摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6-7页 |
文献综述 | 第11-22页 |
第一章 ES细胞的研究进展 | 第11-17页 |
1.1 ES细胞研究历史 | 第11-12页 |
1.2 ES细胞的生物学特性 | 第12-13页 |
1.2.1 形态学特点 | 第12页 |
1.2.2 核型稳定 | 第12页 |
1.2.3 一定条件下无限自我更新 | 第12-13页 |
1.2.4 多向分化能力 | 第13页 |
1.2.5 无限增殖能力 | 第13页 |
1.3 ES细胞标记 | 第13-15页 |
1.3.1 细胞表面标记 | 第13-14页 |
1.3.2 转录因子 | 第14页 |
1.3.3 信号通路相关胞内标记 | 第14页 |
1.3.4 酶标记 | 第14页 |
1.3.5 其他标记 | 第14-15页 |
1.4 ES细胞状态的维持 | 第15-17页 |
1.4.1 ES细胞的状态 | 第15页 |
1.4.2 从ES细胞状态过度到特定状态 | 第15-17页 |
第二章 四倍体补偿技术研究进展 | 第17-22页 |
2.1 4n胚胎的制备 | 第17-18页 |
2.1.1 注射法 | 第17-18页 |
2.1.2 抑制卵裂球分裂法 | 第18页 |
2.1.3 卵裂球融合法 | 第18页 |
2.2 嵌合体的类型及其制备 | 第18-20页 |
2.3 四倍体补偿技术应用前景 | 第20-22页 |
试验研究 | 第22-39页 |
第三章 小鼠2n胚胎与4n胚胎发育能力的研究 | 第22-31页 |
3.1 材料与方法 | 第22-23页 |
3.1.1 试验材料 | 第22页 |
3.1.2 试验试剂 | 第22-23页 |
3.1.3 试验仪器 | 第23页 |
3.2 方法 | 第23-26页 |
3.2.1 捡卵针的制备 | 第23页 |
3.2.2 小鼠2-细胞期胚胎的采集 | 第23页 |
3.2.3 4n胚胎的制备 | 第23-24页 |
3.2.4 4n胚胎的培养 | 第24页 |
3.2.5 2n胚胎和4n胚胎中多能性基因Oct-4的表达及分布 | 第24页 |
3.2.6 多能性基因Oct-4、Nanog及凋亡相关基因Bax、Bcl-2RNA水平表达检测 | 第24-26页 |
3.3 结果 | 第26-29页 |
3.3.1 不同参数下小鼠胚胎电融合率 | 第26页 |
3.3.2 不同细胞期2n胚胎及4n胚胎形态学比较 | 第26-27页 |
3.3.3 2n胚胎与4n胚胎成熟率的比较 | 第27页 |
3.3.4 多能性基因Oct-4表达及分布 | 第27-28页 |
3.3.5 多能性基因及凋亡相关基因RNA水平表达 | 第28-29页 |
3.4 讨论 | 第29-30页 |
3.5 小结 | 第30-31页 |
第四章 ES细胞的注射及胚胎移植 | 第31-39页 |
4.1 材料与方法 | 第31-32页 |
4.1.1 试验材料 | 第31页 |
4.1.2 试验试剂 | 第31-32页 |
4.1.3 试验仪器 | 第32页 |
4.2 方法 | 第32-35页 |
4.2.1 小鼠MEF及饲养层细胞的制备 | 第32页 |
4.2.2 ES细胞的培养 | 第32-33页 |
4.2.3 ES细胞的传代 | 第33页 |
4.2.4 ES细胞的冻存 | 第33页 |
4.2.5 显微注射用针的准备 | 第33页 |
4.2.6 ES细胞的注射 | 第33-34页 |
4.2.7 公鼠结扎 | 第34页 |
4.2.8 假孕鼠准备 | 第34页 |
4.2.9 胚胎移植 | 第34-35页 |
4.2.10 出生小鼠检测 | 第35页 |
4.3 结果 | 第35-37页 |
4.3.1 ES细胞的培养 | 第35-36页 |
4.3.2 ES细胞的注射 | 第36页 |
4.3.3 胚胎移植状况 | 第36-37页 |
4.3.4 出生小鼠检测 | 第37页 |
4.4 讨论 | 第37-38页 |
4.5 小结 | 第38-39页 |
全文结论 | 第39-40页 |
创新点及下一步研究计划 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51页 |