定Ala消旋酶3059 D-Ala到L-Ala方向酶活第40-41页
            2.3.4.2 氧化酶法测定Ala消旋酶3059 L-Ala到D-Ala方向酶活第41-43页
            2.3.4.3 圆二色光谱法测定Ala消旋酶3059双方向的酶活第43-47页
        2.3.5 D-Ala氨基转移酶1756的酶活测定第47-49页
    2.4 讨论第49-53页
第三章 西太平洋水样中利用二氨基庚二酸细菌的多样性分析及菌株筛选第53-70页
    3.1 引言第53页
    3.2 材料和方法第53-55页
        3.2.1 海水样品第53-54页
        3.2.2 培养基第54页
        3.2.3 主要试剂与试剂盒第54页
        3.2.4 主要仪器与耗材第54页
        3.2.5 菌株富集、多样性分析与筛选第54-55页
    3.3 结果第55-68页
        3.3.1 西太平洋水样中利用二氨基庚二酸菌株的富集与多样性分析第55-65页
        3.3.2 西太平洋水样中利用二氨基庚二酸菌株的分离和种属鉴定第65-68页
    3.4 讨论第68-70页
第四章 西太平洋细菌利用二氨基庚二酸的代谢通路研究第70-78页
    4.1 引言第70页
    4.2 材料和方法第70-71页
        4.2.1 菌株与质粒第70页
        4.2.2 培养基第70-71页
        4.2.3 主要试剂与试剂盒第71页
        4.2.4 主要仪器与耗材第71页
        4.2.5 基因组测序与分析第71页
    4.3 结果第71-76页
        4.3.1 Microbacterium sp. A32-1利用DAP能力验证、基因组测序和代谢通路分析第71-74页
        4.3.2 Thalassospira sp.B30-1利用DAP能力验证、基因组测序和代谢通路分析第74-76页
    4.4 讨论第76-78页
全文总结与展望第78-80页
参考文献第80-99页
致谢第99-100页
学位论文评阅及答辩情况表第100页

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