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干旱胁迫下苹果lncRNA的表达分析及功能研究

摘要第5-7页
abstract第7-8页
第一章 文献综述第12-19页
    1.1 lncRNA的发现第12页
    1.2 lncRNA的研究进展第12-13页
    1.3 lncRNA的来源及结构第13页
        1.3.1 lncRNA的来源第13页
        1.3.2 lncRNA的结构第13页
    1.4 植物lncRNA分子机制的研究第13-15页
        1.4.1 信号分子第14页
        1.4.2 诱导分子第14页
        1.4.3 引导分子第14-15页
        1.4.4 骨架分子第15页
    1.5 LncRNA的研究方法第15-18页
        1.5.1 lncRNA的测序方法第15-16页
        1.5.2 lncRNA的验证第16-17页
        1.5.3 lncRNA与蛋白质相互作用的方法第17-18页
    1.6 本试验的研究目的及研究内容第18-19页
        1.6.1 研究目的第18页
        1.6.2 研究内容第18-19页
第二章 lncRNA测序结果分析第19-25页
    2.1 试验材料和方法第19-20页
        2.1.1 试验材料第19页
        2.1.2 lncRNA的筛选第19-20页
        2.1.3 苹果lncRNA特点分析第20页
        2.1.4 苹果lncRNA与miRNA的关系第20页
    2.2 结果与分析第20-23页
        2.2.1 测序基本数据第20页
        2.2.2 苹果lncRNA长度分析第20页
        2.2.3 lncRNA的表达特点第20-22页
        2.2.4 lncRNA与miRNA的关系第22-23页
    2.3 讨论第23-25页
        2.3.1 苹果lncRNA的长度分布与其他物种相似第23页
        2.3.2 苹果lncRNA的表达特点第23-24页
        2.3.3 苹果lncRNA与miRNA之间的相互作用第24-25页
第三章 不同干旱处理下苹果lncRNA的表达分析第25-34页
    3.1 试验材料第25页
    3.2 试验方法第25-28页
        3.2.1 苹果不同干旱条件下差异lncRNA的筛选第25页
        3.2.2 RNA提取第25-26页
        3.2.3 反转录RNA第26-27页
        3.2.4 实时荧光定量PCR第27-28页
        3.2.5 苹果lncRNA生物学功能预测第28页
    3.3 试验结果第28-32页
        3.3.1 苹果不同干旱条件下表达有差异的lncRNA第28页
        3.3.2 不同干旱条件下差异显著的lncRNA第28-29页
        3.3.3 总RNA提取和cDNA合成第29页
        3.3.4 实时定量PCR第29-30页
        3.3.5 lncRNA靶基因和生物学功能预测第30-32页
    3.4 讨论第32-34页
        3.4.1 RNA提取第32页
        3.4.2 lncRNA表达分析第32-33页
        3.4.3 lncRNA靶基因的表达分析第33-34页
第四章 lncRNA的克隆及功能分析第34-50页
    4.1 材料及试剂第34页
        4.1.1 试验材料第34页
        4.1.2 试验试剂第34页
        4.1.3 培养基第34页
    4.2 试验方法第34-44页
        4.2.1 拟南芥种植第34-35页
        4.2.2 苹果RNA的抽提及反转录第35页
        4.2.3 目的基因的克隆第35-37页
        4.2.4 中间载体的构建第37-40页
        4.2.5 植物表达载体的构建第40-41页
        4.2.6 目的基因的转基因第41-44页
    4.3 试验结果第44-48页
        4.3.1 目的基因的扩增和pKANNIBAL载体酶切第44页
        4.3.2 重组pKANNIBAL质粒的阳性鉴定第44页
        4.3.3 重组pKANNIBAL质粒和pART27的酶切第44-46页
        4.3.4 pART27重组质粒阳性克隆鉴定第46页
        4.3.5 菌落PCR鉴定农杆菌阳性菌落第46-47页
        4.3.6 转基因拟南芥的筛选第47-48页
    4.4 讨论第48-50页
第五章 转基因拟南芥的生理生化指标测定第50-56页
    5.1 试验材料及试剂第50页
        5.1.1 试验材料第50页
        5.1.2 试验试剂第50页
    5.2 试验方法第50-52页
        5.2.1 干旱处理第50页
        5.2.2 测定脯氨酸(Pro)含量第50-51页
        5.2.3 植物组织相对含水量(RWC)的测定第51页
        5.2.4 测定丙二醛(MDA)含量第51-52页
        5.2.5 测定叶绿素含量第52页
    5.3 试验结果第52-55页
        5.3.1 干旱处理下拟南芥的表型第52-53页
        5.3.2 生理指标测定第53-55页
    5.4 讨论第55-56页
第六章 小结与展望第56-57页
    6.1 小结第56页
    6.2 展望第56-57页
参考文献第57-64页
附录第64-74页
致谢第74-75页
作者简介第75页

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