| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 1 第一章 前言 | 第13-24页 |
| 1.1 原核生物的基因表达调控 | 第13-18页 |
| 1.1.1 转录水平的基因表达调控 | 第13-17页 |
| 1.1.2 翻译水平的基因表达调控 | 第17-18页 |
| 1.2 原核生物响应环境的调控与双组分系统 | 第18-20页 |
| 1.3 十字花科黑腐病菌中的双组分系统的研究 | 第20-23页 |
| 1.3.1 十字花科黑腐病菌概述 | 第20-21页 |
| 1.3.2 Xcc中的双组分系统 | 第21-23页 |
| 1.4 本研究的目的、内容和意义 | 第23-24页 |
| 1.4.1 选题依据与研究目的 | 第23页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第23页 |
| 1.4.3 研究意义 | 第23-24页 |
| 2 第二章 材料与方法 | 第24-45页 |
| 2.1 菌株和质粒 | 第24-25页 |
| 2.2 常规微生物学实验操作 | 第25-32页 |
| 2.2.1 所用培养基 | 第25-27页 |
| 2.2.2 细菌的培养及保存 | 第27页 |
| 2.2.3 抗生素的使用 | 第27-28页 |
| 2.2.4 营养缺陷型的检测 | 第28页 |
| 2.2.5 胞外酶的平板检测 | 第28-29页 |
| 2.2.6 不同碳源的NCM平板检测 | 第29页 |
| 2.2.7 胞外多糖的检测 | 第29-30页 |
| 2.2.8 抗逆性的检测 | 第30页 |
| 2.2.9 生长曲线的测定 | 第30-31页 |
| 2.2.10 致病性检测 | 第31页 |
| 2.2.11 过敏反应检测 | 第31-32页 |
| 2.3 DNA分子操作技术 | 第32-40页 |
| 2.3.1 常用试剂、溶液或缓冲液的配制 | 第32-33页 |
| 2.3.2 Xcc总DNA的提取[66] | 第33页 |
| 2.3.3 质粒的提取[65] | 第33-34页 |
| 2.3.4 常规PCR | 第34-36页 |
| 2.3.5 DNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第36页 |
| 2.3.6 DNA的沉淀与纯化 | 第36页 |
| 2.3.7 限制性内切酶的酶切 | 第36-37页 |
| 2.3.8 DNA的连接 | 第37页 |
| 2.3.9 化学法感受态的制备 | 第37页 |
| 2.3.10 化学转化 | 第37-38页 |
| 2.3.11 三亲本接合实验 | 第38页 |
| 2.3.12 缺失突变体的构建 | 第38-40页 |
| 2.3.13 突变体的功能互补 | 第40页 |
| 2.4 GUS报告质粒的构建 | 第40-42页 |
| 2.4.1 报告质粒构建 | 第40-41页 |
| 2.4.2 β-葡糖醛酸酶(GUS)活性检测 | 第41-42页 |
| 2.5 RT-PCR | 第42-44页 |
| 2.5.1 提取总RNA前的准备 | 第42-43页 |
| 2.5.2 Xcc总RNA提取 | 第43页 |
| 2.5.3 RNA电泳检测 | 第43页 |
| 2.5.4 RNA的纯化 | 第43-44页 |
| 2.5.5 RT-PCR | 第44页 |
| 2.6 生物信息学分析 | 第44-45页 |
| 3 第三章 实验结果 | 第45-84页 |
| 3.1 相关基因的筛选 | 第45页 |
| 3.2 XC1163的研究 | 第45-54页 |
| 3.2.1 XC1163的生物信息学分析 | 第45-46页 |
| 3.2.2 XC1163缺失突变体的构建 | 第46-47页 |
| 3.2.3 XC1163缺失突变体的表型分析 | 第47-50页 |
| 3.2.4 XC1163报告质粒构建及GUS酶活检测 | 第50-54页 |
| 3.3 XC1308的研究 | 第54-62页 |
| 3.3.1 XC1308的生物信息学分析 | 第54-55页 |
| 3.3.2 XC1308缺失突变体的构建及功能互补 | 第55-56页 |
| 3.3.3 XC1308的表型分析 | 第56-61页 |
| 3.3.4 XC1308与XC1309共转录的RT-PCR鉴定 | 第61-62页 |
| 3.4 XC2810的研究 | 第62-69页 |
| 3.4.1 XC2810的生物信息学分析 | 第62-63页 |
| 3.4.2 XC2810缺失突变体的构建 | 第63-64页 |
| 3.4.3 XC2810的表型分析 | 第64-66页 |
| 3.4.4 XC2810报告质粒构建及GUS酶活检测 | 第66-69页 |
| 3.5 XC2847的研究 | 第69-76页 |
| 3.5.1 XC2847的生物信息学分析 | 第69页 |
| 3.5.2 XC2847缺失突变体的构建及功能互补 | 第69-71页 |
| 3.5.3 XC2847的表型分析 | 第71-74页 |
| 3.5.4 XC2847报告质粒构建及GUS酶活检测 | 第74-76页 |
| 3.6 XC2921的研究 | 第76-84页 |
| 3.6.1 XC2921的生物信息学分析 | 第76-77页 |
| 3.6.2 XC2921缺失突变体的构建 | 第77页 |
| 3.6.3 XC2921的表型分析 | 第77-80页 |
| 3.6.4 YC2921报告质粒构建及GUS酶活检测 | 第80-84页 |
| 4 第四章结论与讨论 | 第84-88页 |
| 4.1 XC1163的研究 | 第84-85页 |
| 4.1.1 XC1163的功能可能与抗逆性相关 | 第84-85页 |
| 4.1.2 XC1163被预测含有的σ70启动子的保守元件 | 第85页 |
| 4.1.3 XC1163在转录水平可能受到XC3670的间接的负调控 | 第85页 |
| 4.2 XC1308的研究 | 第85-86页 |
| 4.2.1 XC1308与胞外淀粉酶、纤维素酶、蛋白酶和胞外多糖的产量相关 | 第85-86页 |
| 4.2.2 XC1308与营养生长有一定的相关性 | 第86页 |
| 4.2.3 XC1308与XC1309共转录 | 第86页 |
| 4.3 XC2810的研究 | 第86页 |
| 4.4 XC2847的研究 | 第86-87页 |
| 4.4.1 XC2847与锰、镍、铜、镉、SDS抗性相关 | 第86-87页 |
| 4.4.2 XC2847与致病性有关 | 第87页 |
| 4.4.3 XC3670对XC2847的调控关系不明显 | 第87页 |
| 4.5 XC2921的研究 | 第87-88页 |
| 5 参考文献 | 第88-95页 |
| 6 致谢 | 第95-96页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第96页 |
