摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
1 前言 | 第10-20页 |
1.1 Ngb的概述 | 第10-16页 |
1.1.1 Ngb的基本结构与性质 | 第10页 |
1.1.2 Ngb的分布 | 第10页 |
1.1.3 Ngb的主要功能 | 第10-12页 |
1.1.4 Ngb的神经保护机制 | 第12-16页 |
1.2 Dvl1的简介 | 第16-19页 |
1.2.1 Dvl1的结构 | 第16-18页 |
1.2.2 Dvl1的亚细胞定位 | 第18页 |
1.2.3 Dvl1的活性调节 | 第18页 |
1.2.4 Dvl1的生理功能 | 第18-19页 |
1.3 研究目的和意义 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-36页 |
2.1 实验材料 | 第20-26页 |
2.1.1 菌种和细胞 | 第20页 |
2.1.2 质粒载体和siRNA | 第20页 |
2.1.3 试剂 | 第20-22页 |
2.1.4 试剂盒 | 第22页 |
2.1.5 抗体 | 第22-23页 |
2.1.6 仪器设备 | 第23-24页 |
2.1.7 所需溶液配方 | 第24-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-36页 |
2.2.1 表达质粒去内毒的小量制备 | 第26-27页 |
2.2.2 细胞培养 | 第27-28页 |
2.2.3 脂质体转染 | 第28页 |
2.2.4 收集细胞总蛋白 | 第28-29页 |
2.2.5 免疫共沉淀 | 第29页 |
2.2.6 免疫荧光共定位实验 | 第29-30页 |
2.2.7 Western blot分析 | 第30-33页 |
2.2.8 CHX处理实验 | 第33页 |
2.2.9 MG132处理实验 | 第33-34页 |
2.2.10 泛素化实验 | 第34页 |
2.2.11 荧光素酶报告基因分析 | 第34-35页 |
2.2.12 统计学分析 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-42页 |
3.1 Dvl1与Ngb存在相互作用 | 第36-37页 |
3.2 Ngb促进Dvl1蛋白水平的降解 | 第37-38页 |
3.3 Ngb促进Dvl1降解可能依赖于泛素-蛋白酶体途 | 第38-40页 |
3.4 Ngb下调Wnt信号通路的活性 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-44页 |
5 参考文献 | 第44-52页 |
附录 | 第52-54页 |
致谢 | 第54-56页 |