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拟南芥AtDof1.7基因RNA干扰载体的构建及遗传转化

中文摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 文献综述第10-20页
 1 植物转录因子研究进展第10-14页
   ·植物转录因子的概念和基本分类第10页
   ·植物转录因子的结构第10-12页
     ·DNA结合域第10-11页
     ·转录调控区域第11页
     ·寡聚化位点第11-12页
     ·核定位信号区第12页
   ·植物转录因子生物学功能研究第12-14页
     ·转录因子与植物的生长发育和形态建成第12页
     ·转录因子与植物的抗逆性第12-14页
       ·转录因子在植物抗非生物胁迫中的作用第12-13页
       ·转录因子在植物抗病害中的作用第13-14页
 2 植物DOF转录因子的研究进展第14-17页
   ·DOF转录因子的结构第14-15页
   ·DOF转录因子的DNA结合特征第15页
   ·DOF转录因子生物学功能的研究第15-17页
 3 RNA干扰技术第17-18页
 4 花序浸染法第18-19页
 5 本研究的目的和意义第19-20页
第二章 拟南芥AtDof1.7基因序列的克隆和RNA干扰载体的构建第20-38页
 1 材料与方法第20-29页
   ·材料第20页
     ·实验材料第20页
     ·菌株第20页
     ·载体与质粒第20页
     ·主要的生化试剂第20页
   ·方法第20-29页
     ·实验材料的准备第20-21页
     ·植物总DNA的提取第21-22页
     ·目的基因的PCR扩增第22-25页
       ·拟南芥AtDofl.7基因序列的扩增第22-23页
       ·油菜NapinA启动子的扩增第23页
       ·DNA片段的凝胶回收第23页
       ·PCR产物的TA克隆和转化大肠杆菌第23-25页
         ·大肠杆菌感受态细胞的制备第23-24页
         ·PCR产物的TA克隆第24页
         ·热激法转化大肠杆菌第24-25页
     ·质粒的提取纯化第25页
     ·PCR产物的测序和比对第25-26页
     ·DNA片段连接目的载体第26页
     ·干扰载体的构建第26-28页
       ·pFGC5941.NA质粒的构建第26页
       ·pFGC5941.AD质粒的构建第26页
       ·干扰载体pFGC5941.Atdofl的构建第26-28页
     ·重组质粒的酶切分析第28页
     ·冻融法转化根癌农杆菌第28-29页
       ·农杆菌LBA4404感受态细胞的制备第28页
       ·农杆菌LBA4404的转化第28-29页
 2 结果与分析第29-38页
   ·目的序列克隆与PCR扩增检测结果第29-30页
   ·测序结果的同源性比对第30-34页
   ·干扰载体的验证结果第34-36页
   ·干扰载体转化农杆菌的检测结果第36-38页
第三章 拟南芥的遗传转化及转化子的筛选第38-45页
 1 材料与方法第38-42页
   ·材料第38-39页
     ·实验材料第38页
     ·培养基第38-39页
   ·方法第39-42页
     ·拟南芥的种植培养第39页
     ·根癌农杆菌工作液的准备第39页
     ·拟南芥的遗传转化第39页
     ·转化子的PPT抗性初步筛选第39-40页
     ·简易CTAB法提取DNA第40-41页
     ·转化苗PCR检测体系第41-42页
 2 结果与分析第42-45页
   ·PPT抗性筛选转化子第42页
   ·PCR检测体系引物的验证第42-43页
   ·抗性苗PCR筛选结果第43-45页
第四章 转化苗种子脂肪酸含量的测定第45-48页
 1 材料与方法第45-46页
   ·材料第45页
   ·试剂第45页
   ·仪器第45页
   ·取样方法及甲酯化处理第45页
   ·气相色谱仪分析第45-46页
 2 结果及分析第46-48页
   ·各个脂肪酸的出峰时间第46页
   ·野生型拟南芥种子和转化株系种子脂肪酸组成测定结果·第46-48页
第五章 讨论第48-52页
 1. 关于干扰载体的构建第48-49页
 2. 关于拟南芥的遗传转化第49页
 3. 关于AtDof1.7转录因子的功能第49-50页
 4. 结论第50-51页
 5. 下一步的研究计划第51-52页
参考文献第52-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

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