| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述与立题依据 | 第17-27页 |
| 1.1 铝的神经系统毒性 | 第17-18页 |
| 1.2 铝的神经毒性机理 | 第18-20页 |
| 1.2.1 氧化应激损伤 | 第18-19页 |
| 1.2.2 神经纤维缠结 | 第19-20页 |
| 1.3 绿原酸的抗氧化活性 | 第20页 |
| 1.4 绿原酸的抗氧化研究进展 | 第20-25页 |
| 1.4.1 化学实验 | 第21-22页 |
| 1.4.2 细胞实验 | 第22-23页 |
| 1.4.3 动物实验 | 第23-25页 |
| 1.5 本课题的研究目的和意义 | 第25页 |
| 1.6 本课题的研究内容 | 第25-27页 |
| 1.6.1 绿原酸对铝暴露致小鼠认知损伤的保护作用 | 第25页 |
| 1.6.2 绿原酸对铝暴露致原代海马神经元细胞氧化应激损伤的保护作用 | 第25页 |
| 1.6.3 绿原酸对铝暴露致小鼠海马体氧化应激损伤的保护作用 | 第25-26页 |
| 1.6.4 铝暴露导致脑组织神经纤维缠结形成的分子机理 | 第26页 |
| 1.6.5 绿原酸调控14-3-3ζ和tau蛋白互作及预防神经纤维缠结的机理研究 | 第26-27页 |
| 第二章 绿原酸对铝暴露致小鼠认知损伤的保护作用 | 第27-42页 |
| 2.1 前言 | 第27-28页 |
| 2.2 实验试剂和仪器 | 第28页 |
| 2.2.1 试剂 | 第28页 |
| 2.2.2 仪器 | 第28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-31页 |
| 2.3.1 代谢测试 | 第29页 |
| 2.3.2 行为学实验 | 第29-30页 |
| 2.3.3 实验动物取材 | 第30页 |
| 2.3.4 绿原酸含量的测定 | 第30页 |
| 2.3.5 铝元素含量的测定 | 第30页 |
| 2.3.6 海马体中Al~(3+)的定位 | 第30-31页 |
| 2.3.7 海马体组织病理学观察 | 第31页 |
| 2.3.8 统计分析 | 第31页 |
| 2.4 结果与分析 | 第31-39页 |
| 2.4.1 绿原酸含量 | 第31-32页 |
| 2.4.2 绿原酸对铝暴露小鼠行为学的影响 | 第32-34页 |
| 2.4.3 绿原酸对铝暴露的小鼠铝排泄的影响 | 第34-36页 |
| 2.4.4 绿原酸对铝暴露小鼠铝蓄积的影响 | 第36-37页 |
| 2.4.5 海马体组织病理学观察 | 第37-39页 |
| 2.5 讨论 | 第39-41页 |
| 2.5.1 铝暴露导致小鼠认知障碍 | 第39-40页 |
| 2.5.2 绿原酸对铝诱导的小鼠认知障碍的具有预防作用 | 第40页 |
| 2.5.3 绿原酸促进铝暴露排泄、减少铝元素吸收 | 第40页 |
| 2.5.4 绿原酸能够减少海马体的细胞损伤 | 第40-41页 |
| 2.6 本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章 绿原酸对铝暴露致原代海马神经元细胞氧化应激损伤的保护作用 | 第42-64页 |
| 3.1 前言 | 第42-43页 |
| 3.2 实验材料、试剂和仪器 | 第43-44页 |
| 3.2.1 材料 | 第43页 |
| 3.2.2 试剂 | 第43页 |
| 3.2.3 仪器 | 第43-44页 |
| 3.3 实验方法 | 第44-48页 |
| 3.3.1 原代海马神经元细胞培养 | 第44页 |
| 3.3.2 细胞活力测定 | 第44-45页 |
| 3.3.3 细胞中绿原酸含量测定 | 第45页 |
| 3.3.4 细胞中铝元素的测定 | 第45页 |
| 3.3.5 细胞内活性氧的检测 | 第45-46页 |
| 3.3.6 细胞内线粒体膜电位的检测 | 第46页 |
| 3.3.7 细胞中生化指标的测定 | 第46-48页 |
| 3.3.8 免疫印迹分析 | 第48页 |
| 3.3.9 统计分析 | 第48页 |
| 3.4 结果与分析 | 第48-60页 |
| 3.4.1 绿原酸对铝诱导的原代海马神经元细胞毒性的影响 | 第48-49页 |
| 3.4.2 绿原酸对原代海马神经元细胞中铝蓄积的影响 | 第49-51页 |
| 3.4.3 绿原酸对原代海马神经元细胞中活性氧水平的影响 | 第51-53页 |
| 3.4.4 绿原酸对原代海马神经元细胞氧化应激水平的影响 | 第53-56页 |
| 3.4.5 绿原酸对原代海马神经元细胞线粒体膜电位的影响 | 第56-57页 |
| 3.4.6 绿原酸对原代海马神经元细胞能量代谢水平的影响 | 第57-59页 |
| 3.4.7 绿原酸对Nrf2-keap1氧化应激信号通路的影响 | 第59-60页 |
| 3.5 讨论 | 第60-63页 |
| 3.5.1 铝元素通过氧化应激损伤诱导细胞毒性和神经毒性 | 第60-61页 |
| 3.5.2 绿原酸能够预防铝诱导的氧化应激损伤 | 第61页 |
| 3.5.3 绿原酸通过螯合作用抑制铝诱导的细胞毒性 | 第61-63页 |
| 3.5.4 绿原酸激活Nrf2-keap1信号途径、抑制细胞氧化损伤 | 第63页 |
| 3.6 本章小结 | 第63-64页 |
| 第四章 绿原酸对铝暴露致小鼠海马体氧化应激损伤的保护作用 | 第64-79页 |
| 4.1 前言 | 第64-65页 |
| 4.2 实验试剂和仪器 | 第65页 |
| 4.2.1 试剂 | 第65页 |
| 4.2.2 仪器 | 第65页 |
| 4.3 实验方法 | 第65-67页 |
| 4.3.1 实验动物取材 | 第66页 |
| 4.3.2 海马体中氧化还原水平的测定 | 第66页 |
| 4.3.3 海马体中线粒体膜电位的检测 | 第66-67页 |
| 4.3.4 海马体中生化指标的测定 | 第67页 |
| 4.3.5 免疫印迹分析 | 第67页 |
| 4.3.6 统计分析 | 第67页 |
| 4.4 结果与分析 | 第67-75页 |
| 4.4.1 绿原酸对海马体内Nrf2-keap1氧化应激信号通路的影响 | 第67-69页 |
| 4.4.2 绿原酸对铝暴露小鼠海马体氧化应激水平的影响 | 第69-70页 |
| 4.4.3 绿原酸对铝暴露小鼠海马体氧化应激水平的影响 | 第70-72页 |
| 4.4.4 绿原酸对铝暴露小鼠海马体能量代谢水平的影响 | 第72-73页 |
| 4.4.5 绿原酸对铝暴露小鼠海马体能量代谢水平的影响 | 第73-75页 |
| 4.5 讨论 | 第75-78页 |
| 4.5.1 绿原酸能够预防铝暴露导致的海马体氧化应激损伤 | 第75页 |
| 4.5.2 绿原酸能够预防铝暴露导致的海马体能量代谢异常 | 第75页 |
| 4.5.3 绿原酸具有抗氧化活性,能够减少自由基生成 | 第75-76页 |
| 4.5.4 绿原酸通过激活Nrf2-keap1信号通路抑制氧化应激损伤 | 第76-78页 |
| 4.6 本章小结 | 第78-79页 |
| 第五章 铝暴露导致脑组织神经纤维缠结形成的分子机理 | 第79-98页 |
| 5.1 引言 | 第79-80页 |
| 5.2 实验试剂和仪器 | 第80-81页 |
| 5.2.1 试剂 | 第80页 |
| 5.2.2 仪器 | 第80-81页 |
| 5.3 实验方法 | 第81-86页 |
| 5.3.1 体外荧光检测Al~(3+)亲和蛋白 | 第81-82页 |
| 5.3.2 动物实验 | 第82-83页 |
| 5.3.3 原代海马神经元细胞培养 | 第83页 |
| 5.3.4 实验动物取材 | 第83页 |
| 5.3.5 铝元素含量的测定 | 第83页 |
| 5.3.6 细胞中Al~(3+)的定位 | 第83页 |
| 5.3.7 免疫组织化学 | 第83-84页 |
| 5.3.8 间接免疫荧光 | 第84页 |
| 5.3.9 胶体金免疫电子显微镜 | 第84-85页 |
| 5.3.10 免疫印迹 | 第85页 |
| 5.3.11 免疫共沉淀 | 第85页 |
| 5.3.12 统计分析 | 第85-86页 |
| 5.4 结果与分析 | 第86-94页 |
| 5.4.1 海马组织中Al~(3+)亲和蛋白的鉴定 | 第86-87页 |
| 5.4.2 大鼠海马组织和原代海马神经元细胞中铝元素的水平 | 第87-88页 |
| 5.4.3 大鼠海马组织和原代海马神经细胞中Al~(3+)和14-3-3ζ蛋白的共定位 | 第88-90页 |
| 5.4.4 大鼠海马组织和原代海马神经细胞中14-3-3ζ和tau蛋白的水平 | 第90-92页 |
| 5.4.5 大鼠海马组织和原代海马神经元细胞中tau和14-3-3ζ蛋白的相互作用水平 | 第92-94页 |
| 5.5 讨论 | 第94-97页 |
| 5.5.1 Al~(3+)在大鼠海马体DG/CA3区域的积累导致认知障碍 | 第94-95页 |
| 5.5.2 新型荧光法鉴定海马体中的Al~(3+)亲和蛋白 | 第95页 |
| 5.5.3 Al~(3+)诱导海马体中磷酸化tau的聚集 | 第95-97页 |
| 5.5.4 伴侣蛋白14-3-3ζ防止磷酸化tau的聚集 | 第97页 |
| 5.6 本章小结 | 第97-98页 |
| 第六章 绿原酸调控14-3-3ζ和tau蛋白互作及预防神经纤维缠结的机理研究 | 第98-113页 |
| 6.1 引言 | 第98-99页 |
| 6.2 实验试剂和仪器 | 第99-100页 |
| 6.2.1 试剂 | 第99页 |
| 6.2.2 仪器 | 第99-100页 |
| 6.3 实验方法 | 第100-101页 |
| 6.3.1 原代海马神经元培养 | 第100页 |
| 6.3.2 动物实验 | 第100页 |
| 6.3.3 实验取材 | 第100页 |
| 6.3.4 免疫印迹 | 第100-101页 |
| 6.3.5 免疫组织化学 | 第101页 |
| 6.3.6 间接免疫荧光 | 第101页 |
| 6.3.7 免疫共沉淀 | 第101页 |
| 6.3.8 胶体金免疫电镜 | 第101页 |
| 6.3.9 数据与分析 | 第101页 |
| 6.4 结果与分析 | 第101-110页 |
| 6.4.1 绿原酸对海马神经元细胞中tau蛋白表达量的影响 | 第101-102页 |
| 6.4.2 绿原酸对海马神经元细胞中tau蛋白位置的影响 | 第102-104页 |
| 6.4.3 绿原酸对海马神经元细胞中14-3-3ζ蛋白表达量的影响 | 第104-106页 |
| 6.4.4 绿原酸对海马神经元细胞中14-3-3ζ和Al~(3+)共定位的影响 | 第106页 |
| 6.4.5 绿原酸对海马神经元细胞中14-3-3ζ和tau蛋白共定位的影响 | 第106-109页 |
| 6.4.6 绿原酸对海马神经元细胞中14-3-3ζ和tau蛋白的互作水平的影响 | 第109-110页 |
| 6.5 讨论 | 第110-112页 |
| 6.5.1 绿原酸的生物利用率 | 第110-111页 |
| 6.5.2 绿原酸能够与14-3-3ζ蛋白竞争性结合神经元细胞内的Al~(3+) | 第111页 |
| 6.5.3 神经元细胞内的14-3-3ζ与tau蛋白相互结合、防止tau蛋白磷酸化蓄积 | 第111页 |
| 6.5.4 绿原酸能够减少神经元细胞内磷酸化tau蛋白的蓄积 | 第111-112页 |
| 6.6 本章小结 | 第112-113页 |
| 第七章 结论、创新与展望 | 第113-115页 |
| 7.1 结论 | 第113页 |
| 7.2 创新点 | 第113-114页 |
| 7.3 展望 | 第114-115页 |
| 参考文献 | 第115-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
| 个人简介 | 第131页 |
