| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 缩略语 | 第11-12页 |
| 第一章 translin 蛋白的研究进展 | 第12-18页 |
| 1 前言 | 第12-14页 |
| ·translin 蛋白的命名 | 第12页 |
| ·translin/TB-RBP 蛋白的基本结构 | 第12-14页 |
| ·translin/TB-RBP 蛋白家族结构域 | 第14页 |
| 2 translin/TB-RBP 的研究进展 | 第14-17页 |
| ·translin/TB-RBP 参与染色体的重组与修复 | 第15页 |
| ·translin/TB-RBP 与mRNA 的调节转录作用 | 第15-16页 |
| ·translin/TB-RBP 调节端粒的作用 | 第16页 |
| ·translin/TB-RBP 与细胞增殖 | 第16-17页 |
| 3 总结 | 第17-18页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第18-20页 |
| 1 课题意义 | 第18页 |
| 2 研究内容 | 第18-19页 |
| 3 实验流程 | 第19-20页 |
| 第三章 生物信息学分析 | 第20-27页 |
| 1 生物信息学工具 | 第20页 |
| 2 方法 | 第20-21页 |
| ·BmTLP 基因的获得 | 第20页 |
| ·BmTLP 基因的序列分析 | 第20-21页 |
| 3 结果 | 第21-25页 |
| ·BmTLP 的氨基酸序列 | 第21页 |
| ·BmTLP 蛋白疏水性分析 | 第21-22页 |
| ·BmTLP 蛋白二级结构预测 | 第22页 |
| ·BmTLP 蛋白高级结构预测 | 第22-23页 |
| ·BmTLP 的磷酸化位点分析 | 第23页 |
| ·BmTLP 信号肽分析 | 第23-24页 |
| ·BmTLP 氨基酸序列同源性分析 | 第24-25页 |
| ·translin 蛋白家族进化树构建 | 第25页 |
| 4 讨论 | 第25-27页 |
| 第四章 BmTLP 基因克隆、原核表达、纯化及抗体制备 | 第27-43页 |
| 1 材料与试剂 | 第27-30页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·主要试剂的配制 | 第27-30页 |
| 2 方法 | 第30-37页 |
| ·BmTLP 基因的克隆 | 第30-33页 |
| ·BmTLP 基因序列的测定 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的转化及鉴定 | 第34页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的表达 | 第34页 |
| ·SDS-PAGE 电泳分析 | 第34-35页 |
| ·融合蛋白的亲和层析 | 第35页 |
| ·Millipore 除盐浓缩 | 第35页 |
| ·融合蛋白的FPLC 纯化 | 第35-36页 |
| ·融合蛋白分子量的质谱鉴定 | 第36页 |
| ·抗体的制备 | 第36-37页 |
| ·抗体的效价测定 | 第37页 |
| ·抗体的纯化 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-41页 |
| ·BmTLP 基因克隆 | 第37-38页 |
| ·菌液PCR 结果 | 第38页 |
| ·重组质粒pET-28a-BmTLP 的鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组质粒测序结果 | 第39页 |
| ·pET-28a(+)-BmTLP 的诱导表达及纯化 | 第39页 |
| ·FPLC 分离纯化 | 第39-40页 |
| ·质谱分析 | 第40页 |
| ·抗体的效价测定 | 第40-41页 |
| ·抗体的纯化 | 第41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 第五章 BmTLP 组织定位 | 第43-53页 |
| 1 材料与试剂 | 第43-44页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·试剂 | 第43页 |
| ·试剂的配制 | 第43-44页 |
| 2 方法 | 第44-47页 |
| ·总RNA 的提取 | 第44页 |
| ·荧光定量PCR 引物的设计 | 第44-45页 |
| ·荧光定量PCR | 第45页 |
| ·荧光定量PCR 数据分析 | 第45-46页 |
| ·总蛋白质的提取及定量 | 第46页 |
| ·Western blotting 检测BmTLP 蛋白的分布 | 第46-47页 |
| ·Western blotting 检测BmTLP 蛋白在蚕蛹中存在形式 | 第47页 |
| 3 结果 | 第47-51页 |
| ·家蚕发育过程中BmTLP 的mRNA 量的变化 | 第47-48页 |
| ·家蚕发育过程中各个时期BmTLP 蛋白表达量的变化 | 第48-49页 |
| ·家蚕蛹中BmTLP 蛋白表达形式的鉴定 | 第49页 |
| ·BmTLP 在五龄幼虫各组织中mRNA 量的比较 | 第49-51页 |
| ·五龄幼虫各组织中BmTLP 表达量的比较 | 第51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 第六章 亚细胞定位 | 第53-57页 |
| 1 材料与试剂 | 第53-54页 |
| ·材料 | 第53页 |
| ·试剂与工具 | 第53页 |
| ·试剂的配制 | 第53-54页 |
| 2 方法 | 第54页 |
| 3 结果 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 总结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
