摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第11-30页 |
前言 | 第11-12页 |
1.1 木聚糖 | 第12-15页 |
1.1.1 木聚糖的来源 | 第12-13页 |
1.1.2 木聚糖的结构与分类 | 第13-14页 |
1.1.3 木聚糖的水解 | 第14-15页 |
1.2 木聚糖酶 | 第15-25页 |
1.2.1 木聚糖酶的来源 | 第15-16页 |
1.2.2 木聚糖酶的分类 | 第16-17页 |
1.2.3 木聚糖酶的分子结构 | 第17-19页 |
1.2.4 木聚糖酶的催化机制 | 第19-21页 |
1.2.5 木聚糖酶的酶学性质 | 第21-22页 |
1.2.6 木聚糖酶的基因工程 | 第22-23页 |
1.2.7 木聚糖酶的应用 | 第23-25页 |
1.3 低聚糖 | 第25-26页 |
1.3.1 低聚木糖在功能性食品中的应用 | 第25-26页 |
1.3.2 低聚木糖在动物饲料及农业中的应用 | 第26页 |
1.4 研究背景及目的 | 第26-30页 |
1.4.1 国内外研究现状 | 第26-28页 |
1.4.2 研究目的与意义 | 第28-30页 |
第二章 产碱性木聚糖酶菌株的筛选 | 第30-44页 |
2.1 试验材料 | 第30-31页 |
2.1.1 菌种来源 | 第30页 |
2.1.2 试剂材料 | 第30-31页 |
2.1.3 仪器设备 | 第31页 |
2.2 试验方法 | 第31-36页 |
2.2.1 玉米芯木聚糖的制备 | 第31-32页 |
2.2.2 培养基配方 | 第32页 |
2.2.3 木聚糖酶产生菌的初筛 | 第32-33页 |
2.2.4 木聚糖酶产生菌的复筛 | 第33页 |
2.2.5 菌种鉴定 | 第33页 |
2.2.6 木聚糖酶酶活力测定方法 | 第33-35页 |
2.2.7 木聚糖酶酶解产物分析 | 第35-36页 |
2.3 结果与分析 | 第36-43页 |
2.3.1 木糖标准曲线 | 第36页 |
2.3.2 木聚糖酶产生菌的初筛结果 | 第36-37页 |
2.3.3 木聚糖酶产生菌的复筛结果 | 第37-38页 |
2.3.4 菌株鉴定 | 第38-39页 |
2.3.5 木聚糖酶酶解产物分析 | 第39-40页 |
2.3.6 木聚糖酶粗酶液的酶学性质研究 | 第40-43页 |
2.4 结论与讨论 | 第43-44页 |
第三章 甲基营养型芽孢杆菌YH-158产木聚糖酶的发酵条件优化 | 第44-52页 |
3.1 试验材料 | 第44页 |
3.1.1 菌种 | 第44页 |
3.1.2 试剂与器材 | 第44页 |
3.2 试验方法 | 第44-45页 |
3.2.1 培养基设计 | 第44-45页 |
3.2.2 木聚糖酶活力的测定 | 第45页 |
3.2.3 单因素试验 | 第45页 |
3.2.4 正交试验 | 第45页 |
3.3 结果与分析 | 第45-51页 |
3.3.1 发酵培养基起始pH的确定 | 第45-46页 |
3.3.2 最佳碳源的确定 | 第46-47页 |
3.3.3 最佳氮源的确定 | 第47-48页 |
3.3.4 金属离子对YH158产木聚糖酶的影响 | 第48-49页 |
3.3.5 发酵周期对YH158产木聚糖酶的影响 | 第49-50页 |
3.3.6 发酵温度对YH158产木聚糖酶的影响 | 第50页 |
3.3.7 正交试验分析 | 第50-51页 |
3.4 结论 | 第51-52页 |
第四章 芽孢杆菌YH-158的相关木聚糖酶基因的克隆及表达 | 第52-83页 |
4.1 试验材料 | 第52-55页 |
4.1.1 菌株 | 第52页 |
4.1.2 质粒载体 | 第52页 |
4.1.3 主要试剂 | 第52-54页 |
4.1.4 培养基的配制 | 第54-55页 |
4.1.5 主要仪器 | 第55页 |
4.2 试验方法 | 第55-62页 |
4.2.1 质粒的提取 | 第55-56页 |
4.2.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第56页 |
4.2.3 目的片段的扩增 | 第56-57页 |
4.2.4 PCR产物的回收与纯化 | 第57页 |
4.2.5 目的片段的克隆 | 第57-58页 |
4.2.6 阳性克隆的鉴定 | 第58-59页 |
4.2.7 YH158相关木聚糖酶基因的测序及进化分析 | 第59页 |
4.2.8 大肠杆菌BL21感受态的制备 | 第59-60页 |
4.2.9 大肠杆菌BL21细胞的转化 | 第60页 |
4.2.10 目的基因在大肠杆菌BL21中的诱导表达 | 第60页 |
4.2.11 木聚糖酶分子量的测定 | 第60-62页 |
4.3 结果与分析 | 第62-81页 |
4.3.1 目的片段的扩增 | 第62-63页 |
4.3.2 阳性克隆子的鉴定 | 第63-64页 |
4.3.3 木聚糖酶相关基因测序结果与比对分析 | 第64-78页 |
4.3.4 目的基因在大肠杆菌BL21中的诱导表达 | 第78-79页 |
4.3.5 木聚糖酶水解产物分析 | 第79-80页 |
4.3.6 木聚糖酶分子量的测定 | 第80-81页 |
4.4 结论与讨论 | 第81-83页 |
第五章 结论与展望 | 第83-85页 |
5.1 试验结论 | 第83-84页 |
5.2 论文创新点与展望 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
作者简介 | 第92页 |