| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩写词 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-21页 |
| 1.1 磷与植物体之间的关系 | 第13页 |
| 1.2 土壤中磷元素的现状 | 第13页 |
| 1.3 植物体对磷的吸收利用 | 第13-14页 |
| 1.4 植物在低磷胁迫下的应对策略 | 第14-18页 |
| 1.4.1 植物体在形态水平上的变化 | 第14-15页 |
| 1.4.2 植物体在生理生化水平的变化 | 第15-17页 |
| 1.4.3 低磷应答信号网络 | 第17-18页 |
| 1.5 根际p H变化 | 第18-19页 |
| 1.6 氮与磷的关系 | 第19页 |
| 1.7 课题前期研究及立题意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-37页 |
| 2.1 实验仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 实验材料 | 第22页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.2.2 质粒载体 | 第22页 |
| 2.3 实验试剂 | 第22页 |
| 2.4 引物合成及DNA测序 | 第22-23页 |
| 2.5 常用培养基及溶液的配制 | 第23-27页 |
| 2.5.1 培养基的配制 | 第23-24页 |
| 2.5.2 常用溶液的配制 | 第24-25页 |
| 2.5.3 无机磷含量测定溶液 | 第25页 |
| 2.5.4 GUS染液试剂 | 第25页 |
| 2.5.5 GUS酶活测定溶液 | 第25-26页 |
| 2.5.6 考马斯亮蓝G250染色液 | 第26页 |
| 2.5.7 H~+-ATPase活性测定液 | 第26-27页 |
| 2.6 实验方法 | 第27-37页 |
| 2.6.1 拟南芥种植 | 第27页 |
| 2.6.2 根际酸化能力定量测定方法 | 第27-28页 |
| 2.6.3 溴甲酚紫指示剂培养基p H原位显示法 | 第28页 |
| 2.6.4 无机磷含量测定 | 第28页 |
| 2.6.5 花青素含量的测定 | 第28-29页 |
| 2.6.6 侧根密度统计方法 | 第29页 |
| 2.6.7 H~+-ATPase活性测定方法 | 第29页 |
| 2.6.8 GUS染色分析 | 第29-30页 |
| 2.6.9 GUS酶活定量测定 | 第30-31页 |
| 2.6.10 有机酸含量的测定 | 第31-32页 |
| 2.6.11 拟南芥基因组DNA提取方法 | 第32页 |
| 2.6.12 拟南芥总RNA提取 | 第32-33页 |
| 2.6.13 反转录制备拟南芥c DNA | 第33页 |
| 2.6.14 目的基因片段的扩增 | 第33-34页 |
| 2.6.15 酶切产物的纯化 | 第34页 |
| 2.6.16 酶切产物的连接 | 第34-35页 |
| 2.6.17 重组质粒的鉴定 | 第35页 |
| 2.6.18 农杆菌侵染拟南芥 | 第35-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-61页 |
| 3.1 pdrad1-1 突变体突变基因的确定 | 第37-43页 |
| 3.1.1 低磷条件下pdrad1-1、pdrad1-2 的酸化能力弱于WT | 第37-38页 |
| 3.1.2 PDRAD1转基因回补植株可以恢复突变体pdrad1-1 的酸化能力 | 第38-40页 |
| 3.1.3 转基因回补植株可以恢复pdrad1-1 的侧根密度和花青素含量 | 第40-41页 |
| 3.1.4 转基因回补植株的磷转运能力与WT一致 | 第41-43页 |
| 3.2 PDRAD1基因对低磷胁迫的响应 | 第43-52页 |
| 3.2.1 低磷诱导PDRAD1表达量上调 | 第43-44页 |
| 3.2.2 PDRAD1超表达株系鉴定及酸化表型分析 | 第44-45页 |
| 3.2.3 Na_3VO_4抑制根际酸化反应 | 第45-46页 |
| 3.2.4 低磷胁迫下超表达植株根部细胞质膜上H~+-ATP酶活性增强 | 第46-47页 |
| 3.2.5 低磷胁迫下植株体内和根系分泌物中有机酸含量分析 | 第47-51页 |
| 3.2.6 低磷胁迫下超表达株系根系形态发生显著改变 | 第51-52页 |
| 3.3 不同浓度氮源处理下突变体特征分析 | 第52-58页 |
| 3.3.1 不同浓度氮源处理下pdrad1-1 的酸化表型及定量分析 | 第52-54页 |
| 3.3.2 突变体pdrad1-1 的生物量和侧根密度低于WT | 第54-56页 |
| 3.3.3 缺铵条件下pdrad1-1 的磷转运能力加强 | 第56-57页 |
| 3.3.4 低磷胁迫下植物组织中的铵含量积累 | 第57-58页 |
| 3.4 PDRAD1::p CAMBIA1300-GFP永久GFP载体的构建 | 第58-61页 |
| 4 讨论 | 第61-65页 |
| 4.1 PDRAD1调控低磷诱导下的根际酸化过程 | 第61-62页 |
| 4.2 PDRAD1影响了无机磷在植物体内的转运 | 第62页 |
| 4.3 PDRAD1影响植株根系形态建成 | 第62-65页 |
| 5 结论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
