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枯草芽孢杆菌SacB基因的克隆及其转化

目录第1-6页
中文摘要第6-7页
Abstract第7-8页
第一章 文献综述第8-19页
 1 果聚糖与植物第8-16页
   ·果聚糖的结构第9页
   ·果聚糖在植物中的合成第9-11页
   ·果聚糖的降解第11页
   ·植物中的果聚糖合成酶第11-12页
   ·果聚糖对植物逆性作用的机制第12-13页
   ·果聚糖与植物抗逆性研究的进展第13-15页
   ·果聚糖的应用以及存在的问题第15-16页
 2 辣椒的抗逆性研究概况第16-19页
   ·辣椒栽培的现状第16页
   ·逆境对辣椒的影响第16-17页
   ·辣椒转基因中存在的问题第17-19页
第二章 枯草芽孢杆菌SacB基因的克隆第19-29页
 1 材料与试剂第19页
 2 实验方法第19-23页
   ·枯草杆菌A33菌总DNA的提取及检测第19-20页
   ·用PCR的方法获得枯草芽孢杆菌SacB基因编码序列第20-23页
 3 结果与分析第23-27页
   ·枯草芽孢杆菌基因组DNA紫外检测结果第23页
   ·PCR扩增产物电泳检测结果第23页
   ·菌落PCR及酶切检测结果第23-24页
   ·测序结果第24-27页
 4 讨论第27-29页
第三章 马铃薯patatin引导肽编码序列的克隆第29-37页
 1 材料与试剂第29页
 2 实验方法第29-33页
   ·马铃薯基因组DNA的提取第29-30页
   ·用PCR的方法获得patatin引导肽编码序列第30-33页
 3 结果与分析第33-35页
   ·马铃薯基因组DNA提取第33页
   ·patatin引导肽编码序列的扩增第33-34页
   ·patatin引导肽编码序列分析第34-35页
 4 讨论第35-37页
第四章 patatin引导肽编码序列与SacB基因的重组及植物表达载体的构建第37-45页
 1 材料与试剂第37页
 2 实验方法第37-42页
   ·patatin引导肽的PCR扩增第37-38页
   ·SacB基因核心片段PCR扩增第38-40页
   ·patatin引导肽与SacB基因重组连接第40页
   ·植物表达载体pWM101-pat-sacB的构建及检测第40-42页
 3 结果与分析第42-43页
   ·植物表达载体pWM101-pat-sacB构建流程第42页
   ·重组载体的检测和酶切分析第42-43页
 4 讨论第43-45页
第五章 SacB功能的验证及辣椒转基因第45-60页
 1 材料与试剂第45-46页
   ·菌株与质粒第45页
   ·农杆菌菌种与培养基第45页
   ·植物材料及植物培养基第45-46页
   ·酶、试剂与试剂盒第46页
 2 实验方法第46-51页
   ·表达载体pWM-pat-sacB转化根癌农杆菌第46-48页
   ·叶盘法转化烟草第48-49页
   ·辣椒的转化第49-51页
 3 结果与分析第51-57页
   ·pWM101-pat-sacB转化农杆菌GV3101的检测第51页
   ·转基因烟草抗逆性的鉴定第51-54页
   ·辣椒的转化及检测第54-57页
 4 讨论第57-60页
   ·SacB基因转化烟草的研究意义第57页
   ·不同部位对辣椒组织培养的影响第57页
   ·用于转化的农杆菌的培养第57-58页
   ·农杆菌与叶盘共培养第58页
   ·诱导愈伤第58页
   ·生根与炼苗第58-59页
   ·通过测定葡萄糖含量验证SacB基因是否正确表达第59-60页
第六章 结论与展望第60-61页
 1 结论第60页
 2 展望第60-61页
参考文献第61-66页
附录A:缩略词表第66-67页
附录B:载体图谱第67-68页
附录C:SacB编码序列、patatin引导肽编码序列测序报告第68-71页
致谢第71-72页
作者简介第72页

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