| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第13-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-21页 |
| 1 miRNA在乳腺发育及泌乳中的研究进展 | 第15-19页 |
| 1.1 miRNA研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2 miRNA在乳腺发育及泌乳中的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3 miR-148a的研究进展 | 第18-19页 |
| 2 DNA甲基化及其在乳腺中的研究进展 | 第19-20页 |
| 2.1 DNA甲基化的作用机制 | 第19页 |
| 2.2 甲基转移酶DNMT1的研究进展 | 第19-20页 |
| 3 哺乳动物乳腺上皮细胞体外培养的研究进展 | 第20-21页 |
| 3.1 乳腺的发生与泌乳 | 第20页 |
| 3.2 乳腺上皮细胞的培养方法概述 | 第20-21页 |
| 研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二部分 试验部分 | 第22-57页 |
| 第一章 水牛乳腺上皮细胞的原代培养及鉴定 | 第23-33页 |
| 前言 | 第23页 |
| 1 材料与方法 | 第23-27页 |
| 1.1 试验材料 | 第23页 |
| 1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第23页 |
| 1.4 主要溶剂配置 | 第23-24页 |
| 1.5 试验方法 | 第24-27页 |
| 2 实验结果 | 第27-31页 |
| 2.1 水牛乳腺上皮细胞的原代培养与纯化 | 第27-28页 |
| 2.2 免疫荧光法鉴定角蛋白18 (CK18)的表达 | 第28页 |
| 2.3 油红O染色检测脂滴 | 第28-29页 |
| 2.4 水牛乳腺上皮细胞核型分析 | 第29页 |
| 2.5 水牛乳腺上皮细胞的形态学观察 | 第29-30页 |
| 2.6 第3代水牛乳腺上皮细胞的生长曲线的绘制 | 第30-31页 |
| 3 分析与讨论 | 第31-32页 |
| 4 小结 | 第32-33页 |
| 第二章 调控miR-148a基因表达对水牛乳腺上皮细胞增殖及泌乳相关重要基因表达的影响 | 第33-50页 |
| 前言 | 第33页 |
| 1 材料与方法 | 第33-38页 |
| 1.1 主要试剂 | 第33页 |
| 1.2 主要仪器 | 第33页 |
| 1.3 试验方法 | 第33-38页 |
| 1.4 数据统计与分析 | 第38页 |
| 2 实验结果 | 第38-47页 |
| 2.1 miR-148a及DNMT1在水牛泌乳期与非泌乳期乳腺组织的表达分析 | 第38页 |
| 2.2 miR-148a模拟物和抑制剂处理对水牛乳腺上皮细胞的形态影响 | 第38-39页 |
| 2.3 miR-148a模拟物和抑制剂的效果检测 | 第39-41页 |
| 2.4 正负调控miR-148a基因表达对水牛乳腺上皮细胞DNMT1表达的影响 | 第41页 |
| 2.5 正负调控miR-148a基因表达对水牛乳腺细胞增殖及细胞周期的影响 | 第41-44页 |
| 2.6 qRT-PCR引物的验证 | 第44-46页 |
| 2.7 正负调控miR-148a基因表达对水牛乳腺上皮细胞泌乳相关重要基因表达的影响 | 第46-47页 |
| 3 分析与讨论 | 第47-49页 |
| 4 小结 | 第49-50页 |
| 第三章 5-Aza-dc处理对水牛乳腺上皮细胞增殖及泌乳相关重要基因表达的影响 | 第50-57页 |
| 前言 | 第50页 |
| 1 材料与方法 | 第50-51页 |
| 1.1 主要试剂 | 第50页 |
| 1.2 主要仪器 | 第50页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第50页 |
| 1.4 实验方法 | 第50-51页 |
| 1.5 统计方法 | 第51页 |
| 2 结果 | 第51-55页 |
| 2.1 5-Aza-dc处理对水牛乳腺上皮细胞的形态影响 | 第51-52页 |
| 2.2 5-Aza-dc处理对水牛乳腺上皮细胞中DNMT1及miR-148a表达的影响 | 第52-53页 |
| 2.3 5-Aza-dc对水牛乳腺细胞增殖及细胞周期的影响 | 第53-54页 |
| 2.4 5-Aza-dc处理对水牛泌乳相关基因表达的影响 | 第54-55页 |
| 3 分析与讨论 | 第55-56页 |
| 4 小结 | 第56-57页 |
| 全文结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 硕士期间发表的文章 | 第65页 |
