| 摘要 | 第6-9页 |
| abstract | 第9-11页 |
| 文献综述 | 第16-29页 |
| 第一章 猪瘟病毒感染与宿主天然免疫 | 第16-29页 |
| 1.1 猪瘟病毒研究进展 | 第16-20页 |
| 1.1.1 CSFV的结构与组成 | 第16-17页 |
| 1.1.2 CSFV蛋白的生物学功能 | 第17-20页 |
| 1.2 天然免疫研究进展 | 第20-21页 |
| 1.3 CSFV与天然免疫 | 第21-22页 |
| 1.3.1 CSFV与模式识别受体 | 第21-22页 |
| 1.3.2 CSFV对天然免疫应答的影响 | 第22页 |
| 1.3.3 CSFV对细胞凋亡的影响 | 第22页 |
| 1.4 线粒体抗病毒信号蛋白研究进展 | 第22-29页 |
| 1.4.1 MAVS的发现 | 第23页 |
| 1.4.2 MAVS的结构 | 第23-24页 |
| 1.4.3 MAVS信号通路 | 第24-25页 |
| 1.4.4 MAVS抗病毒免疫应答的启动 | 第25页 |
| 1.4.5 MAVS表达和功能的调控 | 第25-26页 |
| 1.4.6 MAVS的亚细胞定位与功能研究 | 第26-27页 |
| 1.4.7 MAVS抗病毒信号模型 | 第27页 |
| 1.4.8 MAVS与细胞凋亡 | 第27-28页 |
| 1.4.9 病毒拮抗MAVS介导的信号通路 | 第28-29页 |
| 试验研究 | 第29-90页 |
| 第二章 线粒体抗病毒信号蛋白对猪瘟病毒复制的影响 | 第29-48页 |
| 2.1 材料 | 第29-30页 |
| 2.1.1 细胞、菌株与质粒 | 第29-30页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 | 第30页 |
| 2.2 方法 | 第30-39页 |
| 2.2.1 MAVS真核表达载体和干扰载体的构建及鉴定 | 第30-33页 |
| 2.2.2 MAVS过表达及干扰重组慢病毒的包装与滴度测定 | 第33-34页 |
| 2.2.3 CSFV感染PAM细胞后MAVS的表达变化 | 第34-35页 |
| 2.2.4 ROS对CSFV诱导的MAVS表达影响的检测 | 第35页 |
| 2.2.5 干扰MAVS对CSFV复制影响的检测 | 第35-37页 |
| 2.2.6 过表达MAVS对CSFV复制影响的检测 | 第37-38页 |
| 2.2.7 过表达MAVS细胞的上清液对CSFV复制影响的检测 | 第38页 |
| 2.2.8 MAVS对CSFV感染后细胞内IFN-β和IL-6水平影响的检测 | 第38-39页 |
| 2.2.9 数据统计分析 | 第39页 |
| 2.3 结果 | 第39-45页 |
| 2.3.1 各真核表达载体的构建及鉴定结果 | 第39页 |
| 2.3.2 CSFV感染对MAVS表达的影响 | 第39-41页 |
| 2.3.3 ROS对CSFV诱导的MAVS表达的影响 | 第41-42页 |
| 2.3.4 干扰MAVS对CSFV复制的影响 | 第42页 |
| 2.3.5 过表达MAVS对CSFV复制的影响 | 第42-44页 |
| 2.3.6 过表达MAVS的细胞上清对CSFV复制的影响 | 第44页 |
| 2.3.7 MAVS对CSFV感染后细胞内IFN-β和IL-6水平的影响 | 第44-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-47页 |
| 2.5 小结 | 第47-48页 |
| 第三章 CSFV及其N~(pro)蛋白对MAVS介导的天然免疫因子表达和细胞凋亡的抑制作用及机制 | 第48-64页 |
| 3.1 材料 | 第49页 |
| 3.1.1 细胞、菌株与质粒 | 第49页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第49页 |
| 3.1.3 主要仪器与设备 | 第49页 |
| 3.2 方法 | 第49-54页 |
| 3.2.1 真核表达载体和干扰载体的构建及鉴定 | 第49-50页 |
| 3.2.2 MAVS过表达重组慢病毒和IRF3干扰重组慢病毒的包装与滴度测定 | 第50页 |
| 3.2.3 过表达MAVS对抗病毒因子表达水平影响的检测 | 第50-51页 |
| 3.2.4 MAVS对细胞凋亡影响的检测 | 第51-52页 |
| 3.2.5 Real-timePCR检测CSFV各蛋白对MAVS介导IFN-β表达的影响 | 第52-53页 |
| 3.2.6 CSFV和N~(pro)对MAVS介导的抗病毒因子影响的检测 | 第53页 |
| 3.2.7 IRF3对MAVS介导的抗病毒因子影响的检测 | 第53-54页 |
| 3.2.8 CSFV和N~(pro)对MAVS诱导的细胞凋亡影响的检测 | 第54页 |
| 3.2.9 IRF3对MAVS诱导的细胞凋亡影响的检测 | 第54页 |
| 3.2.10 数据统计分析 | 第54页 |
| 3.3 结果 | 第54-62页 |
| 3.3.1 MAVS对天然免疫因子的影响 | 第54-56页 |
| 3.3.2 MAVS对细胞凋亡的影响 | 第56页 |
| 3.3.3 CSFV对MAVS介导的天然免疫因子的影响 | 第56-58页 |
| 3.3.4 CSFV蛋白对MAVS介导的IFN-β表达的影响 | 第58-59页 |
| 3.3.5 CSFVN~(pro)对MAVS介导的天然免疫因子的影响 | 第59页 |
| 3.3.6 IRF3对MAVS介导的天然免疫因子的影响 | 第59页 |
| 3.3.7 CSFV及其N~(pro)蛋白和IRF3对MAVS介导的细胞凋亡的影响 | 第59-62页 |
| 3.4 讨论 | 第62-63页 |
| 3.5 小结 | 第63-64页 |
| 第四章 CSFVNS4B蛋白抑制MAVS介导的IFN-β表达的机制 | 第64-75页 |
| 4.1 材料 | 第64-65页 |
| 4.1.1 细胞、菌株与质粒 | 第64页 |
| 4.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第64-65页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第65页 |
| 4.2 方法 | 第65-67页 |
| 4.2.1 原核与真核表达载体的构建及鉴定 | 第65页 |
| 4.2.2 NS4B对IFN-β、ISG15、OAS1水平影响的检测 | 第65页 |
| 4.2.3 NS4B对poly(I:C)诱导IFN-β表达影响的检测 | 第65页 |
| 4.2.4 NS4B对MAVS介导IFN-β表达影响的检测 | 第65页 |
| 4.2.5 Westernblot检测NS4B对MAVS表达的影响 | 第65-66页 |
| 4.2.6 免疫共沉淀(Co-IP)验证NS4B与MAVS的相互作用 | 第66-67页 |
| 4.2.7 GSTPull-down验证NS4B与MAVS的相互作用 | 第67页 |
| 4.2.8 NS4B分段基因对MAVS介导IFN-β表达影响的检测 | 第67页 |
| 4.2.9 数据统计分析 | 第67页 |
| 4.3 结果 | 第67-73页 |
| 4.3.1 CSFVNS4B对IFN-β表达的影响 | 第67-68页 |
| 4.3.2 NS4B对poly(I:C)诱导的IFN-β表达的影响 | 第68-69页 |
| 4.3.3 NS4B对MAVS介导的IFN-β表达的影响 | 第69-70页 |
| 4.3.4 Co-IP验证NS4B与MAVS的相互作用 | 第70-71页 |
| 4.3.5 GSTPull-down验证NS4B与MAVS的相互作用 | 第71页 |
| 4.3.6 NS4B与MAVS相互作用的区域 | 第71-72页 |
| 4.3.7 NS4B各区段对MAVS介导的IFN-β表达的影响 | 第72-73页 |
| 4.4 讨论 | 第73-74页 |
| 4.5 小结 | 第74-75页 |
| 第五章 MAVS在CSFV及其NS4A蛋白诱导IL-8表达中的作用 | 第75-90页 |
| 5.1 材料 | 第75-76页 |
| 5.1.1 细胞、菌株与质粒 | 第75页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第75-76页 |
| 5.1.3 主要仪器与设备 | 第76页 |
| 5.2 方法 | 第76-79页 |
| 5.2.1 真核表达载体的构建及鉴定 | 第76页 |
| 5.2.2 CSFV感染对IL-8水平影响的检测 | 第76-77页 |
| 5.2.3 MAVS对CSFV诱导IL-8表达影响的检测 | 第77页 |
| 5.2.4 ROS对CSFV诱导IL-8表达影响的检测 | 第77页 |
| 5.2.5 ROS对MAVS介导IL-8表达影响的检测 | 第77页 |
| 5.2.6 MAVS对CSFV诱导ROS水平影响的检测 | 第77-78页 |
| 5.2.7 激光共聚焦检测NS4A蛋白亚细胞的定位 | 第78页 |
| 5.2.8 NS4A对IL-8分子水平影响的检测 | 第78页 |
| 5.2.9 MAVS对NS4A诱导IL-8表达影响的检测 | 第78页 |
| 5.2.10 NS4A对MAVS介导IL-8表达影响的检测 | 第78页 |
| 5.2.11 NS4A对CSFV复制影响的检测 | 第78页 |
| 5.2.12 IL-8对CSFV复制影响的检测 | 第78-79页 |
| 5.2.13 数据统计分析 | 第79页 |
| 5.3 结果 | 第79-86页 |
| 5.3.1 CSFV感染对IL-8表达的影响 | 第79页 |
| 5.3.2 MAVS对CSFV诱导IL-8表达的影响 | 第79-81页 |
| 5.3.3 ROS对CSFV诱导IL-8表达的影响 | 第81-82页 |
| 5.3.4 ROS对MAVS诱导IL-8表达的影响 | 第82-83页 |
| 5.3.5 CSFVNS4A蛋白的亚细胞定位 | 第83-84页 |
| 5.3.6 CSFVNS4A对IL-8表达的影响 | 第84-85页 |
| 5.3.7 MAVS对NS4A诱导IL-8表达的影响 | 第85页 |
| 5.3.8 NS4A及IL-8对CSFV复制的影响 | 第85-86页 |
| 5.4 讨论 | 第86-89页 |
| 5.5 小结 | 第89-90页 |
| 结论 | 第90页 |
| 本论文的创新点 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-106页 |
| 主要缩略词与中英文对照表(AbbreviationIndex) | 第106-108页 |
| 致谢 | 第108-110页 |
| 作者简介 | 第110-111页 |
