中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略语/符号说明 | 第14-15页 |
前言 | 第15-21页 |
研究现状、成果 | 第15-19页 |
研究目的、方法 | 第19-21页 |
一、Amlexanox通过激活Hippo通路抑制人胶质母细胞瘤进展的体外研究 | 第21-71页 |
1.1 对象和方法 | 第21-26页 |
1.1.1 细胞系及细胞培养主要试剂 | 第21页 |
1.1.2 测定IC50所需要的主要试剂 | 第21页 |
1.1.3 细胞集落形成主要试剂 | 第21-22页 |
1.1.4 细胞转染和质粒提取主要试剂 | 第22页 |
1.1.5 细胞周期和细胞凋亡检测主要试剂 | 第22页 |
1.1.6 细胞总蛋白和胞浆胞核提取主要试剂 | 第22页 |
1.1.7 细胞RNA提取和qRT-PCR检测主要试剂 | 第22页 |
1.1.8 免疫共沉淀主要试剂 | 第22页 |
1.1.9 细胞免疫荧光主要试剂 | 第22页 |
1.1.10 免疫印记主要试剂 | 第22-23页 |
1.1.11 实验用主要抗体 | 第23页 |
1.1.12 实验仪器 | 第23页 |
1.1.13 实验耗材 | 第23-24页 |
1.1.14 实验溶液配置方法 | 第24-26页 |
1.2 实验方法 | 第26-43页 |
1.2.1 细胞培养 | 第26-27页 |
1.2.2 CCK-8实验 | 第27-28页 |
1.2.3 克隆形成实验 | 第28-29页 |
1.2.4 划痕实验 | 第29页 |
1.2.5 Transwell实验 | 第29-30页 |
1.2.6 细胞周期实验 | 第30-31页 |
1.2.7 细胞凋亡实验 | 第31-32页 |
1.2.8 菌种筛选、扩增及冻存 | 第32页 |
1.2.9 质粒提取 | 第32-34页 |
1.2.10 质粒浓度测定 | 第34页 |
1.2.11 病毒和质粒转染 | 第34-35页 |
1.2.12 细胞蛋白提取 | 第35-37页 |
1.2.13 ELISA实验 | 第37-38页 |
1.2.14 免疫印迹实验 | 第38-39页 |
1.2.15 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR) | 第39-41页 |
1.2.16 免疫共沉淀 | 第41-42页 |
1.2.17 免疫荧光实验 | 第42-43页 |
1.2.18 琼脂糖凝胶电泳 | 第43页 |
1.2.19 统计学方法 | 第43页 |
1.3 实验结果 | 第43-67页 |
1.3.1 Amlexanox可以抑制胶质母细胞瘤细胞的生长 | 第43-45页 |
1.3.2 Amlexanox可以抑制胶质母细胞瘤细胞克隆形成能力 | 第45-46页 |
1.3.3 Amlexanox可以诱导胶质母细胞瘤细胞周期阻滞 | 第46-47页 |
1.3.4 Amlexanox可以诱导胶质母细胞瘤细胞凋亡 | 第47-49页 |
1.3.5 Amlexanox可以抑制胶质母细胞瘤细胞的迁移 | 第49-53页 |
1.3.6 Amlexanox可以抑制胶质母细胞瘤细胞的侵袭 | 第53-54页 |
1.3.7 Amlexanox通过下调IKBKE蛋白表达进而激活Hippo通路,抑制胶质母细胞瘤的进展 | 第54-57页 |
1.3.8 IKBKE蛋白表达改变可以调控Hippo通路的核心蛋白及其下游靶蛋白 | 第57-59页 |
1.3.9 敲低IKBKE蛋白后,Hippo通路的核心蛋白在胞浆和胞核中的改变 | 第59-62页 |
1.3.10 IKBKE蛋白可以通过促进LATS1/2泛素化降解而下调LATS1/2表达 | 第62-67页 |
1.4 讨论 | 第67-70页 |
1.5 小结 | 第70-71页 |
二、Amlexanox抑制人胶质母细胞瘤进展的体内研究 | 第71-89页 |
2.1 对象和方法 | 第71-73页 |
2.1.1 实验动物 | 第71页 |
2.1.2 细胞系 | 第71页 |
2.1.3 重组慢病毒载体 | 第71页 |
2.1.4 实验试剂 | 第71-72页 |
2.1.5 实验溶液配制方法 | 第72页 |
2.1.6 实验仪器和器材 | 第72-73页 |
2.2 实验方法 | 第73-79页 |
2.2.1 慢病毒转染细胞 | 第73页 |
2.2.2 裸鼠皮下肿瘤模型的建立 | 第73-74页 |
2.2.3 裸鼠颅内肿瘤模型的建立 | 第74-75页 |
2.2.4 苏木素-伊红染色(HE染色) | 第75-76页 |
2.2.5 免疫组织化学染色 | 第76页 |
2.2.6 裸鼠解剖及标本处理 | 第76-77页 |
2.2.7 实验动物安全防护 | 第77-78页 |
2.2.8 统计学方法 | 第78-79页 |
2.3 实验结果 | 第79-87页 |
2.3.1 Amlexanox可以抑制裸鼠皮下肿瘤的生长 | 第79-84页 |
2.3.2 Amlexanox可以抑制裸鼠颅内肿瘤的生长 | 第84-87页 |
2.4 讨论 | 第87-88页 |
2.5 小结 | 第88-89页 |
全文结论 | 第89-90页 |
论文创新点 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-97页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第97-98页 |
附录 | 第98-99页 |
综述 IKKε:炎症和肿瘤形成中的重要调节因子 | 第99-116页 |
综述参考文献 | 第109-116页 |
致谢 | 第116-118页 |
个人简历 | 第118页 |