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十字花科黑腐病菌中可能受感受蛋白XC3670调控的五个基因的分析

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-9页
1 第一章 前言第13-24页
    1.1 原核生物的基因表达调控第13-18页
        1.1.1 转录水平的基因表达调控第13-17页
        1.1.2 翻译水平的基因表达调控第17-18页
    1.2 原核生物响应环境的调控与双组分系统第18-20页
    1.3 十字花科黑腐病菌中的双组分系统的研究第20-23页
        1.3.1 十字花科黑腐病菌概述第20-21页
        1.3.2 Xcc中的双组分系统第21-23页
    1.4 本研究的目的、内容和意义第23-24页
        1.4.1 选题依据与研究目的第23页
        1.4.2 研究内容第23页
        1.4.3 研究意义第23-24页
2 第二章 材料与方法第24-45页
    2.1 菌株和质粒第24-25页
    2.2 常规微生物学实验操作第25-32页
        2.2.1 所用培养基第25-27页
        2.2.2 细菌的培养及保存第27页
        2.2.3 抗生素的使用第27-28页
        2.2.4 营养缺陷型的检测第28页
        2.2.5 胞外酶的平板检测第28-29页
        2.2.6 不同碳源的NCM平板检测第29页
        2.2.7 胞外多糖的检测第29-30页
        2.2.8 抗逆性的检测第30页
        2.2.9 生长曲线的测定第30-31页
        2.2.10 致病性检测第31页
        2.2.11 过敏反应检测第31-32页
    2.3 DNA分子操作技术第32-40页
        2.3.1 常用试剂、溶液或缓冲液的配制第32-33页
        2.3.2 Xcc总DNA的提取[66]第33页
        2.3.3 质粒的提取[65]第33-34页
        2.3.4 常规PCR第34-36页
        2.3.5 DNA的琼脂糖凝胶电泳第36页
        2.3.6 DNA的沉淀与纯化第36页
        2.3.7 限制性内切酶的酶切第36-37页
        2.3.8 DNA的连接第37页
        2.3.9 化学法感受态的制备第37页
        2.3.10 化学转化第37-38页
        2.3.11 三亲本接合实验第38页
        2.3.12 缺失突变体的构建第38-40页
        2.3.13 突变体的功能互补第40页
    2.4 GUS报告质粒的构建第40-42页
        2.4.1 报告质粒构建第40-41页
        2.4.2 β-葡糖醛酸酶(GUS)活性检测第41-42页
    2.5 RT-PCR第42-44页
        2.5.1 提取总RNA前的准备第42-43页
        2.5.2 Xcc总RNA提取第43页
        2.5.3 RNA电泳检测第43页
        2.5.4 RNA的纯化第43-44页
        2.5.5 RT-PCR第44页
    2.6 生物信息学分析第44-45页
3 第三章 实验结果第45-84页
    3.1 相关基因的筛选第45页
    3.2 XC1163的研究第45-54页
        3.2.1 XC1163的生物信息学分析第45-46页
        3.2.2 XC1163缺失突变体的构建第46-47页
        3.2.3 XC1163缺失突变体的表型分析第47-50页
        3.2.4 XC1163报告质粒构建及GUS酶活检测第50-54页
    3.3 XC1308的研究第54-62页
        3.3.1 XC1308的生物信息学分析第54-55页
        3.3.2 XC1308缺失突变体的构建及功能互补第55-56页
        3.3.3 XC1308的表型分析第56-61页
        3.3.4 XC1308与XC1309共转录的RT-PCR鉴定第61-62页
    3.4 XC2810的研究第62-69页
        3.4.1 XC2810的生物信息学分析第62-63页
        3.4.2 XC2810缺失突变体的构建第63-64页
        3.4.3 XC2810的表型分析第64-66页
        3.4.4 XC2810报告质粒构建及GUS酶活检测第66-69页
    3.5 XC2847的研究第69-76页
        3.5.1 XC2847的生物信息学分析第69页
        3.5.2 XC2847缺失突变体的构建及功能互补第69-71页
        3.5.3 XC2847的表型分析第71-74页
        3.5.4 XC2847报告质粒构建及GUS酶活检测第74-76页
    3.6 XC2921的研究第76-84页
        3.6.1 XC2921的生物信息学分析第76-77页
        3.6.2 XC2921缺失突变体的构建第77页
        3.6.3 XC2921的表型分析第77-80页
        3.6.4 YC2921报告质粒构建及GUS酶活检测第80-84页
4 第四章结论与讨论第84-88页
    4.1 XC1163的研究第84-85页
        4.1.1 XC1163的功能可能与抗逆性相关第84-85页
        4.1.2 XC1163被预测含有的σ70启动子的保守元件第85页
        4.1.3 XC1163在转录水平可能受到XC3670的间接的负调控第85页
    4.2 XC1308的研究第85-86页
        4.2.1 XC1308与胞外淀粉酶、纤维素酶、蛋白酶和胞外多糖的产量相关第85-86页
        4.2.2 XC1308与营养生长有一定的相关性第86页
        4.2.3 XC1308与XC1309共转录第86页
    4.3 XC2810的研究第86页
    4.4 XC2847的研究第86-87页
        4.4.1 XC2847与锰、镍、铜、镉、SDS抗性相关第86-87页
        4.4.2 XC2847与致病性有关第87页
        4.4.3 XC3670对XC2847的调控关系不明显第87页
    4.5 XC2921的研究第87-88页
5 参考文献第88-95页
6 致谢第95-96页
7 攻读硕士学位期间发表的学术论文第96页

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