| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-31页 |
| 1.1 聚乳酸概述 | 第11-12页 |
| 1.1.1 乳酸简介 | 第11页 |
| 1.1.2 聚乳酸的理化性质 | 第11-12页 |
| 1.2 聚乳酸的应用 | 第12-14页 |
| 1.2.1 生物可降解塑料 | 第12-13页 |
| 1.2.2 生物医药 | 第13-14页 |
| 1.2.3 其他应用 | 第14页 |
| 1.3 合成方法 | 第14-19页 |
| 1.3.1 化学法 | 第15-17页 |
| 1.3.2 生物法 | 第17-19页 |
| 1.4 国内外研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4.1 国外进展 | 第19页 |
| 1.4.2 国内进展 | 第19-20页 |
| 1.5 丙酰辅酶A转移酶和PHA合成酶简介 | 第20-24页 |
| 1.5.1 丙酰辅酶A转移酶(Propionyl-CoAtransferase,PCT) | 第20-21页 |
| 1.5.2 PHA合成酶(PHAsynthase) | 第21-24页 |
| 1.6 细胞分裂及修复原理 | 第24-25页 |
| 1.6.1 细胞分裂原理 | 第24-25页 |
| 1.6.2 SOS反应 | 第25页 |
| 1.7 蛋白融合技术 | 第25-29页 |
| 1.7.1 融合蛋白的构建 | 第26-27页 |
| 1.7.2 融合蛋白的应用 | 第27-29页 |
| 1.8 本课题研究方案与研究意义 | 第29-31页 |
| 1.8.1 本课题研究意义 | 第29页 |
| 1.8.2 本课题研究方案 | 第29-31页 |
| 2 产乳酸工程菌的构建 | 第31-49页 |
| 2.1 引言 | 第31-32页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第32-35页 |
| 2.2.1 菌株和质粒 | 第32页 |
| 2.2.2 引物 | 第32页 |
| 2.2.3 试剂与器材 | 第32-34页 |
| 2.2.4 溶液的配制 | 第34-35页 |
| 2.3 实验内容 | 第35-40页 |
| 2.3.1 ackA基因的敲除 | 第35-37页 |
| 2.3.2 LDH-pTrcHis2B表达载体的构建 | 第37-40页 |
| 2.3.3 高产乳酸菌的摇瓶发酵 | 第40页 |
| 2.3.4 乳酸含量的测定 | 第40页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第40-47页 |
| 2.4.1 ackA基因的敲除 | 第40-43页 |
| 2.4.2 LDH-pTrcHis2B重组质粒的构建 | 第43-45页 |
| 2.4.3 高产乳酸菌的发酵 | 第45-47页 |
| 2.5 本章小结 | 第47-49页 |
| 3 聚乳酸的生物合成及不同类型PHA合成酶对聚乳酸产量的影响. | 第49-63页 |
| 3.1 引言 | 第49-50页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第50-51页 |
| 3.2.1 菌株和质粒 | 第50页 |
| 3.2.2 引物 | 第50页 |
| 3.2.3 试剂与器材 | 第50-51页 |
| 3.2.4 溶液的配制 | 第51页 |
| 3.3 实验内容 | 第51-55页 |
| 3.3.1 II型PHA合成酶发酵生产聚乳酸 | 第51-55页 |
| 3.3.2 I型PHA合成酶发酵生产聚乳酸 | 第55页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第55-61页 |
| 3.4.1 PCTCp-PHAPs6-19-pACYCDuet-1表达载体的构建及验证 | 第56-58页 |
| 3.4.2 聚乳酸的检测与分析 | 第58-60页 |
| 3.4.3 不同类型PHA合成酶对聚乳酸产物的影响 | 第60-61页 |
| 3.5 本章小结 | 第61-63页 |
| 4 细胞形态的改变对聚乳酸产量的影响 | 第63-71页 |
| 4.1 引言 | 第63页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第63-64页 |
| 4.2.1 菌株和质粒 | 第63页 |
| 4.2.2 试剂与器材 | 第63-64页 |
| 4.2.3 溶液的配制 | 第64页 |
| 4.3 实验内容 | 第64-66页 |
| 4.3.1 LDH-SulA-pTrcHis2B表达载体的构建与验证 | 第64页 |
| 4.3.2 发酵生产聚乳酸 | 第64-65页 |
| 4.3.3 聚乳酸产物的分离分析 | 第65-66页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第66-69页 |
| 4.4.1 SulA基因的过表达对细胞增殖的影响 | 第66-67页 |
| 4.4.2 SulA基因的过表达对细胞形态的影响 | 第67-68页 |
| 4.4.3 细胞的形态改变对聚乳酸产量的影响 | 第68-69页 |
| 4.5 本章小结 | 第69-71页 |
| 5 丙酰辅酶A转移酶(PCT)和乳酸脱氢酶(LDH)的酶融合对聚乳酸产量的影响 | 第71-83页 |
| 5.1 引言 | 第71页 |
| 5.2 实验材料与仪器 | 第71-73页 |
| 5.2.1 菌株和质粒 | 第71页 |
| 5.2.2 引物 | 第71-72页 |
| 5.2.3 试剂与器材 | 第72-73页 |
| 5.2.4 溶液的配制 | 第73页 |
| 5.3 实验内容 | 第73-78页 |
| 5.3.1 PCTCp-Linker-LDH-pET30a酶融合表达载体的构建 | 第73-76页 |
| 5.3.2 SulA-PHAPs6-19-pACYCDuet-1表达载体的构建 | 第76-77页 |
| 5.3.3 发酵生产聚乳酸 | 第77-78页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第78-82页 |
| 5.4.1 PCTCp-Linker-LDH-pET30a酶融合表达载体的构建 | 第78-80页 |
| 5.4.2 SulA-PHAPs6-19-pACYCDuet-1表达载体的构建 | 第80-82页 |
| 5.4.3 酶融合对聚乳酸产量的影响 | 第82页 |
| 5.5 本章小结 | 第82-83页 |
| 结论 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-91页 |
| 致谢 | 第91-93页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第93-95页 |
