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木薯叶多酚氧化酶的分离纯化及其应用

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 前言第12-22页
    1.1 木薯特性及其研究概况第12-13页
    1.2 多酚氧化酶国内外研究进展第13-16页
        1.2.1 多酚氧化酶的发现及其分布第13页
        1.2.2 多酚氧化酶作用机理第13-14页
        1.2.3 多酚氧化酶的功能第14页
        1.2.4 多酚氧化酶的工业应用第14-16页
    1.3 多酚氧化酶的纯化方法第16-18页
        1.3.1 多酚氧化酶的初级分离第16-17页
        1.3.2 粗酶液的纯化方案第17-18页
    1.4 多酚氧化酶的固定化方法第18-20页
        1.4.1 酶的固定化方法第18页
        1.4.2 酶的固定化载体第18-20页
    1.5 介孔二氧化硅第20页
    1.6 研究课题简介第20-22页
        1.6.1 课题来源第20页
        1.6.2 主要研究内容第20-21页
        1.6.3 本文研究技术路线第21-22页
第二章 木薯叶多酚氧化酶提取方法研究第22-37页
    2.1 材料与仪器第22页
        2.1.1 材料与试剂第22页
        2.1.2 仪器与设备第22页
    2.2 实验方法第22-26页
        2.2.1 木薯叶多酚氧化酶酶活力的测定研究第22-23页
        2.2.2 蛋白质含量的测定第23-24页
        2.2.3 木薯叶多酚氧化酶的提取方法第24页
        2.2.4 木薯叶多酚氧化酶提取pH的确定第24页
        2.2.5 木薯叶多酚氧化酶提取料液比第24-25页
        2.2.6 木薯叶多酚氧化酶提取时间第25页
        2.2.7 木薯叶提取条件正交设计第25页
        2.2.8 木薯叶多酚氧化酶的酶辅助提取第25页
        2.2.9 木薯叶多酚氧化酶PVPP辅助提取第25页
        2.2.10 木薯叶多酚氧化酶Tween 80辅助提取第25-26页
        2.2.11 木薯叶多酚氧化酶Triton X-100辅助提取第26页
    2.3 结果与讨论第26-35页
        2.3.1 木薯叶多酚氧化酶酶活测定方法第26-29页
        2.3.2 木薯叶多酚氧化酶各种提取方法比较第29-30页
        2.3.3 pH对木薯叶多酚氧化酶提取的影响第30页
        2.3.4 时间对木薯叶多酚氧化酶的提取的影响第30-31页
        2.3.5 料液比对木薯叶多酚氧化酶提取的影响第31-32页
        2.3.6 木薯叶多酚氧化酶提取正交设计第32-33页
        2.3.7 纤维素酶对木薯叶PPO提取的影响第33页
        2.3.8 PVPP对木薯叶多酚氧化酶提取的影响第33-34页
        2.3.9 吐温对木薯叶多酚氧化酶提取的影响第34-35页
        2.3.10 Triton X-100对木薯叶多酚氧化酶提取的影响第35页
    2.4 本章小结第35-37页
第三章 木薯叶多酚氧化酶纯化方法研究第37-47页
    3.1 材料与仪器第37页
        3.1.1 材料与试剂第37页
        3.1.2 仪器与设备第37页
    3.2 实验方法第37-39页
        3.2.1 硫酸铵分级沉淀第37页
        3.2.2 透析除盐及浓缩第37-38页
        3.2.3 木薯叶多酚氧化酶等电点测定第38页
        3.2.4 分子排阻层析纯化多酚氧化酶第38页
        3.2.5 DEAE-Sephadex A50离子交换层析纯化多酚氧化酶第38-39页
        3.2.6 Nature PAGE割胶纯化及SDS PAGE分子量测定第39页
    3.3 结果与讨论第39-46页
        3.3.1 硫酸铵分级沉淀结果第40页
        3.3.2 木薯叶多酚氧化酶的等电点测定第40-41页
        3.3.3 分子排阻层析对多酚氧化酶的处理效果第41-43页
        3.3.4 DEAE-Sephadex A50离子交换层析纯化木薯叶多酚氧化酶第43-45页
        3.3.5 SDS PAGE测定多酚氧化酶分子量第45-46页
    3.4 本章小结第46-47页
第四章 介孔材料对多酚氧化酶的固定化研究第47-56页
    4.1 材料与仪器第47页
        4.1.1 材料与试剂第47页
        4.1.2 仪器与设备第47页
    4.2 实验方法第47-49页
        4.2.1 固定化酶酶活测定第47页
        4.2.2 介孔材料的制备第47-48页
        4.2.3 固定化方法第48页
        4.2.4 最适酶固定化量确定第48页
        4.2.5 固定化时间的确定第48页
        4.2.6 缓冲液pH对固定化的影响第48-49页
        4.2.7 戊二醛浓度对固定化的影响第49页
        4.2.8 固定化酶的热稳定性测定第49页
        4.2.9 固定化酶的米氏常数Km第49页
        4.2.10 固定化酶的操作稳定性第49页
    4.3 结果与讨论第49-55页
        4.3.1 不同材料固定化多酚氧化酶比较第49-50页
        4.3.2 SBA-16最适固定化酶量第50-51页
        4.3.3 时间对多酚氧化酶固定化的影响第51-52页
        4.3.4 缓冲液pH对多酚氧化酶固定化的影响第52-53页
        4.3.5 戊二醛浓度对多酚氧化酶固定化的影响第53页
        4.3.6 固定化酶的热稳定性分析第53-54页
        4.3.7 固定化多酚氧化酶的Km值第54-55页
        4.3.8 固定化多酚氧化酶的操作稳定性第55页
    4.4 本章小结第55-56页
第五章 固定化多酚氧化酶的应用第56-62页
    5.1 材料与仪器第56页
        5.1.1 材料与试剂第56页
        5.1.2 仪器与设备第56页
    5.2 实验方法第56-58页
        5.2.1 邻苯二酚标准曲线的绘制第56-57页
        5.2.2 固定化多酚氧化酶降解邻苯二酚第57页
        5.2.3 SBA-16固定化多酚氧化酶降解刚果红第57页
        5.2.4 固定化多酚氧化酶降解苯酚第57-58页
        5.2.5 固定化多酚氧化酶降解2,4-二氯苯酚第58页
    5.3 结果与讨论第58-61页
        5.3.1 邻苯二酚标准曲线第58页
        5.3.2 固定化多酚氧化酶对邻苯二酚的降解第58-59页
        5.3.3 固定化多酚氧化酶降解刚果红第59-60页
        5.3.4 固定化多酚氧化酶降解苯酚第60-61页
        5.3.5 固定化多酚氧化酶降解2,4-二氯苯酚第61页
    5.4 本章小结第61-62页
第六章 结论与展望第62-64页
    6.1 结论第62-63页
    6.2 本文创新点第63页
    6.3 展望第63-64页
参考文献第64-70页
附录(APPENDIX)Ⅰ第70-72页
附录(APPENDIX)Ⅱ第72-73页
致谢第73-74页
攻读学位期间发表的论文第74页

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