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甲基营养型芽孢杆菌YH158木聚糖酶的发酵制备及其相关基因的克隆

摘要第4-5页
abstract第5-6页
第一章 文献综述第11-30页
    前言第11-12页
    1.1 木聚糖第12-15页
        1.1.1 木聚糖的来源第12-13页
        1.1.2 木聚糖的结构与分类第13-14页
        1.1.3 木聚糖的水解第14-15页
    1.2 木聚糖酶第15-25页
        1.2.1 木聚糖酶的来源第15-16页
        1.2.2 木聚糖酶的分类第16-17页
        1.2.3 木聚糖酶的分子结构第17-19页
        1.2.4 木聚糖酶的催化机制第19-21页
        1.2.5 木聚糖酶的酶学性质第21-22页
        1.2.6 木聚糖酶的基因工程第22-23页
        1.2.7 木聚糖酶的应用第23-25页
    1.3 低聚糖第25-26页
        1.3.1 低聚木糖在功能性食品中的应用第25-26页
        1.3.2 低聚木糖在动物饲料及农业中的应用第26页
    1.4 研究背景及目的第26-30页
        1.4.1 国内外研究现状第26-28页
        1.4.2 研究目的与意义第28-30页
第二章 产碱性木聚糖酶菌株的筛选第30-44页
    2.1 试验材料第30-31页
        2.1.1 菌种来源第30页
        2.1.2 试剂材料第30-31页
        2.1.3 仪器设备第31页
    2.2 试验方法第31-36页
        2.2.1 玉米芯木聚糖的制备第31-32页
        2.2.2 培养基配方第32页
        2.2.3 木聚糖酶产生菌的初筛第32-33页
        2.2.4 木聚糖酶产生菌的复筛第33页
        2.2.5 菌种鉴定第33页
        2.2.6 木聚糖酶酶活力测定方法第33-35页
        2.2.7 木聚糖酶酶解产物分析第35-36页
    2.3 结果与分析第36-43页
        2.3.1 木糖标准曲线第36页
        2.3.2 木聚糖酶产生菌的初筛结果第36-37页
        2.3.3 木聚糖酶产生菌的复筛结果第37-38页
        2.3.4 菌株鉴定第38-39页
        2.3.5 木聚糖酶酶解产物分析第39-40页
        2.3.6 木聚糖酶粗酶液的酶学性质研究第40-43页
    2.4 结论与讨论第43-44页
第三章 甲基营养型芽孢杆菌YH-158产木聚糖酶的发酵条件优化第44-52页
    3.1 试验材料第44页
        3.1.1 菌种第44页
        3.1.2 试剂与器材第44页
    3.2 试验方法第44-45页
        3.2.1 培养基设计第44-45页
        3.2.2 木聚糖酶活力的测定第45页
        3.2.3 单因素试验第45页
        3.2.4 正交试验第45页
    3.3 结果与分析第45-51页
        3.3.1 发酵培养基起始pH的确定第45-46页
        3.3.2 最佳碳源的确定第46-47页
        3.3.3 最佳氮源的确定第47-48页
        3.3.4 金属离子对YH158产木聚糖酶的影响第48-49页
        3.3.5 发酵周期对YH158产木聚糖酶的影响第49-50页
        3.3.6 发酵温度对YH158产木聚糖酶的影响第50页
        3.3.7 正交试验分析第50-51页
    3.4 结论第51-52页
第四章 芽孢杆菌YH-158的相关木聚糖酶基因的克隆及表达第52-83页
    4.1 试验材料第52-55页
        4.1.1 菌株第52页
        4.1.2 质粒载体第52页
        4.1.3 主要试剂第52-54页
        4.1.4 培养基的配制第54-55页
        4.1.5 主要仪器第55页
    4.2 试验方法第55-62页
        4.2.1 质粒的提取第55-56页
        4.2.2 琼脂糖凝胶电泳第56页
        4.2.3 目的片段的扩增第56-57页
        4.2.4 PCR产物的回收与纯化第57页
        4.2.5 目的片段的克隆第57-58页
        4.2.6 阳性克隆的鉴定第58-59页
        4.2.7 YH158相关木聚糖酶基因的测序及进化分析第59页
        4.2.8 大肠杆菌BL21感受态的制备第59-60页
        4.2.9 大肠杆菌BL21细胞的转化第60页
        4.2.10 目的基因在大肠杆菌BL21中的诱导表达第60页
        4.2.11 木聚糖酶分子量的测定第60-62页
    4.3 结果与分析第62-81页
        4.3.1 目的片段的扩增第62-63页
        4.3.2 阳性克隆子的鉴定第63-64页
        4.3.3 木聚糖酶相关基因测序结果与比对分析第64-78页
        4.3.4 目的基因在大肠杆菌BL21中的诱导表达第78-79页
        4.3.5 木聚糖酶水解产物分析第79-80页
        4.3.6 木聚糖酶分子量的测定第80-81页
    4.4 结论与讨论第81-83页
第五章 结论与展望第83-85页
    5.1 试验结论第83-84页
    5.2 论文创新点与展望第84-85页
参考文献第85-91页
致谢第91-92页
作者简介第92页

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