摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略词 | 第11-12页 |
第一章 前言 | 第12-25页 |
1.1 植物的耐盐机理 | 第12-16页 |
1.1.1 生物膜的结构和功能 | 第12页 |
1.1.2 离子区域化 | 第12-13页 |
1.1.3 渗透调节 | 第13-14页 |
1.1.4 激素调节 | 第14-16页 |
1.2 耐盐相关基因的克隆与利用 | 第16-23页 |
1.2.1 功能蛋白基因 | 第16-19页 |
1.2.2 与信号传递相关的基因 | 第19-22页 |
1.2.3 盐胁迫下植物的信号转导和基因表达 | 第22-23页 |
1.3 DUF1644家族 | 第23-24页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-51页 |
2.1 实验材料 | 第25-29页 |
2.1.1 水稻材料 | 第25页 |
2.1.2 质粒与菌株 | 第25页 |
2.1.3 主要试剂与仪器 | 第25-27页 |
2.1.4 培养基及试剂的配置 | 第27-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-51页 |
2.2.1 生物信息学分析 | 第29页 |
2.2.2 引物设计与合成 | 第29-32页 |
2.2.3 水稻材料的培养与处理 | 第32页 |
2.2.4 水稻组织基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
2.2.5 水稻组织总RNA的提取 | 第33-34页 |
2.2.6 反转录 | 第34页 |
2.2.7 实时荧光定量PCR | 第34-35页 |
2.2.8 表达载体的构建 | 第35-41页 |
2.2.9 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第41-43页 |
2.2.10 水稻转基因植株的鉴定 | 第43-44页 |
2.2.11 亚细胞定位分析 | 第44页 |
2.2.12 GUS组织化学分析 | 第44-45页 |
2.2.13 超量及抑制表达转基因水稻耐盐性分析 | 第45-46页 |
2.2.14 原核表达载体的构建及融合蛋白的表达 | 第46-51页 |
第三章 结果与分析 | 第51-72页 |
3.1 生物信息学分析 | 第51页 |
3.2 OsSIDP409基因上游启动子区顺式作用元件预测 | 第51-53页 |
3.3 OsSIDP409基因在逆境和激素处理下的表达模式分析 | 第53-55页 |
3.4 表达载体的构建 | 第55-59页 |
3.4.1 超量表达载体的构建 | 第55-56页 |
3.4.2 抑制表达载体的构建 | 第56-57页 |
3.4.3 亚细胞定位表达载体的构建 | 第57-58页 |
3.4.4 组织定位表达载体的构建 | 第58-59页 |
3.5 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第59-60页 |
3.6 水稻转基因植株的鉴定 | 第60-64页 |
3.6.1 PCR检测OsSIDP409转基因植株 | 第60-62页 |
3.6.2 qRT-PCR检测转基因植株中OsSIDP409基因的表达水平 | 第62-64页 |
3.7 亚细胞定位分析 | 第64页 |
3.8 组织表达模式分析 | 第64-66页 |
3.9 超量及抑制表达转基因水稻耐盐性分析 | 第66-70页 |
3.9.1 耐盐性实验 | 第66-68页 |
3.9.2 离体叶片中H_2O_2的检测 | 第68页 |
3.9.3 抗逆相关的Marker基因的表达分析 | 第68-70页 |
3.10 原核表达载体的构建及融合蛋白的表达 | 第70-72页 |
第四章 讨论 | 第72-75页 |
4.1 OsSIDP409基因的表达模式 | 第72页 |
4.2 OsSIDP409蛋白的亚细胞定位 | 第72-73页 |
4.3 OsSIDP409基因与植株的耐盐性 | 第73-75页 |
小结 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-84页 |
致谢 | 第84页 |