摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-19页 |
1.1 lncRNA的发现 | 第12页 |
1.2 lncRNA的研究进展 | 第12-13页 |
1.3 lncRNA的来源及结构 | 第13页 |
1.3.1 lncRNA的来源 | 第13页 |
1.3.2 lncRNA的结构 | 第13页 |
1.4 植物lncRNA分子机制的研究 | 第13-15页 |
1.4.1 信号分子 | 第14页 |
1.4.2 诱导分子 | 第14页 |
1.4.3 引导分子 | 第14-15页 |
1.4.4 骨架分子 | 第15页 |
1.5 LncRNA的研究方法 | 第15-18页 |
1.5.1 lncRNA的测序方法 | 第15-16页 |
1.5.2 lncRNA的验证 | 第16-17页 |
1.5.3 lncRNA与蛋白质相互作用的方法 | 第17-18页 |
1.6 本试验的研究目的及研究内容 | 第18-19页 |
1.6.1 研究目的 | 第18页 |
1.6.2 研究内容 | 第18-19页 |
第二章 lncRNA测序结果分析 | 第19-25页 |
2.1 试验材料和方法 | 第19-20页 |
2.1.1 试验材料 | 第19页 |
2.1.2 lncRNA的筛选 | 第19-20页 |
2.1.3 苹果lncRNA特点分析 | 第20页 |
2.1.4 苹果lncRNA与miRNA的关系 | 第20页 |
2.2 结果与分析 | 第20-23页 |
2.2.1 测序基本数据 | 第20页 |
2.2.2 苹果lncRNA长度分析 | 第20页 |
2.2.3 lncRNA的表达特点 | 第20-22页 |
2.2.4 lncRNA与miRNA的关系 | 第22-23页 |
2.3 讨论 | 第23-25页 |
2.3.1 苹果lncRNA的长度分布与其他物种相似 | 第23页 |
2.3.2 苹果lncRNA的表达特点 | 第23-24页 |
2.3.3 苹果lncRNA与miRNA之间的相互作用 | 第24-25页 |
第三章 不同干旱处理下苹果lncRNA的表达分析 | 第25-34页 |
3.1 试验材料 | 第25页 |
3.2 试验方法 | 第25-28页 |
3.2.1 苹果不同干旱条件下差异lncRNA的筛选 | 第25页 |
3.2.2 RNA提取 | 第25-26页 |
3.2.3 反转录RNA | 第26-27页 |
3.2.4 实时荧光定量PCR | 第27-28页 |
3.2.5 苹果lncRNA生物学功能预测 | 第28页 |
3.3 试验结果 | 第28-32页 |
3.3.1 苹果不同干旱条件下表达有差异的lncRNA | 第28页 |
3.3.2 不同干旱条件下差异显著的lncRNA | 第28-29页 |
3.3.3 总RNA提取和cDNA合成 | 第29页 |
3.3.4 实时定量PCR | 第29-30页 |
3.3.5 lncRNA靶基因和生物学功能预测 | 第30-32页 |
3.4 讨论 | 第32-34页 |
3.4.1 RNA提取 | 第32页 |
3.4.2 lncRNA表达分析 | 第32-33页 |
3.4.3 lncRNA靶基因的表达分析 | 第33-34页 |
第四章 lncRNA的克隆及功能分析 | 第34-50页 |
4.1 材料及试剂 | 第34页 |
4.1.1 试验材料 | 第34页 |
4.1.2 试验试剂 | 第34页 |
4.1.3 培养基 | 第34页 |
4.2 试验方法 | 第34-44页 |
4.2.1 拟南芥种植 | 第34-35页 |
4.2.2 苹果RNA的抽提及反转录 | 第35页 |
4.2.3 目的基因的克隆 | 第35-37页 |
4.2.4 中间载体的构建 | 第37-40页 |
4.2.5 植物表达载体的构建 | 第40-41页 |
4.2.6 目的基因的转基因 | 第41-44页 |
4.3 试验结果 | 第44-48页 |
4.3.1 目的基因的扩增和pKANNIBAL载体酶切 | 第44页 |
4.3.2 重组pKANNIBAL质粒的阳性鉴定 | 第44页 |
4.3.3 重组pKANNIBAL质粒和pART27的酶切 | 第44-46页 |
4.3.4 pART27重组质粒阳性克隆鉴定 | 第46页 |
4.3.5 菌落PCR鉴定农杆菌阳性菌落 | 第46-47页 |
4.3.6 转基因拟南芥的筛选 | 第47-48页 |
4.4 讨论 | 第48-50页 |
第五章 转基因拟南芥的生理生化指标测定 | 第50-56页 |
5.1 试验材料及试剂 | 第50页 |
5.1.1 试验材料 | 第50页 |
5.1.2 试验试剂 | 第50页 |
5.2 试验方法 | 第50-52页 |
5.2.1 干旱处理 | 第50页 |
5.2.2 测定脯氨酸(Pro)含量 | 第50-51页 |
5.2.3 植物组织相对含水量(RWC)的测定 | 第51页 |
5.2.4 测定丙二醛(MDA)含量 | 第51-52页 |
5.2.5 测定叶绿素含量 | 第52页 |
5.3 试验结果 | 第52-55页 |
5.3.1 干旱处理下拟南芥的表型 | 第52-53页 |
5.3.2 生理指标测定 | 第53-55页 |
5.4 讨论 | 第55-56页 |
第六章 小结与展望 | 第56-57页 |
6.1 小结 | 第56页 |
6.2 展望 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
附录 | 第64-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
作者简介 | 第75页 |