| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第10-30页 |
| 1.1 猪瘟病毒概述 | 第10-11页 |
| 1.1.1 猪瘟病毒的病原学特征 | 第10页 |
| 1.1.2 猪瘟病毒的免疫逃避机制 | 第10-11页 |
| 1.2 干扰素刺激基因表达产物 | 第11-14页 |
| 1.2.1 干扰素系统概述 | 第11-12页 |
| 1.2.2 Mx GTPase系统 | 第12页 |
| 1.2.3 2',5'-OAS/RNase L通路 | 第12-13页 |
| 1.2.4 双链RNA依赖性蛋白激酶 | 第13-14页 |
| 1.2.5 类泛素修饰蛋白 | 第14页 |
| 1.3 类泛素修饰蛋白ISG15 | 第14-28页 |
| 1.3.1 ISG15的结构 | 第14-16页 |
| 1.3.2 ISG15的表达调控 | 第16-18页 |
| 1.3.3 ISG15的类泛素修饰系统 | 第18-21页 |
| 1.3.4 ISGJ5的抗病毒活性 | 第21-23页 |
| 1.3.5 ISG15的生物活性机制 | 第23-28页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第28-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-32页 |
| 2.1.1 细胞株、病毒株、质粒 | 第30页 |
| 2.1.2 抗体 | 第30页 |
| 2.1.3 主要试剂和材料 | 第30-31页 |
| 2.1.4 常用试剂及缓冲液的配制 | 第31页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第31-32页 |
| 2.2 技术路线 | 第32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-45页 |
| 2.3.1 干扰素对ISG15转录、翻译和修饰水平影响的测定 | 第32-39页 |
| 2.3.2 猪瘟病毒对ISG15转录、翻译和修饰水平影响的测定 | 第39-41页 |
| 2.3.3 过表达ISG15对猪瘟病毒影响的测定 | 第41-42页 |
| 2.3.4 猪瘟病毒调控ISG15途径的探索 | 第42-45页 |
| 第三章 结果与分析 | 第45-65页 |
| 3.1 干扰素对ISG15转录、翻译和修饰水平的影响 | 第45-49页 |
| 3.1.1 实时定量逆转录PCR(RQ-RT-PCR)测定干扰素对ISG15转录水平的影响 | 第45-47页 |
| 3.1.2 间接免疫荧光(IFA)测定干扰素对ISG15翻译水平的影响 | 第47页 |
| 3.1.3 流式细胞术(FCM)测定干扰素对ISG15翻译水平的影响 | 第47页 |
| 3.1.4 免疫印迹(Western-blot)测定干扰素对ISG15翻译、修饰水平的影响 | 第47-49页 |
| 3.2 猪瘟病毒对ISG15转录、翻译和修饰水平的影响 | 第49-56页 |
| 3.2.1 RQ-RT-PCR测定猪瘟病毒对ISG15转录水平的影响 | 第49-51页 |
| 3.2.2 IFA测定猪瘟病毒对ISG15翻译水平的影响 | 第51-52页 |
| 3.2.3 FCM测定猪瘟病毒对ISG15翻译水平的影响 | 第52页 |
| 3.2.4 Western-blot测定猪瘟病毒对ISG15翻译水平的影响 | 第52页 |
| 3.2.5 Western-blot测定猪瘟病毒对ISG15修饰水平的影响 | 第52-56页 |
| 3.3 过表达ISG15对猪瘟病毒的影响 | 第56-62页 |
| 3.3.1 测定过表达ISG15对猪瘟病毒RNA的影响 | 第56-57页 |
| 3.3.2 测定过表达ISG15对猪瘟病毒蛋白的影响 | 第57-60页 |
| 3.3.3 测定过表达ISG15对猪瘟病毒滴度的影响 | 第60-62页 |
| 3.4 猪瘟病毒调控ISG15的途径 | 第62-65页 |
| 3.4.1 测定灭活猪瘟病毒对ISG15翻译、修饰水平的影响 | 第62页 |
| 3.4.2 探索IRF3和NF-κB在猪瘟病毒调控ISG15途径中的作用 | 第62页 |
| 3.4.3 探索HDAC6在猪瘟病毒调控ISG15途径中的作用 | 第62-65页 |
| 第四章 讨论 | 第65-70页 |
| 4.1 干扰素对ISG15转录、翻译和修饰水平影响的测定 | 第65-66页 |
| 4.2 猪瘟病毒对ISG15转录、翻译和修饰水平影响的测定 | 第66-67页 |
| 4.3 过表达ISG15对猪瘟病毒影响的测定 | 第67-68页 |
| 4.4 猪瘟病毒调控ISG15途径的探索 | 第68-70页 |
| 第五章 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第82页 |
