| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-14页 |
| 缩略语 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-26页 |
| ·端粒和端粒酶概论 | 第15页 |
| ·端粒 | 第15-19页 |
| ·端粒的发现 | 第15-16页 |
| ·端粒的结构 | 第16页 |
| ·端粒的功能 | 第16-17页 |
| ·端粒相关结合蛋白及其与端粒功能丧失的关系 | 第17-19页 |
| ·端粒酶 | 第19-21页 |
| ·端粒酶的功能 | 第20页 |
| ·端粒酶的调控 | 第20页 |
| ·端粒酶组分突变的生物效应 | 第20-21页 |
| ·以端粒、端粒酶为靶标的肿瘤治疗 | 第21-24页 |
| ·基因治疗 | 第21-22页 |
| ·端粒酶(hTERT)免疫治疗 | 第22页 |
| ·小分子端粒酶抑制物 | 第22页 |
| ·G 四聚体反应物 | 第22-23页 |
| ·信号通路抑制物 | 第23页 |
| ·其它的抑制物 | 第23-24页 |
| ·腺病毒 | 第24-25页 |
| ·端粒、端粒酶与肿瘤治疗的前景 | 第25-26页 |
| 第二章 端粒酶RNA 亚基突变体的构建 | 第26-38页 |
| ·实验材料和试剂 | 第26页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·试剂配制 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-34页 |
| ·HeLa 细胞基因组DNA 的提取 | 第26-27页 |
| ·重叠延伸PCR 法获取并突变目的基因 | 第27-30页 |
| ·质粒pMD18-hTER(967)的构建 | 第30-32页 |
| ·质粒pMD18-hTER(588bp)的构建 | 第32-34页 |
| ·结果和分析 | 第34-36页 |
| ·细胞基因组DNA 的提取 | 第34页 |
| ·重叠延伸PCR 产物电泳结果 | 第34-35页 |
| ·pMD18-hTER(9676p)的PCR 及酶切鉴定 | 第35-36页 |
| ·pMD18-hTER(5886p)的PCR 及酶切鉴定 | 第36页 |
| ·小结与讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 hTERT 启动子控制的重组腺病毒穿梭载体的构建 | 第38-46页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-44页 |
| ·重组质粒pMD18-hTERT 的构建 | 第38-40页 |
| ·pCA13-hTERT 重组质粒的构建 | 第40-42页 |
| ·pCA13-hTERT-hTER 载体的构建 | 第42-44页 |
| ·结果及分析 | 第44-45页 |
| ·hTERT 启动子的克隆及pMD18-hTERT 的构建 | 第44-45页 |
| ·pCA13-hTERT-hTER 载体的构建 | 第45页 |
| ·小结与讨论 | 第45-46页 |
| 第四章 真核表达载体pcDNA3.1(-)-hTER 的构建及稳定HeLa 细胞株的建立 | 第46-55页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-52页 |
| ·真核表达载体pcDNA3.1(-)-hTER 的构建 | 第46-49页 |
| ·稳定转染HeLa 细胞株的建立 | 第49-50页 |
| ·Trizol 法提取HeLa 细胞总RNA | 第50页 |
| ·RT-PCR 检测目的基因的表达 | 第50-51页 |
| ·MTT 法绘制细胞生长曲线 | 第51页 |
| ·Hoechst 33342 染色观察凋亡细胞的形态 | 第51-52页 |
| ·结果及分析 | 第52-54页 |
| ·重组真核表达载体pcDNA3.1(-)-hTER 的构建 | 第52页 |
| ·RT-PCR 检测目的基因的表达 | 第52-53页 |
| ·MTT 法绘制细胞生长曲线 | 第53页 |
| ·Hoechst 33342 染色观察凋亡细胞的形态 | 第53-54页 |
| ·小结与讨论 | 第54-55页 |
| 全文小结 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 附录：学位论文发表情况 | 第63页 |
