| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 引言 | 第12-16页 |
| 1.1 神经综述 | 第12页 |
| 1.2 突触可塑性 | 第12-13页 |
| 1.3 秀丽隐杆线虫 | 第13页 |
| 1.4 DD(Dorsal D)运动神经元突触重塑 | 第13-15页 |
| 1.5 LIN-14抑制DD突触重塑的时序性 | 第15页 |
| 1.6 本课题组发现myrf1是调控突触重塑的关键基因 | 第15-16页 |
| 2 实验目的与内容 | 第16-17页 |
| 2.1 实验的目的与意义 | 第16页 |
| 2.2 实验内容 | 第16-17页 |
| 2.2.1 构建myrf-1无效突变体并分析突触重塑 | 第16页 |
| 2.2.2 构建myrf-2无效突变体并分析突触重塑 | 第16页 |
| 2.2.3 构建myrf-1和myrf-2双突变体并分析突触重塑 | 第16-17页 |
| 2.2.4 过表达MYRF-2并分析突触重塑 | 第17页 |
| 2.2.5 过表达MYRF-1(G274R即ju1121)并分析突触重塑 | 第17页 |
| 3 实验材料与方法 | 第17-23页 |
| 3.1 实验材料 | 第17页 |
| 3.2 试剂与配方 | 第17-20页 |
| 3.2.1 琼脂培养基 | 第17-19页 |
| 3.2.2 线虫冻存液 | 第19页 |
| 3.2.3 线虫培养盐溶液 | 第19-20页 |
| 3.3 实验方法 | 第20-23页 |
| 3.3.1 CRISPR基因剪切 | 第21页 |
| 3.3.2 基因整合 | 第21页 |
| 3.3.3 线虫的同时期处理 | 第21-22页 |
| 3.3.4 线虫的图片拍摄 | 第22页 |
| 3.3.5 线虫的固定 | 第22页 |
| 3.3.6 线虫蛋白提取和Western Blot | 第22页 |
| 3.3.7 免疫共沉淀 | 第22-23页 |
| 4 实验结果 | 第23-44页 |
| 4.1 myrf-1(ju1121)的DD神经元突触重塑受到阻断 | 第23-24页 |
| 4.2 myrf-1功能缺失突变体的DD神经元突触重塑正常 | 第24-27页 |
| 4.3 myrf-2功能缺失突变体的DD神经元突触重塑正常 | 第27-28页 |
| 4.3.1 myrf-2(ybq42)能够正常进行DD神经元突触重塑 | 第27-28页 |
| 4.4 MYRF-1和MYRF-2功能冗余 | 第28-32页 |
| 4.4.1 myrf-1(ybq6);myrf-2(ybq42)的突触重塑受到阻断 | 第29-30页 |
| 4.4.2 myrf-1(ybq6); myrf-2(ybq43)的突触重塑受到阻断 | 第30-32页 |
| 4.4.3 MYRF-1和MYRF-2功能互补 | 第32页 |
| 4.5 MYRF-2缺失进一步增强myrf-1(ju1121)的突触重塑缺陷 | 第32-33页 |
| 4.6 过表达MYRF-2能够促进DD神经元突触重塑 | 第33-36页 |
| 4.6.1 过表达MYRF-2能恢复myrf-1(ju1121)的突触重塑 | 第33-34页 |
| 4.6.2 过表达MYRF-2能恢复myrf1(ybq6);myrf-2(ybq42)的突触重塑 | 第34-35页 |
| 4.6.3 过表达MYRF-2能使野生型线虫突触重塑提前 | 第35-36页 |
| 4.7 MYRF-1(G274R即ju1121)的抑制作用依赖于野生型MYRF-1表达量 | 第36-40页 |
| 4.7.1 在myrf-2缺失情况下,MYRF-1(G274R即ju1121)抑制突触重塑 | 第36-37页 |
| 4.7.2 在myrf-1功能缺失情况下,过表达MYRF-1(G274R即ju1121)抑制突触重塑 | 第37-38页 |
| 4.7.3 单拷贝MYRF-1无法挽救myrf1(ju1121)的突触重塑缺陷 | 第38-39页 |
| 4.7.4 在myrf1功能缺失情况下,单拷贝MYRF-1(G274R即ju1121)部分抑制突触重塑 | 第39-40页 |
| 4.8 N-MYRF-1(G274R即ju1121)的抑制作用依赖于野生型MYRF-1的表达量 | 第40-42页 |
| 4.8.1 在myrf-1功能缺失情况下,N-MYRF-1(G274R即ju1121)抑制突触重塑作用明显 | 第40-41页 |
| 4.8.2 在myrf-2功能缺失情况下,N-MYRF-1(G274R即ju1121)促进突触重塑 | 第41-42页 |
| 4.9 MYRF-1和MYRF-2能相互结合形成蛋白复合体 | 第42-43页 |
| 4.10 MYRF-1的自我剪切对DD神经元突触重塑是必需的 | 第43-44页 |
| 5 实验总结与讨论 | 第44-48页 |
| 5.1 实验总结 | 第44-46页 |
| 5.2 讨论 | 第46-48页 |
| 附录 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-51页 |
