| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 1.文献综述 | 第13-25页 |
| 1.1 概述 | 第13-14页 |
| 1.2 家蚕质型多角体病毒 | 第14-17页 |
| 1.2.1 病毒的分类 | 第14页 |
| 1.2.2 病毒的形态及结构特性 | 第14-17页 |
| 1.2.3 病毒的入侵机制 | 第17页 |
| 1.3 家蚕抗病毒策略 | 第17-21页 |
| 1.3.1 增量表达抗性基因 | 第18页 |
| 1.3.2 干涉病原基因 | 第18-20页 |
| 1.3.3 调控免疫通路 | 第20-21页 |
| 1.4 BmCPV抗病毒研究进展 | 第21-25页 |
| 1.4.1 遗传抗性及环境影响因素 | 第21页 |
| 1.4.2 免疫应答相关基因 | 第21-22页 |
| 1.4.3 免疫调控途径 | 第22-23页 |
| 1.4.4 抗BmCPV的转基因研究 | 第23-25页 |
| 2.引言 | 第25-27页 |
| 2.1 研究背景及意义 | 第25页 |
| 2.2 研究内容 | 第25-26页 |
| 2.3 研究路线 | 第26-27页 |
| 3.增量表达BmPGRP-S2激活免疫通路抑制BmCPV提高转基因家蚕抗性 | 第27-55页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第27-31页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第27页 |
| 3.1.2 主要试剂及仪器 | 第27-29页 |
| 3.1.3 主要溶液配制 | 第29-31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-42页 |
| 3.2.1 BmPGRP-S2基因的克隆 | 第31-35页 |
| 3.2.2 BmPGRP-S2基因的氨基酸序列分析 | 第35页 |
| 3.2.3 多序列比对分析 | 第35页 |
| 3.2.4 构建增量表达载体 | 第35页 |
| 3.2.5 瞬时增量表达BmPGRP-S2 | 第35-37页 |
| 3.2.6 转基因增量表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 3.2.7 注射蚕卵的制备 | 第38页 |
| 3.2.8 显微注射 | 第38页 |
| 3.2.9 转基因阳性个体的筛选 | 第38页 |
| 3.2.10 转基因家蚕的分子检测 | 第38-42页 |
| 3.2.11 转基因家蚕的抗性检测及免疫通路检测 | 第42页 |
| 3.2.12 转基因家蚕的经济性状调查 | 第42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-52页 |
| 3.3.1 BmPGRP-S2基因的克隆及序列分析 | 第42-43页 |
| 3.3.2 BmPGRP-S2不具备酰胺酶活性 | 第43-44页 |
| 3.3.3 细胞上Toll和Imd通路的检测 | 第44-46页 |
| 3.3.4 增量表达BmPGRP-S2的转基因家蚕制备 | 第46-47页 |
| 3.3.5 转基因家蚕插入位点检测 | 第47-48页 |
| 3.3.6 转基因家蚕中BmPGRP-S2表达量检测 | 第48-49页 |
| 3.3.7 转基因家蚕的抗性检测 | 第49-50页 |
| 3.3.8 转基因家蚕的主要经济性状调查 | 第50-51页 |
| 3.3.9 转基因家蚕的免疫通路基因检测 | 第51-52页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第52-55页 |
| 4.增量表达BmSCP1在感染初期抑制BmCPV提高转基因家蚕抗性 | 第55-75页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第55-56页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第55页 |
| 4.1.2 主要试剂及仪器 | 第55-56页 |
| 4.1.3 主要溶液配制 | 第56页 |
| 4.2 实验方法 | 第56-59页 |
| 4.2.1 原核表达载体构建 | 第56-57页 |
| 4.2.2 原核表达蛋白检测 | 第57页 |
| 4.2.3 包涵体蛋白纯化 | 第57-59页 |
| 4.2.4 肠液提取 | 第59页 |
| 4.2.5 肠液与病毒孵育实验 | 第59页 |
| 4.3 结果与分析 | 第59-73页 |
| 4.3.1 BmSCP1的克隆及序列分析 | 第59-60页 |
| 4.3.2 BmSCP1具有丝氨酸蛋白酶催化中心 | 第60-61页 |
| 4.3.3 BmSCP1属于分泌蛋白 | 第61-62页 |
| 4.3.4 BmSCP1原核表达载体的构建 | 第62-63页 |
| 4.3.5 BmSCP1融合蛋白的原核表达 | 第63-65页 |
| 4.3.6 pET28a-SCP1融合蛋白的纯化 | 第65-66页 |
| 4.3.7 BmSCP1多克隆抗体的制备与检测 | 第66-67页 |
| 4.3.8 增量表达BmSCP1的转基因家蚕制备 | 第67-68页 |
| 4.3.9 转基因家蚕中BmSCP1表达量检测 | 第68-69页 |
| 4.3.10 转基因家蚕的抗性检测 | 第69-71页 |
| 4.3.11 转基因家蚕的主要经济性状调查 | 第71-72页 |
| 4.3.12 BmSCP1在感染初期(肠液中)抑制病毒 | 第72-73页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第73-75页 |
| 5.综合与讨论 | 第75-77页 |
| 5.1 增量表达BmPGRP-S2激活免疫通路提高家蚕对BmCPV抗性 | 第75页 |
| 5.2 增量表达BmSCP1在感染初期抑制病毒提高家蚕抗性 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-87页 |
| 硕士期间发表的论文及参研课题 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
