中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-20页 |
1 植物转录因子研究进展 | 第10-14页 |
·植物转录因子的概念和基本分类 | 第10页 |
·植物转录因子的结构 | 第10-12页 |
·DNA结合域 | 第10-11页 |
·转录调控区域 | 第11页 |
·寡聚化位点 | 第11-12页 |
·核定位信号区 | 第12页 |
·植物转录因子生物学功能研究 | 第12-14页 |
·转录因子与植物的生长发育和形态建成 | 第12页 |
·转录因子与植物的抗逆性 | 第12-14页 |
·转录因子在植物抗非生物胁迫中的作用 | 第12-13页 |
·转录因子在植物抗病害中的作用 | 第13-14页 |
2 植物DOF转录因子的研究进展 | 第14-17页 |
·DOF转录因子的结构 | 第14-15页 |
·DOF转录因子的DNA结合特征 | 第15页 |
·DOF转录因子生物学功能的研究 | 第15-17页 |
3 RNA干扰技术 | 第17-18页 |
4 花序浸染法 | 第18-19页 |
5 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
第二章 拟南芥AtDof1.7基因序列的克隆和RNA干扰载体的构建 | 第20-38页 |
1 材料与方法 | 第20-29页 |
·材料 | 第20页 |
·实验材料 | 第20页 |
·菌株 | 第20页 |
·载体与质粒 | 第20页 |
·主要的生化试剂 | 第20页 |
·方法 | 第20-29页 |
·实验材料的准备 | 第20-21页 |
·植物总DNA的提取 | 第21-22页 |
·目的基因的PCR扩增 | 第22-25页 |
·拟南芥AtDofl.7基因序列的扩增 | 第22-23页 |
·油菜NapinA启动子的扩增 | 第23页 |
·DNA片段的凝胶回收 | 第23页 |
·PCR产物的TA克隆和转化大肠杆菌 | 第23-25页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
·PCR产物的TA克隆 | 第24页 |
·热激法转化大肠杆菌 | 第24-25页 |
·质粒的提取纯化 | 第25页 |
·PCR产物的测序和比对 | 第25-26页 |
·DNA片段连接目的载体 | 第26页 |
·干扰载体的构建 | 第26-28页 |
·pFGC5941.NA质粒的构建 | 第26页 |
·pFGC5941.AD质粒的构建 | 第26页 |
·干扰载体pFGC5941.Atdofl的构建 | 第26-28页 |
·重组质粒的酶切分析 | 第28页 |
·冻融法转化根癌农杆菌 | 第28-29页 |
·农杆菌LBA4404感受态细胞的制备 | 第28页 |
·农杆菌LBA4404的转化 | 第28-29页 |
2 结果与分析 | 第29-38页 |
·目的序列克隆与PCR扩增检测结果 | 第29-30页 |
·测序结果的同源性比对 | 第30-34页 |
·干扰载体的验证结果 | 第34-36页 |
·干扰载体转化农杆菌的检测结果 | 第36-38页 |
第三章 拟南芥的遗传转化及转化子的筛选 | 第38-45页 |
1 材料与方法 | 第38-42页 |
·材料 | 第38-39页 |
·实验材料 | 第38页 |
·培养基 | 第38-39页 |
·方法 | 第39-42页 |
·拟南芥的种植培养 | 第39页 |
·根癌农杆菌工作液的准备 | 第39页 |
·拟南芥的遗传转化 | 第39页 |
·转化子的PPT抗性初步筛选 | 第39-40页 |
·简易CTAB法提取DNA | 第40-41页 |
·转化苗PCR检测体系 | 第41-42页 |
2 结果与分析 | 第42-45页 |
·PPT抗性筛选转化子 | 第42页 |
·PCR检测体系引物的验证 | 第42-43页 |
·抗性苗PCR筛选结果 | 第43-45页 |
第四章 转化苗种子脂肪酸含量的测定 | 第45-48页 |
1 材料与方法 | 第45-46页 |
·材料 | 第45页 |
·试剂 | 第45页 |
·仪器 | 第45页 |
·取样方法及甲酯化处理 | 第45页 |
·气相色谱仪分析 | 第45-46页 |
2 结果及分析 | 第46-48页 |
·各个脂肪酸的出峰时间 | 第46页 |
·野生型拟南芥种子和转化株系种子脂肪酸组成测定结果· | 第46-48页 |
第五章 讨论 | 第48-52页 |
1. 关于干扰载体的构建 | 第48-49页 |
2. 关于拟南芥的遗传转化 | 第49页 |
3. 关于AtDof1.7转录因子的功能 | 第49-50页 |
4. 结论 | 第50-51页 |
5. 下一步的研究计划 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |