分离蛋白质和核酸的自由流电泳芯片的研制
| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-26页 |
| 1.1 自由流电泳技术 | 第12-15页 |
| 1.2 影响自由流电泳稳定性的关键因素 | 第15-21页 |
| 1.2.1 气泡的影响 | 第15-18页 |
| 1.2.2 pH变化的影响 | 第18-19页 |
| 1.2.3 电渗流的影响 | 第19-20页 |
| 1.2.4 焦耳热的影响 | 第20-21页 |
| 1.3 自由流电泳在生命科学中的应用 | 第21-24页 |
| 1.3.1 在细胞筛选和富集中的应用 | 第21-22页 |
| 1.3.2 在核酸分析中的应用 | 第22页 |
| 1.3.3 在蛋白质组学研究中的应用 | 第22-23页 |
| 1.3.4 在空间生命科学中的应用 | 第23-24页 |
| 1.4 本课题主要研究内容和意义 | 第24-26页 |
| 第2章 实验 | 第26-39页 |
| 2.1 仪器、试剂与材料 | 第26-28页 |
| 2.1.1 仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.2 试剂与材料 | 第27-28页 |
| 2.2 细胞培养及全蛋白提取 | 第28-29页 |
| 2.2.1 Jurkat细胞的培养 | 第28页 |
| 2.2.2 Jurkat细胞全蛋白的提取 | 第28-29页 |
| 2.2.3 Jurkat细胞全蛋白浓度的测定 | 第29页 |
| 2.3 样品溶液的荧光标记 | 第29页 |
| 2.4 自由流电泳芯片的设计 | 第29-30页 |
| 2.5 芯片的制作 | 第30-33页 |
| 2.5.1 自由流电泳芯片的制作 | 第30-33页 |
| 2.5.2 一字形通道芯片的制作 | 第33页 |
| 2.6 实验平台的搭建 | 第33-35页 |
| 2.6.1 一字形通道芯片实验平台的搭建 | 第33-34页 |
| 2.6.2 自由流电泳芯片实验平台的搭建 | 第34-35页 |
| 2.7 芯片表面动态涂层的涂覆 | 第35页 |
| 2.8 电渗流的测量 | 第35-36页 |
| 2.9 自由流电泳芯片分离样品的离线检测 | 第36-37页 |
| 2.9.1 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第36-37页 |
| 2.9.2 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第37页 |
| 2.10 Jurkat细胞全蛋白等电点的测定 | 第37-39页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第39-59页 |
| 3.1 自由流电泳芯片的设计和制作 | 第39-43页 |
| 3.1.1 自由流电泳芯片的设计 | 第39-42页 |
| 3.1.2 自由流电泳芯片的制作 | 第42-43页 |
| 3.2 气泡对芯片性能稳定性的影响 | 第43-46页 |
| 3.3 电渗流对样品分离效果的影响 | 第46-49页 |
| 3.4 自由流电泳芯片分离条件对分离性能的影响 | 第49-53页 |
| 3.4.1 电场强度对分离性能的影响 | 第49-51页 |
| 3.4.2 样品流速对分离性能的影响 | 第51页 |
| 3.4.3 缓冲液pH对分离性能的影响 | 第51-52页 |
| 3.4.4 优化条件下蛋白质在芯片上的分离 | 第52-53页 |
| 3.5 自由流电泳芯片用于蛋白质与DNA的分离 | 第53-56页 |
| 3.5.1 标准蛋白质与DNA的分离 | 第53-54页 |
| 3.5.2 细胞提取物的分离 | 第54-56页 |
| 3.6 自由流电泳芯片分离样品的离线检测 | 第56-59页 |
| 结论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 附录 1 | 第69-71页 |
| 附录 2 | 第71-73页 |
| 攻读学位期间发表论文与研究成果清单 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
