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苹果ZIP基因家族生物信息学分析及MdZIP10基因的功能研究

中文摘要第9-11页
Abstract第11-12页
1 前言第13-23页
    1.1 土壤中的锌第13-14页
    1.2 锌在植物体内的功能第14-19页
        1.2.1 锌与生长素代谢的关系第14-15页
        1.2.2 锌与植物生长发育和果实品质的关系第15-16页
        1.2.3 锌与碳水化合物代谢的关系第16-17页
        1.2.4 锌与抗氧化系统的关系第17-18页
        1.2.5 锌与生物膜的关系第18-19页
        1.2.6 锌与其他矿质元素的关系第19页
    1.3 锌在植物体内的吸收、转运及分配第19-21页
    1.4 植物体对缺锌胁迫的机制第21-22页
    1.5 本研究目的和意义第22-23页
2 材料与方法第23-35页
    2.1 实验材料第23-26页
        2.1.1 植物材料第23页
        2.1.2 材料的培养与处理第23页
        2.1.3 菌株与质粒第23页
        2.1.4 酶与生化试剂第23-24页
        2.1.5 PCR引物第24-25页
        2.1.6 数据库及软件资源第25-26页
    2.2 生物信息学分析第26-27页
        2.2.1 苹果MdZIPs蛋白家族成员的鉴定第26页
        2.2.2 MdZIPs家族蛋白性质分析第26页
        2.2.3 构建苹果MdZIPs系统进化树第26-27页
        2.2.4 MdZIPs基因结构及蛋白质结构分析第27页
        2.2.5 MdZIPs基因的染色体定位分析第27页
    2.3 实验方法第27-35页
        2.3.1 植物总RNA的提取第27-28页
        2.3.2 RNA的反转录第28-29页
        2.3.3 实时荧光定量PCR检测基因的表达第29页
        2.3.4 基因的克隆第29-30页
        2.3.5 连接反应第30页
        2.3.6 转化和筛选第30页
        2.3.7 提取质粒第30-31页
        2.3.8 酶切反应第31页
        2.3.9 农杆菌感受态细胞的制备第31-32页
        2.3.10 冻融法转化农杆菌第32页
        2.3.11 花序侵染法转化拟南芥第32页
        2.3.12 拟南芥基因组总DNA的提取第32-33页
        2.3.13 金属离子含量的检测第33页
        2.3.14 MdZIP10的亚细胞定位第33-34页
        2.3.15 PI染色第34-35页
3 结果与分析第35-52页
    3.1 苹果MdZIPs蛋白家族生物信息学分析第35-39页
        3.1.1 苹果MdZIPs家族基因的鉴定第35页
        3.1.2 苹果MdZIPs蛋白的进化树构建和基因结构分析第35-36页
        3.1.3 苹果MdZIPs的蛋白质结构分析第36-37页
        3.1.4 不同物种ZIP家族系统进化树第37-38页
        3.1.5 苹果MdZIPs基因在染色体上的定位第38-39页
    3.2 苹果MdZIPs基因家族表达模式分析第39-43页
        3.2.1 缺锌处理对苹果MdZIPs基因表达的影响第39-43页
    3.3 苹果MdZIP10基因的功能分析第43-52页
        3.3.1 苹果MdZIP10蛋白亚细胞定位第43页
        3.3.2 转MdZIP10基因拟南芥的鉴定第43-44页
        3.3.3 过表达MdZIP10基因提高了转基因拟南芥的锌和铁的含量第44-45页
        3.3.4 组织学检测转基因拟南芥中的锌分布第45-46页
        3.3.5 过表达MdZIP10影响转基因拟南芥内源相关基因的表达第46-47页
        3.3.6 过表达MdZIP10影响转基因拟南芥的根系生长第47-49页
        3.3.7 MdZIP10调控缺锌条件下与锌铁吸收转运相关基因的表达第49-50页
        3.3.8 MdZIP10调控缺铁条件下与锌铁吸收转运相关基因的表达第50-52页
4 讨论第52-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-64页
致谢第64-65页
攻读学位期间发表的论文及成果第65页

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