摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
英文缩略语 | 第11-16页 |
第一部分 :喉癌中CREB对MYCT1的转录调控研究 | 第16-36页 |
1 前言 | 第16-18页 |
2 材料和方法 | 第18-29页 |
2.1 组织标本、细胞系与质粒 | 第18-20页 |
2.1.1 组织标本 | 第18页 |
2.1.2 细胞系 | 第18页 |
2.1.3 质粒载体及菌种 | 第18-20页 |
2.2 主要试剂和仪器 | 第20-21页 |
2.2.1 主要试剂及试剂盒 | 第20页 |
2.2.2 主要仪器及耗材 | 第20-21页 |
2.3 生物信息学网址和计算机分析软件 | 第21-22页 |
2.4 实验方法 | 第22-29页 |
2.4.1 细胞培养 | 第22-23页 |
2.4.2 质粒提取 | 第23-24页 |
2.4.3 基因瞬时转染 | 第24页 |
2.4.4 细胞RNA的提取 | 第24页 |
2.4.5 cDNA合成与Real-timePCR反应 | 第24-25页 |
2.4.6 细胞与组织蛋白的提取、定量与变性 | 第25-26页 |
2.4.7 Westernblot | 第26-27页 |
2.4.8 荧光素酶报告基因检测 | 第27页 |
2.4.9 染色质免疫沉淀 | 第27-28页 |
2.4.10 统计学分析 | 第28-29页 |
3 结果 | 第29-33页 |
3.1 CREB在喉癌及癌旁组织中的表达水平 | 第29-30页 |
3.2 CREB直接抑制MYCT1基因转录 | 第30-33页 |
4 讨论 | 第33-35页 |
5 结论 | 第35-36页 |
第二部分 :CREB通过MYCT1/NAT10轴调控喉癌细胞增殖与迁移的研究 | 第36-50页 |
1 前言 | 第36-38页 |
2 材料和方法 | 第38-42页 |
2.1 细胞系与质粒 | 第38页 |
2.1.1 细胞系 | 第38页 |
2.1.2 质粒载体及菌种 | 第38页 |
2.2 主要试剂和仪器 | 第38-40页 |
2.2.1 主要试剂及试剂盒 | 第38-39页 |
2.2.2 主要仪器及耗材 | 第39-40页 |
2.3 生物信息学网址和计算机分析软件 | 第40页 |
2.4 实验方法 | 第40-42页 |
2.4.1 细胞培养 | 第40页 |
2.4.2 基因瞬时转染 | 第40页 |
2.4.3 细胞RNA提取 | 第40页 |
2.4.4 Real-timePCR反应 | 第40页 |
2.4.5 细胞蛋白提取 | 第40-41页 |
2.4.6 Westernblot | 第41页 |
2.4.7 CCK8法检测细胞增殖能力 | 第41页 |
2.4.8 Transwell法检测细胞迁移能力 | 第41页 |
2.4.9 统计学分析 | 第41-42页 |
3 结果 | 第42-46页 |
3.1 CREB通过下调MYCT1促进NAT10表达 | 第42-43页 |
3.2 CREB通过MYCT1/NAT10轴影响喉癌细胞增殖与迁移 | 第43-46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
本研究创新性的自我评价 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
综述 | 第58-72页 |
参考文献 | 第66-72页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
个人简历 | 第74页 |