| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第1章 前言 | 第12-28页 |
| 1.1 多巴胺的概述 | 第12页 |
| 1.2 酪氨酸羟化酶的概述 | 第12-17页 |
| 1.2.1 酪氨酸羟化酶的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.2.2 TH与神经性疾病发生的关系 | 第16-17页 |
| 1.3 雌激素相关受体的概述 | 第17-18页 |
| 1.4 蜕皮激素受体的概述 | 第18-19页 |
| 1.5 PvTH与PvERR和PvEcR的相关性 | 第19-20页 |
| 1.6 拟黑多刺蚁的概述 | 第20-23页 |
| 1.6.1 拟黑多刺蚁简介 | 第20-21页 |
| 1.6.2 拟黑多刺蚁的脑部结构 | 第21页 |
| 1.6.3 拟黑多刺蚁的腹部生殖系统 | 第21-23页 |
| 1.7 RNAi的概述 | 第23-24页 |
| 1.8 本实验的研究内容、创新性及技术路线 | 第24-28页 |
| 1.8.1 研究内容 | 第24-25页 |
| 1.8.2 拟解决的关键问题 | 第25页 |
| 1.8.3 本研究的特色与创新之处 | 第25-26页 |
| 1.8.4 本实验的技术路线图 | 第26-28页 |
| 第2章 原位杂交技术检测PvTH mRNA的组织分布 | 第28-36页 |
| 2.1 材料 | 第28-30页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第28页 |
| 2.1.2 原位杂交试剂盒 | 第28页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第28-29页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第29页 |
| 2.1.5 溶液配制 | 第29-30页 |
| 2.1.6 杂交探针序列 | 第30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-31页 |
| 2.2.1 取材和固定 | 第30页 |
| 2.2.2 组织脱水和OCT胶包埋 | 第30页 |
| 2.2.3 冰冻切片 | 第30页 |
| 2.2.4 原位杂交检测过程 | 第30-31页 |
| 2.3 实验结果 | 第31-33页 |
| 2.3.1 PvTH mRNA在拟黑多刺蚁脑部的定位表达分析 | 第31-32页 |
| 2.3.2 PvTH mRNA在拟黑多刺蚁腹部的定位表达分析 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-36页 |
| 第3章 免疫组织化学法检测PvTH蛋白的组织分布 | 第36-42页 |
| 3.1 材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 研究对象 | 第36页 |
| 3.1.2 SABC免疫组化染色试剂盒 | 第36页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第36-37页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第37页 |
| 3.1.5 溶液配制 | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-39页 |
| 3.2.1 取材和固定 | 第37页 |
| 3.2.2 组织脱水和OCT胶包埋 | 第37-38页 |
| 3.2.3 冰冻切片 | 第38页 |
| 3.2.4 免疫反应过程 | 第38-39页 |
| 3.3 实验结果 | 第39-40页 |
| 3.3.1 PvTH蛋白在拟黑多刺蚁脑部的定位表达分析 | 第39页 |
| 3.3.2 PvTH蛋白在拟黑多刺蚁腹部的定位表达分析 | 第39-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第4 Western-blot检测PvTH蛋白水平表达情况 | 第42-52页 |
| 4.1 材料 | 第42-43页 |
| 4.1.1 研究对象 | 第42页 |
| 4.1.2 主要仪器设备 | 第42页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第42-43页 |
| 4.1.4 溶液配制 | 第43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43-46页 |
| 4.2.1 提取各龄期虫体总蛋白及其浓度的测定 | 第43-45页 |
| 4.2.2 Western-blot | 第45-46页 |
| 4.3 实验结果 | 第46-49页 |
| 4.3.1 蛋白标准曲线的制作 | 第46-47页 |
| 4.3.2 抗体的检测 | 第47-48页 |
| 4.3.3 PvTH蛋白在拟黑多刺蚁不同发育阶段虫体内的表达情况 | 第48-49页 |
| 4.4 讨论 | 第49-52页 |
| 第5章 PvTH对拟黑多刺蚁生长发育的影响及其与PvERR和PvEcR的功能相关性 | 第52-80页 |
| 5.1 材料 | 第52-54页 |
| 5.1.1 研究对象 | 第52页 |
| 5.1.2 主要仪器设备 | 第52页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第52-53页 |
| 5.1.4 溶液配制 | 第53页 |
| 5.1.5 材料处理与器材准备 | 第53-54页 |
| 5.2 实验方法 | 第54-61页 |
| 5.2.1 Total RNA提取 | 第54页 |
| 5.2.2 Total RNA质量检测 | 第54-55页 |
| 5.2.3 第一链cDNA的合成 | 第55页 |
| 5.2.4 引物设计与合成 | 第55页 |
| 5.2.5 检测引物与PCR扩增 | 第55-56页 |
| 5.2.6 胶体回收与测序 | 第56-57页 |
| 5.2.7 RNA干扰 | 第57-61页 |
| 5.3 实验结果的处理与分析 | 第61-76页 |
| 5.3.1 Total RNA提取结果及其质量检测 | 第61-62页 |
| 5.3.2 引物检测及其Tm值的确定 | 第62页 |
| 5.3.3 含T7启动子序列引物的PCR扩增 | 第62-64页 |
| 5.3.4 dsRNA于环境中稳定性检测 | 第64页 |
| 5.3.5 PvTH-dsRNA干扰最佳浓度和时间的确定以及效率检测 | 第64-70页 |
| 5.3.6 PvTH-RNAi后PvERR和PvEcR mRNA的表达水平检测 | 第70-73页 |
| 5.3.7 原位杂交检测PvTH-RNAi后PvTH mRNA表达情况 | 第73-74页 |
| 5.3.8 免疫组化检测PvTH-RNAi后PvTH、PvERR和PvEcR蛋白的表达情况 | 第74-76页 |
| 5.3.9 PvTH-RNAi后拟黑多刺蚁不同发育阶段虫体外形的变化 | 第76页 |
| 5.4 讨论 | 第76-80页 |
| 总结 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-92页 |
| 附录 | 第92-130页 |
| 致谢 | 第130-132页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第132页 |
