摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
1.1 植物自交不亲和性及其类型 | 第11-12页 |
1.2 植物自交不亲和性的形态解剖学研究进展 | 第12-13页 |
1.2.1 配子体自交不亲和的形态解剖学研究 | 第12页 |
1.2.2 孢子体自交不亲和的形态解剖学研究 | 第12-13页 |
1.2.3 茶树自交不亲和的形态解剖学研究 | 第13页 |
1.3 配子体自交不亲和性的分子机理研究进展 | 第13-15页 |
1.3.1 以S-RNAse为基础的SI信号转导 | 第13-14页 |
1.3.2 与花粉管胞质自由钙离子相关的GSI信号转导 | 第14页 |
1.3.3 茶树自交不亲和分子生物学研究进展 | 第14-15页 |
1.4 蛋白质组学研究技术概况 | 第15-18页 |
1.4.1 双向凝胶电泳 | 第15-16页 |
1.4.2 质谱技术 | 第16-17页 |
1.4.3 同位素标记技术 | 第17-18页 |
1.4.4 生物信息学 | 第18页 |
1.5 蛋白质组学在被子植物生殖发育研究中的应用 | 第18-21页 |
1.5.1 植物雌雄配子体发育的蛋白质组学研究 | 第18-19页 |
1.5.2 植物自交不亲和的蛋白质组学分析 | 第19-20页 |
1.5.3 植物受精后的蛋白质组学研究 | 第20-21页 |
1.6 本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
第二章 茶树雌蕊总蛋白质双向电泳体系的建立 | 第23-35页 |
2.1 材料与方法 | 第23-28页 |
2.1.1 试验材料 | 第23页 |
2.1.2 仪器与试剂 | 第23-24页 |
2.1.3 雌蕊总蛋白质提取方法 | 第24-25页 |
2.1.4 蛋白质沉淀的溶解 | 第25页 |
2.1.5 蛋白质浓度测定 | 第25页 |
2.1.6 双向电泳 | 第25-27页 |
2.1.7 凝胶染色 | 第27-28页 |
2.1.8 凝胶图像扫描与分析 | 第28页 |
2.2 结果与分析 | 第28-33页 |
2.2.1 三种提取方法的蛋白质得率分析 | 第28页 |
2.2.2 不同提取方法下蛋白质SDS-PAGE分离效果比较 | 第28-29页 |
2.2.3 不同浓度凝胶对双向电泳分离效果比较 | 第29-30页 |
2.2.4 不同聚焦程序对双向电泳分离效果比较 | 第30-31页 |
2.2.5 不同上样量对双向电泳分离效果的比较 | 第31页 |
2.2.6 不同胶条pH对双向电泳分离效果比较 | 第31-33页 |
2.3 讨论 | 第33-35页 |
2.3.1 蛋白质样品制备 | 第33页 |
2.3.2 等电聚焦程序 | 第33页 |
2.3.3 蛋白质等电点 | 第33-35页 |
第三章 茶树自交和杂交后雌蕊差异蛋白分析 | 第35-57页 |
3.1 材料与方法 | 第35-39页 |
3.1.1 试验材料 | 第35页 |
3.1.2 主要生化试剂与仪器 | 第35-36页 |
3.1.3 雌蕊总蛋白质提取 | 第36页 |
3.1.4 蛋白质沉淀的溶解 | 第36页 |
3.1.5 蛋白质浓度测定 | 第36-37页 |
3.1.6 向电泳 | 第37-38页 |
3.1.7 凝胶染色 | 第38页 |
3.1.8 凝胶图像扫描及分析 | 第38页 |
3.1.9 蛋白质点的切取和胶内酶解 | 第38-39页 |
3.1.10 差异蛋白点MALDI-TOF/TOF分析 | 第39页 |
3.2 实验结果 | 第39-47页 |
3.2.1 蛋白质含量标准曲线 | 第39-40页 |
3.2.2 自交与杂交后雌蕊蛋白表达分析 | 第40-42页 |
3.2.3 自交与杂交后雌蕊蛋白差异表达分析 | 第42-44页 |
3.2.4 差异表达蛋白质点的质谱鉴定 | 第44页 |
3.2.5 差异表达蛋白质功能分类 | 第44-47页 |
3.3 讨论 | 第47-57页 |
3.3.1 鉴定蛋白质等电点和分子量实验值与理论值的比较 | 第47-54页 |
3.3.2 差异表达蛋白质与自交不亲和性的关系 | 第54-57页 |
第四章 茶树自交后不同时间雌蕊蛋白质表达分析 | 第57-73页 |
4.1 材料与方法 | 第57-58页 |
4.1.1 实验材料 | 第57页 |
4.1.2 主要生化试剂与仪器 | 第57页 |
4.1.3 实验方法 | 第57-58页 |
4.2 实验结果 | 第58-69页 |
4.2.1 不同时期雌蕊蛋白质的差异表达分析 | 第58-59页 |
4.2.2 质谱鉴定的相关蛋白的功能分析 | 第59-69页 |
4.3 讨论 | 第69-73页 |
4.3.1 差异蛋白点在2-DE凝胶上的分布 | 第69页 |
4.3.2 雌蕊特异性伸展蛋白与自交不亲和性 | 第69-70页 |
4.3.3 胁迫应答与自交不亲和性 | 第70页 |
4.3.4 抑制蛋白与自交不亲和性 | 第70-73页 |
第五章 总结与展望 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-83页 |
附录 | 第83-85页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第85-87页 |
致谢 | 第87页 |