| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-31页 |
| 1.1 山羊乳脂概述 | 第14页 |
| 1.2 乳脂代谢研究进展 | 第14-22页 |
| 1.2.1 脂肪酸的摄取 | 第15-16页 |
| 1.2.2 细胞内脂肪酸合成 | 第16-17页 |
| 1.2.3 乳甘油三酯合成与脂滴形成 | 第17-19页 |
| 1.2.4 乳脂转录调控 | 第19-22页 |
| 1.3 短链脂肪酸简介 | 第22-25页 |
| 1.3.1 短链脂肪酸吸收 | 第22-23页 |
| 1.3.2 短链脂肪酸的生理作用 | 第23-25页 |
| 1.4 G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors, GPCRs) 概述 | 第25-30页 |
| 1.4.1 G蛋白偶联受体的分类及分子作用机制 | 第26-27页 |
| 1.4.2 G蛋白偶联受体 41（GPR41）的研究进展 | 第27-30页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第30-31页 |
| 第二章 短链脂肪酸对奶山羊乳腺上皮细胞脂代谢的效应研究 | 第31-40页 |
| 2.1 材料与方法 | 第31-33页 |
| 2.1.1 试剂与仪器 | 第31-32页 |
| 2.1.2 细胞培养和处理 | 第32页 |
| 2.1.3 甘油三酯检测和油红-O染色 | 第32-33页 |
| 2.1.4 RNA的提取与实时定量PCR分析 | 第33页 |
| 2.1.5 数据分析 | 第33页 |
| 2.2 结果 | 第33-37页 |
| 2.2.1 不同短链脂肪酸盐对乳腺细胞甘油三酯含量及脂滴形成的影响 | 第33-36页 |
| 2.2.2 不同短链脂肪酸盐对乳腺细胞中脂代谢基因表达的影响 | 第36-37页 |
| 2.3 讨论 | 第37-39页 |
| 2.4 本章小结 | 第39-40页 |
| 第三章 短链脂肪酸受体GPR41表达分析及腺病毒介导的过表达研究 | 第40-53页 |
| 3.1 材料与方法 | 第40-44页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第40页 |
| 3.1.2 试剂与仪器 | 第40-41页 |
| 3.1.3 重组腺病毒超表达载体的构建 | 第41-42页 |
| 3.1.4 重组腺病毒的包装与扩繁 | 第42-43页 |
| 3.1.5 细胞培养与处理 | 第43页 |
| 3.1.6 RNA的提取与实时定量PCR分析 | 第43页 |
| 3.1.7 甘油三酯检测和油红-O染色 | 第43页 |
| 3.1.8 数据分析 | 第43-44页 |
| 3.2 结果 | 第44-50页 |
| 3.2.1 山羊GPR41基因在乳腺组织不同泌乳时期的表达分析 | 第44页 |
| 3.2.2 pAdEasy-GPR41腺病毒超表达载体构建 | 第44-46页 |
| 3.2.3 重组腺病毒的包装和扩增 | 第46页 |
| 3.2.4 GPR41基因超表达效率的检测 | 第46-47页 |
| 3.2.5 过表达GPR41对乳脂代谢相关基因表达的影响 | 第47-49页 |
| 3.2.6 过表达GPR41对甘油三酯含量及脂滴形成的影响 | 第49-50页 |
| 3.3 讨论 | 第50-51页 |
| 3.3.1 GPR41在奶山羊不同泌乳时期的表达差异 | 第50页 |
| 3.3.2 GPR41影响乳腺上皮细胞脂代谢相关基因的表达 | 第50-51页 |
| 3.3.3 GPR41对乳腺脂质积累的影响 | 第51页 |
| 3.4 小结 | 第51-53页 |
| 第四章 干扰GPR41表达和抑制下游通路对乳脂代谢的影响 | 第53-63页 |
| 4.1 材料与方法 | 第53-55页 |
| 4.1.1 试剂与仪器 | 第53-54页 |
| 4.1.2 乳腺细胞培养 | 第54页 |
| 4.1.3 siRNA的设计与合成 | 第54页 |
| 4.1.4 siRNA的转染 | 第54页 |
| 4.1.5 百日咳毒素(PTX )处理 | 第54页 |
| 4.1.6 RNA的提取与实时定量PCR分析 | 第54-55页 |
| 4.1.7 甘油三酯检测和油红-O染色 | 第55页 |
| 4.1.8 数据分析 | 第55页 |
| 4.2 结果 | 第55-61页 |
| 4.2.1 GPR41基因干扰效率的检测 | 第55-56页 |
| 4.2.2 干扰GPR41基因对乳脂代谢相关基因表达的影响 | 第56-58页 |
| 4.2.3 抑制GPR41偶联的Gi/o蛋白对乳脂代谢相关基因表达的影响 | 第58-60页 |
| 4.2.4 干扰GPR41对甘油三酯含量及脂滴积累的影响 | 第60-61页 |
| 4.3 讨论 | 第61-62页 |
| 4.4 小结 | 第62-63页 |
| 第五章 GPR41通过SREBP1和PPARG调控乳脂代谢基因的表达 | 第63-73页 |
| 5.1 试验材料与方法 | 第63-65页 |
| 5.1.1 试验试剂与仪器 | 第63-64页 |
| 5.1.2 重组腺病毒超表达载体的扩繁 | 第64页 |
| 5.1.3 siRNA的合成 | 第64页 |
| 5.1.4 细胞培养及处理 | 第64页 |
| 5.1.5 RNA的提取与实时定量PCR分析 | 第64-65页 |
| 5.1.6 Western blot分析 | 第65页 |
| 5.1.7 数据分析 | 第65页 |
| 5.2 结果 | 第65-71页 |
| 5.2.1 Ad-SREBP1腺病毒的扩增 | 第65-66页 |
| 5.2.2 SREBP1超表达效果的检测 | 第66-67页 |
| 5.2.3 过表达SREBP1对GPR41调控的乳脂代谢相关基因表达的影响 | 第67-68页 |
| 5.2.4 SREBP1干扰效果的检测 | 第68页 |
| 5.2.5 干扰SREBP1对GPR41调控的乳脂代谢相关基因表达的影响 | 第68-69页 |
| 5.2.6 PPARG激动剂和抑制剂处理对GPR41调控的乳脂代谢基因表达的影响 | 第69-71页 |
| 5.3 讨论 | 第71-72页 |
| 5.3.1 SREBP1参与GPR41调控的乳脂代谢相关基因表达 | 第71页 |
| 5.3.2 PPARG参与GPR41调控的乳脂代谢相关基因表达 | 第71-72页 |
| 5.4 小结 | 第72-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 本研究的创新点 | 第74-75页 |
| 存在问题及展望 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-91页 |
| 附录 | 第91-93页 |
| 缩略词 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 作者简介 | 第95页 |
