摘要 | 第5页 |
Abstract | 第5-6页 |
一、前言 | 第7-12页 |
1 流感病毒的基本生物学特性 | 第7-9页 |
1.1 流感病毒的分型 | 第7-8页 |
1.2 流感病毒的基因结构和生物学特性 | 第8页 |
1.3 流感病毒的流行特征 | 第8页 |
1.4 甲型H1N1流感病毒 | 第8页 |
1.5 流感病毒感染临床表现和病理特征 | 第8-9页 |
2 CXCL4基因结构和生物学特性 | 第9-10页 |
2.1 趋化因子 | 第9页 |
2.2 CXCL4的基本特性 | 第9-10页 |
2.3 CXCL4功能 | 第10页 |
3 流感病毒疫苗研究 | 第10-11页 |
4 流感病毒介导的免疫损伤 | 第11-12页 |
5 实验设计思路及意义 | 第12页 |
二、实验材料与方法 | 第12-38页 |
1 实验材料 | 第12-18页 |
1.1 实验动物 | 第12-13页 |
1.2 实验细胞 | 第13页 |
1.3 细胞消化液 | 第13页 |
1.4 细胞培养液 | 第13-14页 |
1.5 小鼠H1N1流感病毒PR8株 | 第14页 |
1.6 病毒维持液 | 第14页 |
1.7 工程菌 | 第14页 |
1.8 载体 | 第14-15页 |
1.9 细菌培养基 | 第15页 |
1.10 引物与探针 | 第15-16页 |
1.11 实验使用的主要试剂盒及其他产品 | 第16-17页 |
1.12 主要实验仪器设备 | 第17-18页 |
1.13 实验耗材 | 第18页 |
2. 实验方法 | 第18-38页 |
2.1 细胞培养 | 第18-19页 |
2.2 流感病毒培养与滴度测定 | 第19-21页 |
2.3 实验动物 | 第21-23页 |
2.4 病毒载量的测定 | 第23-33页 |
2.5 组织病理学检查 | 第33-34页 |
2.6 流式细胞仪检测淋巴细胞的变化情况 | 第34-35页 |
2.7 ELISA检测肺灌洗液中TNF-α、MIP/CXCL2、KC(IL-8)的浓度 | 第35-36页 |
2.8 小鼠肺部组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性测定 | 第36-37页 |
2.9 小鼠肺湿干重比 | 第37页 |
2.10 BLAF中细胞因子的检测 | 第37-38页 |
三、结果与分析 | 第38-57页 |
1 小鼠的临床表现 | 第38-40页 |
2 小鼠肺部组织病理学分析 | 第40-43页 |
3 小鼠肺部病毒滴度和载量分析 | 第43-47页 |
3.1 qRT-PCR标准品的制备及标准曲线的建立 | 第43-46页 |
3.2 小鼠肺部病毒载量检测 | 第46-47页 |
4 免疫学分析 | 第47-57页 |
4.1 IAV感染后天然免疫细胞变化 | 第47-51页 |
4.2 IAV感染后获得免疫变化 | 第51-56页 |
4.3 CXCL4缺失对H1N1感染肺部细胞因子反应的影响 | 第56-57页 |
四、讨论 | 第57-59页 |
五、小结 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
附录 | 第64-69页 |
附录1 主要溶液配制 | 第64-67页 |
附录2 缩略词表(Abbreviations Table) | 第67-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
研究生简历 | 第70-72页 |