| CONTENTS | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-24页 |
| 1.1 GAD概述 | 第11-14页 |
| 1.1.1 GAD的分布与性质 | 第11-12页 |
| 1.1.2 GAD的结构与功能 | 第12-13页 |
| 1.1.3 GAD分离提取的研究概况 | 第13-14页 |
| 1.2 双水相萃取技术概述 | 第14-19页 |
| 1.2.1 双水相萃取的原理 | 第14-15页 |
| 1.2.2 双水相萃取技术的特点 | 第15-16页 |
| 1.2.3 双水相萃取技术的影响因素 | 第16-17页 |
| 1.2.4 双水相萃取技术的研究进展及应用 | 第17-19页 |
| 1.2.5 双水相萃取技术的局限性及展望 | 第19页 |
| 1.3 超滤离心的原理与特点 | 第19-20页 |
| 1.4 影响超滤离心的因素 | 第20页 |
| 1.5 超滤离心的应用 | 第20-22页 |
| 1.6 研究的工艺流程 | 第22页 |
| 1.7 研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 1.8 主要研究内容 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 菌种与培养基 | 第24页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要设备 | 第25页 |
| 2.2 大肠杆菌GAD粗酶液的制备 | 第25页 |
| 2.2.1 大肠杆菌细胞的收集 | 第25页 |
| 2.2.2 大肠杆菌GAD粗酶液的提取 | 第25页 |
| 2.4 PEG-柠檬酸钠双水相萃取GAD体系的构建 | 第25-26页 |
| 2.4.1 PEG-柠檬酸钠双水相相图的建立 | 第26页 |
| 2.4.2 PEG-柠檬酸钠双水相萃取GAD体系的建立 | 第26页 |
| 2.5 双水相萃取GAD条件的确定 | 第26-27页 |
| 2.5.1 PEG分子量对GAD萃取的影响 | 第26页 |
| 2.5.2 PEG浓度对GAD萃取的影响 | 第26页 |
| 2.5.3 柠檬酸钠浓度对GAD萃取的影响 | 第26-27页 |
| 2.5.4 pH对GAD萃取的影响 | 第27页 |
| 2.5.5 NaCl添加量对GAD萃取的影响 | 第27页 |
| 2.6 超滤离心分离GAD与PEG | 第27页 |
| 2.7 GAD与PEG的收集 | 第27-28页 |
| 2.8 检测方法 | 第28-30页 |
| 2.8.1 GAD的活力测定 | 第28页 |
| 2.8.2 蛋白质含量的测定 | 第28-29页 |
| 2.8.3 PEG含量测定 | 第29-30页 |
| 2.9 计算方法 | 第30-31页 |
| 2.10 统计分析 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-44页 |
| 3.1 PEG-柠檬酸钠双水相体系相图 | 第32-33页 |
| 3.2 PEG-柠檬酸钠双水相萃取GAD条件的确定 | 第33-35页 |
| 3.2.1 PEG分子量对GAD萃取的影响 | 第33页 |
| 3.2.2 成相物质的浓度对GAD萃取的影响 | 第33-34页 |
| 3.2.3 pH对GAD萃取的影响 | 第34-35页 |
| 3.2.4 NaCl添加量对GAD萃取的影响 | 第35页 |
| 3.3 PEG-柠檬酸钠双水相萃取GAD正交试验 | 第35-37页 |
| 3.4 超滤离心分离GAD与PEG 工艺参数的优化 | 第37-42页 |
| 3.4.1 单因素试验 | 第37-39页 |
| 3.4.2 响应面法优化超滤离心的工艺参数 | 第39-42页 |
| 3.5 GAD与PEG的收集 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-47页 |
| 4.1 PEG分子量对GAD萃取的影响 | 第44页 |
| 4.2 成相物质浓度对GAD萃取的影响 | 第44页 |
| 4.3 pH对GAD萃取的影响 | 第44-45页 |
| 4.4 NaCl添加量对GAD萃取的影响 | 第45页 |
| 4.5 超滤离心分离回收GAD与PEG | 第45-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58页 |
