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茶树雌蕊自交和杂交的差异蛋白质组学初步研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
第一章 文献综述第11-23页
    1.1 植物自交不亲和性及其类型第11-12页
    1.2 植物自交不亲和性的形态解剖学研究进展第12-13页
        1.2.1 配子体自交不亲和的形态解剖学研究第12页
        1.2.2 孢子体自交不亲和的形态解剖学研究第12-13页
        1.2.3 茶树自交不亲和的形态解剖学研究第13页
    1.3 配子体自交不亲和性的分子机理研究进展第13-15页
        1.3.1 以S-RNAse为基础的SI信号转导第13-14页
        1.3.2 与花粉管胞质自由钙离子相关的GSI信号转导第14页
        1.3.3 茶树自交不亲和分子生物学研究进展第14-15页
    1.4 蛋白质组学研究技术概况第15-18页
        1.4.1 双向凝胶电泳第15-16页
        1.4.2 质谱技术第16-17页
        1.4.3 同位素标记技术第17-18页
        1.4.4 生物信息学第18页
    1.5 蛋白质组学在被子植物生殖发育研究中的应用第18-21页
        1.5.1 植物雌雄配子体发育的蛋白质组学研究第18-19页
        1.5.2 植物自交不亲和的蛋白质组学分析第19-20页
        1.5.3 植物受精后的蛋白质组学研究第20-21页
    1.6 本研究的目的及意义第21-23页
第二章 茶树雌蕊总蛋白质双向电泳体系的建立第23-35页
    2.1 材料与方法第23-28页
        2.1.1 试验材料第23页
        2.1.2 仪器与试剂第23-24页
        2.1.3 雌蕊总蛋白质提取方法第24-25页
        2.1.4 蛋白质沉淀的溶解第25页
        2.1.5 蛋白质浓度测定第25页
        2.1.6 双向电泳第25-27页
        2.1.7 凝胶染色第27-28页
        2.1.8 凝胶图像扫描与分析第28页
    2.2 结果与分析第28-33页
        2.2.1 三种提取方法的蛋白质得率分析第28页
        2.2.2 不同提取方法下蛋白质SDS-PAGE分离效果比较第28-29页
        2.2.3 不同浓度凝胶对双向电泳分离效果比较第29-30页
        2.2.4 不同聚焦程序对双向电泳分离效果比较第30-31页
        2.2.5 不同上样量对双向电泳分离效果的比较第31页
        2.2.6 不同胶条pH对双向电泳分离效果比较第31-33页
    2.3 讨论第33-35页
        2.3.1 蛋白质样品制备第33页
        2.3.2 等电聚焦程序第33页
        2.3.3 蛋白质等电点第33-35页
第三章 茶树自交和杂交后雌蕊差异蛋白分析第35-57页
    3.1 材料与方法第35-39页
        3.1.1 试验材料第35页
        3.1.2 主要生化试剂与仪器第35-36页
        3.1.3 雌蕊总蛋白质提取第36页
        3.1.4 蛋白质沉淀的溶解第36页
        3.1.5 蛋白质浓度测定第36-37页
        3.1.6 向电泳第37-38页
        3.1.7 凝胶染色第38页
        3.1.8 凝胶图像扫描及分析第38页
        3.1.9 蛋白质点的切取和胶内酶解第38-39页
        3.1.10 差异蛋白点MALDI-TOF/TOF分析第39页
    3.2 实验结果第39-47页
        3.2.1 蛋白质含量标准曲线第39-40页
        3.2.2 自交与杂交后雌蕊蛋白表达分析第40-42页
        3.2.3 自交与杂交后雌蕊蛋白差异表达分析第42-44页
        3.2.4 差异表达蛋白质点的质谱鉴定第44页
        3.2.5 差异表达蛋白质功能分类第44-47页
    3.3 讨论第47-57页
        3.3.1 鉴定蛋白质等电点和分子量实验值与理论值的比较第47-54页
        3.3.2 差异表达蛋白质与自交不亲和性的关系第54-57页
第四章 茶树自交后不同时间雌蕊蛋白质表达分析第57-73页
    4.1 材料与方法第57-58页
        4.1.1 实验材料第57页
        4.1.2 主要生化试剂与仪器第57页
        4.1.3 实验方法第57-58页
    4.2 实验结果第58-69页
        4.2.1 不同时期雌蕊蛋白质的差异表达分析第58-59页
        4.2.2 质谱鉴定的相关蛋白的功能分析第59-69页
    4.3 讨论第69-73页
        4.3.1 差异蛋白点在2-DE凝胶上的分布第69页
        4.3.2 雌蕊特异性伸展蛋白与自交不亲和性第69-70页
        4.3.3 胁迫应答与自交不亲和性第70页
        4.3.4 抑制蛋白与自交不亲和性第70-73页
第五章 总结与展望第73-75页
参考文献第75-83页
附录第83-85页
攻读学位期间发表的论文第85-87页
致谢第87页

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