基于实时荧光定量PCR的忍冬内参基因筛选
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第8-15页 |
| 1.1 忍冬 | 第8-9页 |
| 1.2 RNA-Seq | 第9页 |
| 1.3 实时荧光定量PCR | 第9-10页 |
| 1.4 内参基因 | 第10-14页 |
| 1.4.1 内参基因研究背景 | 第10-12页 |
| 1.4.2 新内参基因的挖掘 | 第12-13页 |
| 1.4.3 评价内参基因稳定性的方法 | 第13-14页 |
| 1.4.4 应用组合内参基因代替单一内参基因 | 第14页 |
| 1.5 本研究的目的意义及内容 | 第14-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-26页 |
| 2.1 材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 供试植物材料 | 第15页 |
| 2.1.2 主要设备及仪器 | 第15页 |
| 2.1.3 主要试验试剂 | 第15页 |
| 2.1.4 试剂配制 | 第15-16页 |
| 2.2 取材及材料处理方法 | 第16-17页 |
| 2.2.1 温度胁迫 | 第16页 |
| 2.2.2 营养器官 | 第16页 |
| 2.2.3 生殖器官 | 第16-17页 |
| 2.3 试验方法 | 第17-26页 |
| 2.3.1 引物设计 | 第17-19页 |
| 2.3.2 RNA提取 | 第19页 |
| 2.3.3 RNA质量检测 | 第19-21页 |
| 2.3.4 cDNA合成及检测 | 第21页 |
| 2.3.5 引物特异性检测 | 第21-23页 |
| 2.3.6 实时荧光定量PCR及引物扩增效率测定 | 第23-24页 |
| 2.3.7 数据分析 | 第24页 |
| 2.3.8 用目的基因检测选择的内参基因 | 第24-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-43页 |
| 3.1 RNA提取结果 | 第26-27页 |
| 3.2 cDNA质量测试 | 第27-28页 |
| 3.3 引物测试结果 | 第28页 |
| 3.4 候选内参基因实时荧光定量PCR数据分析 | 第28-30页 |
| 3.4.1 引物扩增效率及特异性分析 | 第28-29页 |
| 3.4.2 候选内参基因表达分析 | 第29-30页 |
| 3.5 geNorm软件分析结果 | 第30-36页 |
| 3.5.1 温度胁迫后叶片内参基因的筛选 | 第30-31页 |
| 3.5.2 不同生育期营养器官内参基因的筛选 | 第31-34页 |
| 3.5.3 不同生育期花器官内参基因的筛选 | 第34页 |
| 3.5.4 综合分析 | 第34-36页 |
| 3.6 NormFinder软件分析结果 | 第36-42页 |
| 3.6.1 温度胁迫后叶片内参基因的筛选 | 第36-38页 |
| 3.6.2 不同生育期营养器官内参基因的筛选 | 第38-39页 |
| 3.6.3 不同生育期花器官内参基因的筛选 | 第39-40页 |
| 3.6.4 综合分析 | 第40-42页 |
| 3.7 目的基因验证 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-47页 |
| 4.1 影响实时荧光定量PCR的关键因素 | 第43页 |
| 4.2 不同软件的分析结果 | 第43-46页 |
| 4.3 内参基因筛选 | 第46-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| Abstract | 第53-54页 |
| 附录 | 第55-59页 |
| 科研成果 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
