中文摘要 | 第3-4页 |
英文摘要 | 第4-5页 |
缩略词 | 第8-9页 |
1 绪论 | 第9-15页 |
1.1 引言 | 第9-10页 |
1.2 研究背景 | 第10-13页 |
1.2.1 昆虫病原真菌的研究进展 | 第10页 |
1.2.2 几丁质合成酶的研究进展 | 第10-13页 |
1.3 立题依据和研究目的 | 第13页 |
1.3.1 立题依据 | 第13页 |
1.3.2 研究目的 | 第13页 |
1.4 本课题研究内容 | 第13-14页 |
1.4.1 生物信息学分析及各基因表达量的测定 | 第13页 |
1.4.2 MaChs家族基因的功能研究 | 第13-14页 |
1.5 技术路线 | 第14页 |
1.6 本研究创新之处 | 第14-15页 |
2 蝗绿僵菌Ma Chs家族基因的功能研究 | 第15-61页 |
2.1 实验材料 | 第15-18页 |
2.1.1 供试菌株 | 第15页 |
2.1.2 载体质粒 | 第15页 |
2.1.3 主要培养基 | 第15-16页 |
2.1.4 主要实验溶液的配置 | 第16-17页 |
2.1.5 主要试剂及试剂盒 | 第17-18页 |
2.1.6 主要设备与器材 | 第18页 |
2.2 主要研究方法 | 第18-29页 |
2.2.1 大肠杆菌感受态的转化 | 第18-19页 |
2.2.2 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第19页 |
2.2.3 农杆菌介导的蝗绿僵菌的转化 | 第19-20页 |
2.2.4 真菌基因组的提取 | 第20-21页 |
2.2.5 敲除转化子的筛选 | 第21页 |
2.2.6 Southern blot验证转化子 | 第21-23页 |
2.2.7 真菌RNA的提取及反转录 | 第23-25页 |
2.2.8 定量实验 | 第25页 |
2.2.9 MaChs生物信息学分析 | 第25-26页 |
2.2.10 MaChs敲除载体的构建 | 第26-27页 |
2.2.11 逆境敏感性分析 | 第27页 |
2.2.12 产孢量和萌发率的测定 | 第27-28页 |
2.2.13 毒力测定 | 第28页 |
2.2.14 细胞壁结构观察 | 第28-29页 |
2.2.15 数据统计与分析 | 第29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-57页 |
2.3.1 MaChs家族基因生物信息学分析 | 第29-30页 |
2.3.2 MaChs家族基因在蝗绿僵菌侵染过程中不同时期的表达情况 | 第30-33页 |
2.3.3 MaChs家族基因敲除载体构建及敲除菌株筛选 | 第33-39页 |
2.3.4 MaChs家族基因对蝗绿僵菌抗逆能力的影响 | 第39-45页 |
2.3.5 MaChs家族基因对蝗绿僵菌萌发率和产孢量的影响 | 第45-49页 |
2.3.6 MaChs家族基因对蝗绿僵菌毒力的影响 | 第49-55页 |
2.3.7 MaChs家族基因对蝗绿僵菌细胞壁结构的影响 | 第55-57页 |
2.4 讨论 | 第57-61页 |
2.4.1 MaChs与蝗绿僵菌的生长有关 | 第57-58页 |
2.4.2 MaChs影响蝗绿僵菌细胞壁的完整性 | 第58页 |
2.4.3 MaChs家族不同的基因对毒力影响不同 | 第58-59页 |
2.4.4 MaChs家族基因在整个侵染过程中表达量各不相同 | 第59-61页 |
3 主要结论与后续工作建议 | 第61-63页 |
3.1 主要结论 | 第61页 |
3.2 后续工作 | 第61-63页 |
致谢 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
附录 | 第71-75页 |
A. 作者在攻读硕士学位期间发表论文的目录 | 第71-72页 |
B. 引物序列 | 第72-75页 |