| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略语 | 第11-15页 |
| 第一部分 microRNA-194-5p在下咽癌中的表达及对下咽癌增殖转移的影响 | 第15-33页 |
| 1 前言 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第17页 |
| 2.1.2 病例选择 | 第17页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-23页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第19-20页 |
| 2.2.2 细胞增殖实验(CCK-8实验) | 第20页 |
| 2.2.3 细胞侵袭实验(Transwell实验) | 第20-21页 |
| 2.2.4 Real-TimePCR实验 | 第21-23页 |
| 2.2.5 H-E染色 | 第23页 |
| 2.3 统计分析 | 第23-24页 |
| 3 结果 | 第24-30页 |
| 3.1 下咽癌临床标本的H-E染色结果 | 第24页 |
| 3.2 下咽癌组织标本中miR-194-5p的表达水平 | 第24-25页 |
| 3.3 下咽癌组织标本中miR-194-5p的表达水平与下咽癌TNM分期的关系 | 第25-26页 |
| 3.4 miR-194-5p对FaDu细胞增殖和侵袭能力的影响 | 第26-30页 |
| 3.4.1 CCK-8实验检测miR-194-5p对FaDu细胞增殖能力的影响 | 第27-29页 |
| 3.4.2 transwell检测miR-194-5p对FaDu细胞侵袭能力的影响 | 第29-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 5 结论 | 第32-33页 |
| 第二部分 miR-194-5p在下咽癌中负相调控靶基因SMURF1的研究 | 第33-61页 |
| 1 前言 | 第33-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-37页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第34页 |
| 2.1.2 病例选择 | 第34-35页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第35-36页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第36-37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-50页 |
| 2.2.1 靶基因SMURF1的扩增、克隆 | 第37-41页 |
| 2.2.2 双荧光素酶报告基因检测实验 | 第41-43页 |
| 2.2.3 免疫组化 | 第43-45页 |
| 2.2.4 Real-TimePCR实验 | 第45-47页 |
| 2.2.5 蛋白免疫印迹法(WesternBlot) | 第47-50页 |
| 2.2.6 细胞培养、细胞转染 | 第50页 |
| 2.3 统计分析 | 第50-51页 |
| 3 结果 | 第51-57页 |
| 3.1 下咽癌组织标本中SMURF1的表达 | 第51-53页 |
| 3.2 双荧光素酶报告基因检测miR-194-5p与SMURF1之间具有靶向关系.. | 第53-54页 |
| 3.3 下咽癌组织中miR-194-5p与SMURF1表达水平的相关性分析 | 第54-55页 |
| 3.4 检测FaDu细胞瞬时转染miR-194-5pmimic或inhbitor及相应阴性对照后SMURF1mRNA和蛋白的表达变化 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 第三部分 miR-194-5p靶向SMURF1调控mTOR信号通路影响下咽癌的增殖与转移 | 第61-82页 |
| 1 前言 | 第61-62页 |
| 2 材料与方法 | 第62-69页 |
| 2.1 实验材料 | 第62-64页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第62页 |
| 2.1.2 病例选择 | 第62页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第62-63页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第63-64页 |
| 2.2 实验方法 | 第64-69页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第64-66页 |
| 2.2.2 细胞增殖实验(CCK-8实验) | 第66页 |
| 2.2.3 细胞侵袭实验(Transwell实验) | 第66-67页 |
| 2.2.4 蛋白免疫印迹法(WesternBlot) | 第67-69页 |
| 2.3 统计分析 | 第69页 |
| 3 结果 | 第69-79页 |
| 3.1 CCK-8检测雷帕霉素对FaDu细胞增殖的抑制作用 | 第69-70页 |
| 3.2 WesternBlot检测各组转染后加入雷帕霉素mTOR及p-mTOR蛋白表达的变化 | 第70-72页 |
| 3.3 CCK-8检测各组分别转染后加入雷帕霉素后FaDu细胞增殖情况 | 第72-74页 |
| 3.4 Transwell检测各组分别转染后加入雷帕霉素后FaDu细胞侵袭能力 | 第74-76页 |
| 3.5 Realtime-PCR及WesternBlot检测FaDu细胞转染SMURF1siRNA后SMURF1表达的变化 | 第76-78页 |
| 3.6 WesternBlot检测FaDu细胞转染SMURF1siRNA后p-mTOR表达的变化 | 第78-79页 |
| 4 讨论 | 第79-81页 |
| 5 结论 | 第81-82页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-91页 |
| 综述 | 第91-112页 |
| 参考文献 | 第101-112页 |
| 在学期间科研成绩 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 个人简介 | 第114页 |
