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蝗绿僵菌几丁质合成酶家族的功能研究

中文摘要第3-4页
英文摘要第4-5页
缩略词第8-9页
1 绪论第9-15页
    1.1 引言第9-10页
    1.2 研究背景第10-13页
        1.2.1 昆虫病原真菌的研究进展第10页
        1.2.2 几丁质合成酶的研究进展第10-13页
    1.3 立题依据和研究目的第13页
        1.3.1 立题依据第13页
        1.3.2 研究目的第13页
    1.4 本课题研究内容第13-14页
        1.4.1 生物信息学分析及各基因表达量的测定第13页
        1.4.2 MaChs家族基因的功能研究第13-14页
    1.5 技术路线第14页
    1.6 本研究创新之处第14-15页
2 蝗绿僵菌Ma Chs家族基因的功能研究第15-61页
    2.1 实验材料第15-18页
        2.1.1 供试菌株第15页
        2.1.2 载体质粒第15页
        2.1.3 主要培养基第15-16页
        2.1.4 主要实验溶液的配置第16-17页
        2.1.5 主要试剂及试剂盒第17-18页
        2.1.6 主要设备与器材第18页
    2.2 主要研究方法第18-29页
        2.2.1 大肠杆菌感受态的转化第18-19页
        2.2.2 农杆菌感受态细胞的制备和转化第19页
        2.2.3 农杆菌介导的蝗绿僵菌的转化第19-20页
        2.2.4 真菌基因组的提取第20-21页
        2.2.5 敲除转化子的筛选第21页
        2.2.6 Southern blot验证转化子第21-23页
        2.2.7 真菌RNA的提取及反转录第23-25页
        2.2.8 定量实验第25页
        2.2.9 MaChs生物信息学分析第25-26页
        2.2.10 MaChs敲除载体的构建第26-27页
        2.2.11 逆境敏感性分析第27页
        2.2.12 产孢量和萌发率的测定第27-28页
        2.2.13 毒力测定第28页
        2.2.14 细胞壁结构观察第28-29页
        2.2.15 数据统计与分析第29页
    2.3 结果与分析第29-57页
        2.3.1 MaChs家族基因生物信息学分析第29-30页
        2.3.2 MaChs家族基因在蝗绿僵菌侵染过程中不同时期的表达情况第30-33页
        2.3.3 MaChs家族基因敲除载体构建及敲除菌株筛选第33-39页
        2.3.4 MaChs家族基因对蝗绿僵菌抗逆能力的影响第39-45页
        2.3.5 MaChs家族基因对蝗绿僵菌萌发率和产孢量的影响第45-49页
        2.3.6 MaChs家族基因对蝗绿僵菌毒力的影响第49-55页
        2.3.7 MaChs家族基因对蝗绿僵菌细胞壁结构的影响第55-57页
    2.4 讨论第57-61页
        2.4.1 MaChs与蝗绿僵菌的生长有关第57-58页
        2.4.2 MaChs影响蝗绿僵菌细胞壁的完整性第58页
        2.4.3 MaChs家族不同的基因对毒力影响不同第58-59页
        2.4.4 MaChs家族基因在整个侵染过程中表达量各不相同第59-61页
3 主要结论与后续工作建议第61-63页
    3.1 主要结论第61页
    3.2 后续工作第61-63页
致谢第63-65页
参考文献第65-71页
附录第71-75页
    A. 作者在攻读硕士学位期间发表论文的目录第71-72页
    B. 引物序列第72-75页

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